Левзея
СоставВ состав корней левзеи входят:
-
Дубильные вещества – помогают снять воспаление, остановить развитие инфекционных процессов.
-
Алкалоиды – тонизируют, помогают поднять работоспособность, снижают влияние стресса на организм.
-
Каротин – улучшает состояние сосудов, тканей, имеет антиоксидантный эффект, помогает бороться с накоплением свободных радикалов.
-
Инулин – природный пребиотик, стимулирующий пищеварение, способствующий усвоению полезных веществ из пищи, укрепляющий иммунную систему.
-
Улучшает состояние клеток, укрепляет стенки сосудов.
Также в состав входят эфирные масла, смолы, флавоноиды.
Свойства
Препараты на основе левзеи способствуют улучшению кровотока и питания головного мозга, поддержанию нормального давления, метаболизма, позволяют организму адаптироваться при резком изменении климата или характера нагрузок. Левзея помогает улучшить эректильную функцию, стабилизировать психологическое состояние при лечении алкогольной зависимости, табакокурения, нормализовать работу почек и печени. Применение экстрактов и настоев благоприятно сказывается на составе крови, служит профилактикой образования холестериновых отложений на стенках сосудов.
Основные эффекты левзеи:
-
Тонизирующее и стимулирующее действие на ЦНС. Левзея способствует снятию раздражительности, повышению внимательности, улучшению памяти.
-
Снижение утомляемости при физической и умственной работе.
Вещества в составе растения помогают бороться с хронической усталостью, легче переносить монотонную нагрузку.
-
Адаптогенное действие. Препараты левзеи помогают реагировать на изменение внешних условий, легче с ними справляться, давать иммунный ответ.
-
Улучшение состава крови. При приеме растения снижается концентрация холестерина, нормализуется концентрация гемоглобина, эритроцитов, снижается риск развития анемий.
-
Повышение кровотока в мелких сосудах, что хорошо влияет на зрение, внутренние органы.
-
Снятие спазмов при мышечных, головных болях и болях в кишечнике.
Левзея повышает интенсивность секреции в половых железах, способствуя восстановлению нормальной потенции, регулирует давление при гипотензии.
Экстракт левзеи помогает накопить аденозинтрифосфорную кислоту и гликоген в печени, скелетных мышцах и сердце. Эти вещества необходимы для получения энергии во время высоких нагрузок. За счет улучшения обмена веществ ускоряется вывод молочной кислоты из мышц, что помогает спортсменам быстрее восстанавливаться после тренировок.
Таблетки и жидкие формы препаратов способствуют поддержанию в норме уровня глюкозы в крови во время выброса адреналина, а также препятствуют развитию гипогликемий при инсулинотерапии.
Формы выпуска и прием
На основе левзеи выпускаются бальзамы, настои, эликсиры, экстракты, таблетки и капсулы. Растение часто входит в состав общеукрепляющих средств, лечебных сиропов, стимулирующих препаратов, витаминов и добавок для мужчин.
-
Жидкие настои, эликсиры, бальзамы можно добавлять в чай. Они приятны на вкус, хорошо усваиваются, подходят для тех, кому сложно проглотить таблетку или капсулу. Можно принимать курсами или по мере необходимости.
-
Твердые формы содержат сбалансированный подбор веществ в точной дозировке.
Рекомендуется курсовой прием по 30 дней с перерывом 60-90 дней.
Наиболее эффективно полезные соединения усваиваются при приеме добавок с левзеей во время еды или сразу после. Из-за возбуждающего и тонизирующего эффекта средства желательно употреблять в первой половине дня.
Противопоказания и побочные действия
Стойких противопоказаний добавки и препараты с левзеей не имеют. Прием не рекомендуется при:
Длительное употребление и превышение дозировок могут привести к нарушению работы сердца, повышению давления, расстройствам пищеварения.
Левзеи экстракт жидкий | Leuzeae extract fluid — описание препарата, ⚕️ инструкция по применению, противопоказания, отзывы | 🧾 Аналоги для Левзеи экстракт жидкий
i Аналоги:
- Биоарон
- Вигор
- Вивабон
- Ван-Би
- Авиценна
- Кедровит
- Трекрезан
- Ладастен
Левзеи экстракт жидкий – описание
iПоказания к применению:
– В составе комбинированной терапии: астения, физическое и – умственное переутомление, снижение потенции, период реконвалесценции.
[ads-mob-1]
iСпособ применения и дозировки:
Принимают внутрь. Капли и экстракт для приема внутрь: по 20-30 кап. 2-3 раза/сут, во время еды. Сырье растительное (брикеты): 1 г сырья (2 брикета) заливают 200 мл воды, нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, оставшееся сырье отжимают и доводят объем до 200 мл. Настой принимают по 100 мл до еды утром и днем. Курс лечения – 2-3 нед.
iПротивопоказания:
– Артериальная гипертензия
– Аритмии
– Острый период инфекционных заболеваний
– Повышенная нервная возбудимость
– Эпилепсия
– Нарушения сна, хронические заболевания печени и почек, хронический алкоголизм (для лекарственных форм, содержащих этанол)
– Беременность, период лактации, детский возраст (до 12 лет)
– Повышенная чувствительность к растительному средству.
[ads-mob-2]
iФармакологическое действие:
Средство растительного происхождения, оказывает адаптогенное и общетонизирующее действие. Способствует накоплению гликогена и АТФ в скелетных мышцах, печени и сердце, снижает концентрацию глюкозы при адреналиновой гипергликемии и препятствует развитию гипогликемии при введении инсулина. Обладает гиполипидемическим и антигипоксическим свойствами, повышает устойчивость организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды, к физическим нагрузкам. Повышает умственную работоспособность, снижает утомляемость, улучшает память, потенцию, повышает способность к концентрации внимания.
iПобочные действия:
– Возможно: повышение АД, головная боль, раздражительность, бессонница, диспепсия
– Аллергические реакции.
iФорма выпуска препарата:
Экстракт для приема внутрь (жидкий) 1 л
корневища с корнями левзеи сафлоровидной 1 кг.
Данная страница носит информационный характер! Описание препарата Левзеи экстракт жидкий не должно использоваться пациентами для принятия самостоятельного решения об их применении. Решение о назначении препарата и способе его применения принимается только лечащим врачом в результате очной консультации.
Поделиться ссылкой:
Полезно! БесполезноНавигация по записям
Левзея — описание ингредиента, инструкция по применению, показания и противопоказания
Описание левзеи
Левзея – растение семейства Астровые, произрастающее на Алтае. Ее высота может доходить до 2 м, но обычно не превышает 100 см. Стебли прямостоячие, не ветвистые. Цветы фиолетовые. Корневище имеет много отростков и разрастается в ширину. В качестве лечебного сырья используют корень.
Состав экстракта
Химический состав корневища левзеи представлен:
- дубильными веществами, оказывающими противовоспалительное и антиинфекционное действие;
- алкалоидами, проявляющими тонизирующую и антистрессовую активность;
- каротином – природным антиоксидантом;
- инулином – пребиотиком и стимулятором пищеварения;
- витамином C – мощным антиоксидантом и участником обменных процессов;
- флавоноидами – антиоксидантами;
- эфирным маслом, обладающим антисклеротическим, обезболивающим и спазмолитическим действием.
Фармакологические свойства
Препараты левзеи улучшают кровообращение головного мозга, восстанавливают обменные процессы, оптимизируют кровяное давление и повышают адаптационные способности организма.
Улучшение кровотока благоприятно сказывается на зрении и функционировании внутренних органов. Лекарственное растение также улучшает эректильную функцию, работу печени и почек.Поскольку левзея тонизирует и стимулирует центральную нервную систему, можно использовать ее для стабилизации психического состояния и предупреждения эмоциональных срывов в период избавления от табачной или алкогольной зависимости. Она снимает раздражительность, повышает память и внимательность.
Левзея благоприятно влияет на состав крови и предупреждает формирование атеросклеротических бляшек на сосудистых стенках. Активные компоненты растения повышают работоспособность, что позволяет легче переносить тяжелые физические и интеллектуальные нагрузки.
Растение оптимизирует состав крови. При его регулярном приеме в крови понижается уровень холестерина, оптимизируется концентрация эритроцитов и гемоглобина.
Экстракты левзеи стимулируют секрецию половых гормонов, что помогает восстановить потенцию и нормализовать давление при гипотензии. Они обеспечивают накопление в организме АТФ и гликогена, которые необходимы для высвобождения энергии во время интенсивных нагрузок. В результате улучшения метаболизма из мышечной массы быстрее выводится молочная кислота, что ускоряет восстановление после тренировки.
Внимание! Левзею используют для поддержания нормального уровню глюкозы при выбросе адреналина, что не дает развиться гипогликемии при инсулинотерапии.
Применение левзеи
Левзею можно приобрести в виде капсул, таблеток, бальзама, эликсира, настоя, экстракта. Ее включают в рецептуры лекарственных сиропов, общеукрепляющих и стимулирующих препаратов.
Настои, бальзамы и эликсиры можно пить как самостоятельное лекарство или добавляя в чай. Они имеют приятный вкус и хорошо усваиваются за счет жидкой формы. Твердые препараты левзеи принимают курсами: по 1 месяцу с перерывами в 1–1,5 месяца. Дозировка зависит от вида средства.
Чтобы активные компоненты левзеи лучше усвоились, стоит принимать ее в процессе или сразу после еды. Поскольку она возбуждает и тонизирует центральную нервную систему, не стоит осуществлять ее прием во второй половине дня.
Противопоказания
Левзея противопоказана при непереносимости компонентов, бессоннице, гипертонии. Длительное применение препаратов и народных средств на ее основе может быть чревато нарушением работы сердца, расстройством пищеварения и повышением артериального давления.
Левзея фл.(р-р орал.) 50мл — инструкция по применению, описание, противопоказания, побочные действия, передозировка, состав
Описание состава и формы выпускаЭкстракт для приема внутрь (жидкий) | 1 л |
корневища с корнями левзеи сафлоровидной | 1 кг |
50 мл — флаконы темного стекла (1) — пачки картонные.
Средство растительного происхождения, оказывает адаптогенное и общетонизирующее действие. Способствует накоплению гликогена и АТФ в скелетных мышцах, печени и сердце, снижает концентрацию глюкозы при адреналиновой гипергликемии и препятствует развитию гипогликемии при введении инсулина. Обладает гиполипидемическим и антигипоксическим свойствами, повышает устойчивость организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды, к физическим нагрузкам. Повышает умственную работоспособность, снижает утомляемость, улучшает память, потенцию, повышает способность к концентрации внимания.
Режим дозированияПринимают внутрь. Капли и экстракт для приема внутрь: по 20-30 кап. 2-3 раза/сут, во время еды. Сырье растительное (брикеты): 1 г сырья (2 брикета) заливают 200 мл воды, нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, оставшееся сырье отжимают и доводят объем до 200 мл. Настой принимают по 100 мл до еды утром и днем. Курс лечения — 2-3 нед.
Противопоказан при беременности и в период лактации.
Побочное действиеВозможно: повышение АД, головная боль, раздражительность, бессонница, диспепсия; аллергические реакции.
Показания к применениюВ составе комбинированной терапии: астения, физическое и умственное переутомление, снижение потенции, период реконвалесценции.
Противопоказания к применениюАртериальная гипертензия, аритмии, острый период инфекционных заболеваний, повышенная нервная возбудимость, эпилепсия, нарушения сна, хронические заболевания печени и почек, хронический алкоголизм (для лекарственных форм, содержащих этанол), беременность, период лактации, детский возраст (до 12 лет), повышенная чувствительность к растительному средству.
Особые указанияВо избежание нарушения сна не следует применять во второй половине дня, позднее чем за 3-4 ч до сна.
Применение при нарушениях функции почекПротивопоказан при хронических заболеваниях почек.
Противопоказан при хронических заболеваниях печени.
Применение у детейПротивопоказан в детском возрасте до 12 лет.
дозировка, передозировка и возможные отрицательные последствия
38. Дозировка, Передозировка,Возможные отрицательные последствия Левзея — легенда древней восточной медицины, включен в фармакопею 15 государств
Широко и давно используется в Спорте, Медицине, Науке и Домашней Практике
А также в животноводстве и ветеринарии (птицы, свиньи, КРС, лошади и т.д.)
Не содержит токсичных веществ, совмещается с алкоголем и лекарствами
В официальной медицине применяется от сердечно-сосудистых и раковых болезней
Устраняет головные и сердечные боли, нормализует артериальное давление
Восстанавливает и защищает печень, почки, сердце, мозг и мышцы
Прием Заказов на Семена, Корни, Левзею-порошок, а также аналог-Серпуху
ДОЗИРОВКА ПРОДУКТА «ЛЕВЗЕЯ-ПОРОШОК» (из Leuzea, Rhaponticum)
Продукт из Левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) характеризуется значительной широтой оптимальных дозировок. Разовая доза, используемая в профилактических целях, равна 25 мг; лечебная доза – 25-50 мг; спортивная доза может достигать 100 мг и выше. Сравнительные величины доз приведены на рисунке (25 мг — величиной с горошину черного перца).
Левзея употребляется перорально – в виде сухого порошка “под язык” (сублингвально), или, заваривая кипятком, в качестве добавки к черному чаю, в виде фиточая совместно с другими лекарственными травами, а также в качестве спиртовых экстрактов и настоев (в соотношении 1:20…1:100 – масса/объем).
Исходя из необходимости, левзею можно принимать в любое время суток. Принимают поздно вечером, если предстоит работа в ночное время и нужно снять сонливость и усталость, сохранить высокую работоспособность. Если Вы чувствуете, что начинаете заболевать, принимайте чаще – через каждые 3-4 часа.
При вирусной и бактериальной интоксикации, алкогольном опьянении, в случае болезни разовую дозу левзеи-порошка (25 мг) целесообразно увеличить в 2-3 раза. Для спортсменов с высоким уровнем метаболических процессов дозы постепенно могут быть увеличены в 4-10 раз. При этом большие дозы должны сочетаться с адекватным увеличением физических нагрузок на организм. Длительность приема не ограничена – от 2-3 до 10 лет.
Как правило, единовременно используются 1-2 дозы – утром, днем и вечером. Длительность приема для достижения значимого эффекта составляет 7 (1-10 дней). Разовый курс приема, в зависимости от величины и частоты доз, может достигать 30-60 дней, после чего рекомендуется делать перерыв на 30 (10-60) дней. Эффект физиологического последействия на организм человека составляет 1.5-2.0 месяца.
ПЕРЕДОЗИРОВКА
Лекарственный и иммуно-стимулирующий эффект Левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) не увеличивается пропорционально повышению дозы. Кратковременная или разовая передозировка без необходимости не приносит вреда, но и не помогает.
Диапазон кратности доз, при которых стимулирующий эффект малых доз меняется на противоположный тормозящий, достигает 200 раз. Высшая разовая доза равна 5-7 г.
Отрицательный эффект передозировки препарата из надземных частей (листьев левзеи) у подопытных крыс наступает при приеме 20 % от массы тела, при этом наблюдаются кратковременные расстройства органов чувств.
ВОЗМОЖНЫЕ ОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ
При длительном приеме высоких доз Левзеи (главным образом корней и корневищ, которые могут содержат полиацетиленовые фототоксичные соединения и плесневые грибки) редко, но могут наблюдаться побочные явления в виде индивидуальной непереносимости – тошнота, диарея, рвота, ощущение сухости во рту.
Примечание. Информацию по побочным химическим веществам, содержащихся в корнях и корневищах левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) Вы можете найти по списку, изложенному на странице сайта: «Электронные библиотеки «
Симптомами передозировки (обычно это спиртовые экстракты из сомнительных источников, загрязненность которых визуально не обнаруживается) являются: повышенная раздражительность, нарушения сна, учащенное сердцебиение, психическая депрессия. При побочных отрицательных действиях показано немедленное промывание желудка, затем – симптоматическое лечение. Тяжелые отравления, аналогичные при приеме других адаптогенов (жень-шень, родиола розовая и т.д.) в литературе не описаны.
Следует подходить осторожно (под наблюдением врача) к применению левзеи сафлоровидной при лечении больных с тяжелыми хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой системы (артериальная гипертония тяжелой формы, аритмия), острыми инфекционными заболеваниями, хроническими заболеваниями почек, печени в фазе декомпенсации, психических заболеваний органического генеза, психозов.
Подбор дозы рекомендуется проводить индивидуально, ежедневно прибавляя или убавляя дозу препарата на 10-20 %, постоянно контролируя самочувствие, советуясь с лечащим врачом.
Особенности и различия препаратов из Левзеи, Технология Производства и их Активность описаны на страницах нашего сайта «Экдистен, Левзея и Маралий корень: Заказы, Технология, Дозировка и Активность — Ecdystenum, Rhaponticum-Leuzea and Maral root: Orders, Technology, Dosage, Activity»:
Дополнительная информация по другим Инструкциям (по Серпухе, использованию Левзеи в животноводстве) будет приведена в ближайшее время – следите в разделе «Новости»
ВЫСЫЛАЮТСЯ — Семена и Левзея-порошок для Спорта, Медицины и Домашней Практики
ЗАЯВКИ — Подавать по Электронной Форме: https://leuzea. ru/forms/leuzea_order.htm
Ваши письма по адресу: https://levzea.com
Левзея сафлоровидная: полезные свойства и противопоказания
© Ruvo233 — depositphotos.com
Левзея – природный растительный анаболик, содержащий экдизоны. Препараты на основе левзеи успешно заменяет аналогичные препараты синтетического происхождения, поэтому активно используется в спорте и медицине для строительства белковых молекул. Экдизоны – соединения, напоминающее по своему строению и функциям стероиды или фитогормоны. Вещества получают из надземных и подземных частей растения. Экдизоны входят в число основных компонентов многих препаратов для спортивного питания.
Общая информация
Левзея (большеголовник, рапонтикум, стемаканта, маралий корень) красивое многолетнее растение семейства астровых с необычными цветками куполовидной формы и ребристыми стеблями. Напоминает чертополох, но в отличие от него лишена колючек. Этот долгожитель среди трав способен жить сто лет. У нее мощный корень и крупные нижние листья, накапливающие гормональную составляющую. В высоту цветок вырастает до двух метров. Соцветие – фиолетовая или лиловая трубчатая корзинка.
Ничем особенным от своих «родственников» не отличается, но привлекает животных как лечебное средство. В Сибири ей лечатся олени, поэтому там ее называют маральим корнем и считают, что она может чудодейственным образом излечить от 14 болезней, поскольку проявляет тонизирующие и общеукрепляющие свойства. Растет левзея и в горах Алтая, Средней Азии.
Собирают ее в возрасте трех-четырех лет. Это пик концентрации полезных компонентов. Хранятся корневища не более двух лет.
Ученые Томского университета провели не одно клиническое испытание фармакологических и фармакогностических свойств растения, на основании которых с 1961 года препараты левзеи входят в Государственную Фармакопею России.
© Nikolay_Donetsk — depositphotos.com. Корень левзеи
Свойства
Левзея сафлоровидная имеет уникальный состав: множество эфиров, смол, дубильные вещества, алкалоиды витамина C, A, антрахионы (перистальтические детоксиканты), природный психостимулятор инокостерон, инулин, кумарины, антоцианы, флавоноиды, лимонная, янтарная, щавелевая кислота, камедь, катехины, ретинол, минералы, фосфор, кальций, мышьяк.
Такой набор биологически активных веществ наделяет растение мощным действием на организм человека. Однако основа этого влияния – инокостерон и эдистерон.
Благодаря им большеголовник:
- Оказывает общеукрепляющее действие, повышает выносливость.
- Противостоит кахексии разного генеза.
- Тонизирует организм.
- Улучшает потенцию.
- Стимулирует либидо.
- Активирует иммунитет на разных уровнях.
- Понижает сахар крови.
- Расширяет сосуды, нормализует АД.
- Ускоряет кровоток.
- Благотворно влияет на нервную систему, снимает раздражительность, усталость, утомляемость.
- Способствует регенерации кожи и стимулирует остеосинтез.
- Восстанавливает нормальные параметры крови.
- Блокирует рост опухолей.
- Лечит алкоголизм.
По сути, левзея – настоящий природный адаптоген.
Использование в разных отраслях
Растение востребовано в медицине, косметологии и дерматологии, используется в ароматерапии и бодибилдинге.
Дерматокосметология
В косметологии обратили внимание на способность экстракта рапонтикума активировать электролитный и кислородный обмен клеток дермы. Поэтому экстракт выступает составляющим элементом многих кремов, лосьонов, сывороток, тоников. Проявляется его действие омоложением кожи, регенерацией, разглаживанием морщин.
Каждый практикующий дерматолог или косметолог имеют в своем багаже собственный рецепт омолаживающей композиции, которая включает в разных пропорциях и комбинациях: спиртовой экстракт левзеи, чистотела, таволги, плаценты; эфиры жасмина, иланг-иланга, гвоздики, нероли, розы, пачули – коло 0,7% к общему объему. Такой раствор отбеливает, омолаживает, увлажняет.
Дерматологи борются с помощью эфирных масел растения с невротическим дерматитом, добавляя их в тонизирующие сыворотки и гели. Обычный отвар из маральего корня выполняет роль тоника в ежедневном уходе. Если его заморозить и использовать по утрам, эффект будет выраженным и длительным. Отвары левзеи используются и для лечения волос. Растение стимулирует рост стержней, укрепляет луковицы, предупреждает облысение. Нужно всего лишь ополаскивать волосы после каждого мытья.
Особенной эффективностью отличается маска для волос. Ее несложно приготовить самостоятельно: большую ложку оливкового масла, желток и несколько капель масла рапонтикума смешивают и наносят по всей длине волос на 20 минут перед мытьем головы.
© Nikolay_Donetsk — depositphotos.com
Ароматерапия
Ароматерапевты советуют добавлять эфир растения в аромалампы и медальоны. Кроме того, он отлично подходит для локального массажа: способствует концентрации, снимает раздражительность, переутомление, нормализует сон, активирует память, восстанавливает зрение – выполняет все функции адаптогена.
Применяют эфир большеголовника и при похмелье, мигрени, длительной работе за компьютером, курении кальяна, аромаванночек и ингаляций.
Пищевая промышленность
Левзея в составе тонизирующих российских напитков стала достойным ответом западным аналогам. Байкал, Саяны, Тархун – напитки из Черноголовки, которые сегодня успешно завоевывают внутренний рынок, восстанавливая былую славу и вытесняя Кока-колу, Пепси и прочий импорт. Кроме того, рапонтикум добавляют в джемы, мед, выпечку, хлеб.
Медицина
Ходят легенды о том, как чудодейственно быстро левзея восстанавливает силы, насыщает организм энергией. Мы упомянули 14 болезней которые лечит маралий корень. Вот они:
- Неврастения, расстройства ЦНС любого генеза.
- Синдром хронической усталости, депрессия.
- Бессонница.
- Мигрень.
- Отсутствие аппетита.
- Импотенция, эректильная дисфункция.
- Вегетососудистая дистония, гипотония и постоянное чувство слабости.
- Алкоголизм.
- Стеноз периферических сосудов, замедление кровотока.
- Низкая работоспособность.
- Трофические язвы.
- Воспалительные заболевания женской половой сферы, ПМС, вторичное бесплодие.
- Болезни системы кроветворения.
- Варикоз.
Основа терапии – его энергетическое действие. Растение буквально реанимирует пораженные клетки, возвращая им жизненные силы. Поэтому при лечении прежде всего используют именно стимулирующие способности растения, его адаптогенные и психотропные свойства. Это они воздействуют на патологии, спровоцированные нарушениями в работе ЦНС и сердечно-сосудистой системы.
© cheri131 — depositphotos.com
Большеголовник в спорте
Природный адаптоген имеет определенные показания к применению при спортивных тренировках:
- Наращивание мускулатуры.
- Коррекция метаболизма сердечной мышцы.
- Профилактика и лечение перетренированности.
- Восстановление гепатоцитов в комплексе с гепатопротекторами.
- Купирование анемии в сочетании с препаратами железа.
- Повышение потенции.
- Период акклиматизации.
- Реконвалесценция – ускоряет время выздоровления.
Левзея стимулирует выносливость спортсменов и повышает их адаптационные возможности при перегрузках.
Это дает гарантию достижения высоких результатов в спорте. Прилив сил и энергии – мотивация к увеличению тренировочных нагрузок.
Помимо этого, большеголовник ускоряет реабилитацию после тренировок, благодаря стимуляции окислительно-восстановительных процессов, выведению токсинов молочной и пировиноградной кислоты – основной причины усталости после тренировки.
Препараты растения аккумулируют гликоген в печени и миокарде, который выступает основным топливом для мускулов. Только после его полного расходования в игру вступают аминокислоты и жирные кислоты, способствующие росту мышц. У левзеи есть еще одно свойство, делающее ее незаменимой во время тренировки. В терапевтических дозах она совершенно безопасна ввиду своего природного происхождения.
Принимают маралий корень в виде спиртовой настойки в пропорции 1:10, по большой ложке, трижды в день перед приемом пищи. Или в таблетках, с добавлением аскорбинки. Максимальная длительность курса – 3 месяца.
Препараты:
- Левзея П – таблетки, стимулирующие работу пищеварительной, эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной и иммунной систем. Это в свою очередь приводит к активации процессов саморегуляции и восстановлению необходимого баланса жизненно важных функций организма. Корректирует дезадаптацию. Попутно улучшает мозговую деятельность, концентрацию внимания и насыщает ткани микроэлементами и витаминами. Есть и противопоказания: индивидуальная непереносимость, инфекции, ХБП.
- Экдистен – оказывает тонизирующее действие, способствует синтезу белковых молекул, то есть наращиванию мышечной массы. Выпускается в таблетках, устраняет астению и астенодепрессию. В отличие от синтетических стероидов не влияет на кору надпочечников. Противопоказан при гипертонии и гиперкинезии.
Силовые тренировки
Маралий корень – природный анаболиком с эффектом фитостероидов благодаря содержанию экдизонов в составе. Свойства этих соединений и используются в силовых тренировках. Растительные гормоны в разы усиливают белковый синтез, наращивая мускулы, укрепляя миокард, печень, почки. В свою очередь, это приводит к росту выносливости спортсмена. Кроме этого, большеголовник расширяет просвет сосудов, что улучшает кровоток, стимулирует образование капилляров и новых коллатералей.
В итоге облегчается работа сердца и сосудов, частота сердечных сокращений снижается, что дает возможность наращивать физические нагрузки. Левзея выводит метаболиты после тренировок, уменьшает время реабилитации, провоцирует умеренную выработку тестостерона. Используется в виде настоек, порошка, таблеток: Экдистен, Ратибол, экстракт маральего корня, левзея-порошок. Разница в препаратах представлена в таблице.
Наименование | Состав, свойства, особенности |
Левзея-порошок | Инновация на основе молодых побегов адаптогена рапонтикума: растет на субальпийских лугах, высоко в горах (до 3000 метров над уровнем моря). Собирают растение весной в фазу своей максимальной фитоактивности. В 1 кг до 20 000 эффектодоз, до 50 000 – профилактических, до 5 000 – спортивных. Комплекс трав и корней содержит около 70 экдистостероидов, в том числе – 0,5% экдистерона, до 20 витаминов, 45 минералов, более 30% белка и до 20% незаменимых аминокислот. |
Маралий корень | Вытяжка из надземных частей большеголовника сафлоровидного. Название «маралий корень» основано на легенде, согласно которой именно этим растением лечатся олени-маралы. Для человека корень не съедобен и не переваривается в кишечнике.![]() |
Экдистен или экдистерон. Аналоги: Леветон, Адаптон, Русс-Олимпик, Biostimul, Triboxin | Это переработанный корень растения. В России добились его 96% очистки, В США допускается не более 80%. Благодаря переработке, порошок из корня отлично усваивается. Препарат включает гидроксиэкдизон-20, инокостетерон, экдизон, Mg, Zn, B6. Отличается источником анаболика и составом. Эффективность умеренная, поскольку в корнях экдистерона меньше, чем в листьях в 20 раз. |
Настойка левзеи | Настойку готовят из корней, поскольку только они подходят для настаивания на спирте. Все полезные вещества сохраняются в неизменном виде. Они не растворяются в воде, поэтому минуют ротовую полость и желудок активными.![]() |
Есть общее замечание: препараты листьев практически безотходны и безвредны. БАДы из корней всегда обрабатываются антибиотиками, чтобы предупредить риск загнивания при хранении, поэтому применять их нужно с осторожностью.
Женский спорт
Большеголовник используется в косметике, чем привлекает женщин. Но и в женском спорте левзея приносит много пользы:
- Устраняет болезненность ПМС, облегчает течение месячных.
- Купирует воспалительные процессы в мочеполовой сфере.
- Нормализует цикл.
- Стимулирует рост мышечной массы, исключая тестостероновую зависимость, что чрезвычайно важно для женщин.
- Стимулирует либидо.
- Снимает повышенную раздражительность.
- Улучшает показатели крови.
- Повышает выносливость.
- Нормализует сон.
- Укорачивает период восстановления после соревнований и тренировок с высокой физической нагрузкой.
Рекомендации по дозировке порошка левзеи для женщин:
Поскольку порошок – это мерное вещество, следует придерживаться некоторых правил при его употреблении:
- Всегда при необходимости делить пакетик ориентируйтесь на рисунок в инструкции.
Спортивная доза назначается тренером индивидуально от 100 мг и примерно равняется фасолине. В силовых видах спорта доза может достигать 500 мг – это треть чайной ложки.
- Маралий корень нельзя принимать на ночь: это природный стимулятор активности, а значит, сна не будет минимум часа 4. При передозировке и все 12.
- Прием порошка сублингвальный (под язык), с небольшой дозы от 100 мг, которая рассасывается за несколько минут.
© lubov62 — depositphotos.com. Стебли левзеи
Противопоказания к приему левзеи
Их немного, но они есть:
- Нарушения в процессах торможения и возбуждения в ЦНС.
- Беременность и лактация.
- Возраст до 18 лет.
- Эпилепсия.
- Шизофрения.
- Бессонница.
- Язвенная болезни желудка.
- Сахарный диабет.
- Высокое артериальное давление.
Применение
Природный адаптоген рекомендуют принимать даже при обычной хронической усталости, чтобы ускорить процесс восстановления. Правила употребления разных лекарственных форм представлены в таблице.
Форма | Способ употребления |
Настойка | Измельчить корень, залить стаканом спирта и в темном месте выдержать три недели. Процедить и принимать по столовой ложке три раза в день до еды. Последний прием за 4 часа до сна. Суть – стимулирование иммунитета в межсезонье и эпидемии. |
Настой | Листья растения заливают стаканом крутого кипятка и настаивают час. Пьют как в первом случае, чаще всего принимают при похмелье и алкогольной интоксикации. |
Отвар | Отваривают корень большеголовника в течение 20 минут и настаивают полчаса. Пьют трижды в день. Эффект самый мягкий, помогает при сверхурочной работе, в сессию. |
Аптечный жидкий экстракт | Тонизирует умственную деятельность. |
Таблетки | Источник витаминов. Принимают с 12 лет, круглогодично.![]() |
Масло | Улучшает зрение, снимает интоксикацию, успокаивает нервы, нормализует АД, улучшает сон, поднимает настроение, снимает усталость. Капают в любую жидкость, на кусочек хлеба, сахар в дозировке по Инструкции. |
Порошок | Используют для реабилитации после травм и ран. Принимают сублингвально или растворяя в чае по 0,5 г (для профилактики – 0,25 г). |
Мед | Имеет особенный вкус, целебные свойства: тонизирует, снимает перенапряжение, стимулирует аппетит, улучшает работу сердца и сосудов. |
Побочные эффекты
Практически отсутствуют. Имеет значение индивидуальная непереносимость.
Оцените материалЭксперт проекта. Стаж тренировок — 12 лет. Хорошая теоретическая база по процессу тренировок и правильному питанию, которую с удовольствием применяю на практике. Нужна рекомендация? Это ко мне 🙂
Редакция cross.expert
экстракт левзеи жидкий — инструкция по применению, показания
Экстракт левзеи жидкий — растительный препарат с тонизирующим действием.
Форма выпуска и состав
Экстракт левзеи жидкий выпускается в виде экстракта для приема внутрь: жидкость красновато-коричневого цвета, в которой возможно выпадение осадка при хранении (25, 30, 40, 50 мл в флаконах (флаконах) из темного стекла, 1 флакон в пачке картонной).
В состав 1 литра экстракта входят:
- Действующее вещество: корневища с корнями левзеи сафлоровидной — 1 кг;
- Вспомогательный компонент: спирт этиловый (этанол) 70% — достаточно для получения 1 литра экстракта.
Показания к применению
Жидкий экстракт левзеи назначают в составе комплексного лечения астении, при умственном и физическом переутомлении, снижении потенции, а также в период выздоровления.
Противопоказания
- аритмии;
- Артериальная гипертензия;
- Повышенная нервная возбудимость;
- Острый период инфекционных болезней;
- Нарушения сна;
- Эпилепсия;
- Хронический алкоголизм;
- Хроническая болезнь печени и почек;
- Период беременности и кормления грудью;
- Возраст до 12 лет;
- Повышенная чувствительность к биологически активным веществам растения.
Способ применения и дозы
Экстракт левзеи жидкий, принимаемый внутрь во время еды.
Разовая доза — 20-30 капель, кратность приема — 2-3 раза в сутки. Продолжительность лечебного курса 2-3 недели.
Целесообразность повторных курсов определяется врачом индивидуально.
Побочные эффекты
Во время терапии возможно развитие следующих побочных эффектов: диспепсия, повышенное артериальное давление, раздражительность, головная боль, бессонница, аллергические реакции.
специальные инструкции
Во избежание нарушения сна жидкий экстракт Левзея не рекомендуется принимать во второй половине дня (позднее, чем за 3-4 часа до сна).
Лекарственное взаимодействие
Экстракт левзеи жидкий является физиологическим антагонистом депрессантов центральной нервной системы (включая барбитураты, седативные средства, транквилизаторы, нейролептики и др.).
При применении препарата возможно усиление действия аналептиков и стимуляторов центральной нервной системы (камфора, кофеин, фенамин и др. )).
Условия хранения
Хранить в темном, сухом, недоступном для детей месте при температуре 15-25 ° С.
Срок годности — 3 года.
Эффекты rhaponticum carthamoides по сравнению с экстрактами glycyrrhiza glabra и punica granatum на признаки метаболического синдрома у крыс
BMC Complement Altern Med. 2014; 14: 33.
, 1, 2 , 1 , 2 , 1 , 3 , 2 , 2 и 1Михаил Душкин
1 Лаборатория молекулярных и клеточных механизмов лечебных заболеваний Института внутренних болезней СО РАМН, Новосибирск, Россия
2 Институт физиологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук , Новосибирск, Россия
Марина Храпова
1 Лаборатория молекулярных и клеточных механизмов лечебных заболеваний Института внутренних болезней СО РАМН, Новосибирск, Россия
Геннадий Ковшик
2 Институт физиологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Новосибирск, Россия a
Марина Часовских
1 Лаборатория молекулярных и клеточных механизмов лечебных болезней Института внутренних болезней СО РАМН, Новосибирск, Россия
Елена Меньщикова
3 Центр клинической медицины и экспериментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Новосибирск, Россия
Валерий Труфакин
2 Институт физиологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Новосибирск, Россия
Анна Шурлыгина
2 Институт физиологии и фундаментальной медицины СО РАМН, Новосибирск, Россия
Евгений Верещагин
1 Лаборатория молекулярных и клеточных механизмов лечебных заболеваний Института внутренних болезней, Сибирь Филиал Ру АМН, Новосибирск, Россия
1 Лаборатория молекулярных и клеточных механизмов лечебных заболеваний, Институт внутренних болезней СО РАМН, Новосибирск, Россия
2 Институт физиологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Новосибирск, Россия
3 Центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Новосибирск, Россия
Автор, ответственный за переписку.
Поступило 7 июня 2013 г .; Принята к печати 15 ноября 2013 г.
Copyright © 2014 Душкин и др .; лицензиат BioMed Central Ltd. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа процитирована должным образом. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Предпосылки
Rhaponticum cathamoides (RC) — эндемичное дикое сибирское растение с выраженными лечебными свойствами, которые до сих пор мало изучены.Целью этого исследования является изучение терапевтического потенциала экстракта RC (ERC) по сравнению с эффектами экстрактов Glycyrrhiza glabra (EGG) и Punica granatum (EPG) на модели крыс с диетой с высоким содержанием жиров (HFD). ) -индуцированные признаки метаболического синдрома; Таким образом, данное исследование направлено на решение серьезной глобальной проблемы общественного здравоохранения.
Методы
Шестимесячных самцов крыс Wistar Albino Glaxo в течение восьми недель придерживались стандартной диеты (SD), HFD или HFD, в которую были включены порошки ERC, EGG или EPG в дозе 300 мг / кг / день. .Определяли липидный профиль сыворотки, концентрации кортикостерона и цитокинов, толерантность к глюкозе, систолическое артериальное давление, накопление триацилглицерина и активность связывания ДНК PPARα в образцах печени.
Результаты
В отличие от EGG и EPG, добавка ERC значительно снизила вес эпидидимальной ткани (19,0%, p <0,01) и базальный уровень глюкозы в сыворотке (19,4%, p <0,05). ERC улучшил непереносимость глюкозы, а также дислипидемию более эффективно, чем EGG и EPG.Добавки EGG, но не ERC или EPG, снижали систолическое артериальное давление на 12,0% (p <0,05). Все протестированные экстракты снижали уровни IL6 и кортикостерона в сыворотке, вызванные HFD. Однако снижающие эффекты потребления ERC на уровень TNF-α в сыворотке и его восстанавливающее действие на уровень кортикостерона надпочечников значительно превосходили улучшения, вызванные EGG и EPG. Прием ERC также снижает накопление триацилглицерина и увеличивает ДНК-связывающую активность PPARα в печени в большей степени, чем EGG и EPG.
Выводы
Добавка порошка ERC улучшила метаболизм глюкозы и липидов более значительно, чем EGG и EPG у крыс, получавших HFD, поддерживая стратегию использования R. carthamoides для безопасного купирования метаболического синдрома и связанных с ним нарушений, таких как воспаление, стресс и стеатоз печени.
Ключевые слова: Rhaponticum carthamoides , метаболический синдром, кортикостерон, воспалительные цитокины
Общие сведения
Метаболический синдром, состояние, определяемое группой кардиометаболических факторов риска, включая висцеральное ожирение, сахарный диабет, сахарный диабет, дисбаланс значительная глобальная проблема общественного здравоохранения [1].Среди факторов окружающей среды основными причинами нарушения толерантности к глюкозе и дислипидемии, связанных с ожирением, являются диета с высоким содержанием жиров и малоподвижный образ жизни, распространенные в западном мире [2]. Метаболический синдром также часто характеризуется хроническим воспалением и стеатозом печени [3]. Раннее лечение людей с метаболическим синдромом может предотвратить развитие сердечно-сосудистых заболеваний. Современные стратегии лечения включают изменение образа жизни с помощью фармакологических вмешательств, направленных на комплексные проявления метаболического синдрома, по мере необходимости [4].Множественные биологические мишени, контролирующие эти проявления, потребуют одновременного применения различных классов лекарств, таких как статины, тиазолидиндионы, фибраты, бигуаниды, сульфонилмочевины, гипотензивные препараты и многие другие для достижения положительного эффекта. Хотя в разработке терапевтических стратегий для снижения факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний был достигнут значительный прогресс [5-7], комплексное лечение метаболического синдрома на практике часто является недостижимой целью.Проблема комплексного лечения метаболического синдрома возникает из-за длительного приема дорогостоящих лекарств, иногда приводящих к нежелательным побочным эффектам.
Недавно был предложен ряд инновационных стратегий питания, основанных на длительной и успешной практике, в качестве безопасных альтернативных методов лечения для снижения заболеваемости, а также стоимости лечения метаболического синдрома [8-10].
На сегодняшний день зарегистрировано более 1000 лекарственных препаратов для лечения метаболических нарушений, хотя лишь небольшое количество из них получило научную и медицинскую оценку для оценки их сравнительной эффективности [11].Следовательно, необходимы дополнительные скрининговые испытания коммерческих растительных продуктов для разработки функциональных, а также аналитических основ стандартизации пищевых добавок [12]. Среди трав этого вида пищевые ингредиенты Glycyrrhiza glabra и Punica granatum широко используются в традиционной индийской и китайской медицине. Противодиабетические эффекты и эффекты против ожирения G. glabra [13,14] и P. granatum [15,16] относительно хорошо изучены на животных моделях. В частности, недавно было показано, что флавоноиды солодки подавляют накопление абдоминального жира и повышение уровня глюкозы в крови у крыс с ожирением [17] и мышей [18]. Высокое общее содержание полифенолов связано с антидиабетическим и антиоксидантным действием экстракта Punica granatum , наблюдаемым у мышей [19] и крыс [20].
Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, широко известный как корень марала или русская левзея, широко используется в традиционной сибирской медицине, в основном для лечения перенапряжения и общей слабости после болезней, как стимулятор и средство от мужского пола. дисфункция.Основными биологически активными составляющими этого растения являются экдистероиды, флавоноиды и фенольные кислоты. Практически безопасные экстракты и препараты из этого растения обладают различными дополнительными антиоксидантными, иммуномодулирующими, противоопухолевыми и антимикробными эффектами [21]. Однако имеется относительно немного литературы о лечебных свойствах R. carthamoides для лечения метаболических нарушений. Кроме того, еще предстоит выяснить влияние R. carthamoides, , особенно на развитие метаболического синдрома, вызванного диетой с высоким содержанием жиров.Возможности R. carthamoides в подавлении основных проявлений метаболического синдрома изучены недостаточно. В настоящем исследовании мы проверили влияние этанольного экстракта корня R. carthamoides по сравнению с коммерчески доступными спиртовыми экстрактами корня G. glabra и кожуры P. granatum с заявленными противодиабетическими свойствами и свойствами против ожирения. признаки метаболического синдрома на модели крыс с ожирением.
Методы
Растительные материалы и химикаты
Порошок промышленного этанольного экстракта из корня R.carthamoides (дикорастущие) (содержание 20-гидроксиэкдизона 2,2% стандартизировано с помощью анализа ВЭЖХ), порошок экстракта корня солодки (глицирризиновая кислота (15,0%) кондиционирован анализом ВЭЖХ) и порошок экстракта кожуры граната (эллаговая кислота (40,0%) ) были кондиционированы с помощью анализа ВЭЖХ) были получены от KIT Co. , Ltd. (Алтайский государственный технический университет, Барнаул, Россия), Wixi Cima Science Co., Ltd. (Цзянсу, Китай (материк)) и Xian Yuensun Biological Technology Co. ., Ltd. (Шэньси, Китай (материк)), соответственно, и хранили при + 4 ° C до использования.Все остальные химические вещества были аналитической чистоты.
Животные, диеты и план эксперимента
Самцы крыс Wistar Albino Glaxo в возрасте шести месяцев были получены из Центра животных Института цитологии и генетики (Новосибирск, Россия) и содержались индивидуально в клетках в кондиционируемом помещении. комната (24,2 ° C) с 12-часовым циклом свет / темнота, пища и вода обеспечиваются ad libitum . Все эксперименты на животных проводились в соответствии с руководящими принципами этики животных Директивы Совета Европейских сообществ (86/609 / EEC) и одобрены Комитетом по уходу за животными Института внутренней медицины, Новосибирск, Россия.Животные были случайным образом разделены на 5 групп по 10 крыс в каждой. Группа I содержалась на стандартной диете из брикетов (группа SD), содержащая 10% калорий, полученных из жира, в то время как группа II получала диету с высоким содержанием жиров (группа HFD), содержащую 60% калорий, полученных из жира (Лабораторснаб, Москва, Россия) для 8 недель. Крысам групп III, IV и V давали HFD с добавлением порошковых экстрактов R. carthamoides (группа ERC), G. glabra (группа EGG) и P. granatum (группа EPG). соответственно в суточной дозе 300 мг / кг массы тела (б.ш.) в течение 8 недель. Животных взвешивали один раз в неделю и ежедневно измеряли потребление пищи. В конце каждого экспериментального периода крыс лишали пищи на 16 ч, затем анестезировали внутрибрюшинной инъекцией пентобарбитала натрия (50 мг / кг м.т.) и умерщвляли. Эпидидимальную жировую ткань, надпочечник и печень извлекали и взвешивали.
Тест на толерантность к глюкозе внутрибрюшинно
На 8-й неделе эксперимента крыс лишали пищи на ночь (16 ч) и после сбора пробы крови натощак из хвостовой вены внутрибрюшинно вводили D-глюкозу (50% исходный раствор в физиологическом растворе). , 5 г / кг б.ш.). Концентрацию глюкозы в крови измеряли через 60, 120 и 180 минут после инъекции глюкометром One Touch Horizon (Lifescan, Johnson and Johnson, NJ, США).
Артериальное давление
На исходном уровне и в дальнейшем еженедельно систолическое и диастолическое артериальное давление измеряли с помощью устройства для неинвазивного измерения давления с использованием записи объемного давления CODA 2 (Kent Scientific, Торрингтон, Коннектикут, США) на не анестезированных крысах, удерживаемых в термопластиковая камера.
Определение содержания триацилглицерина, холестерина, свободных жирных кислот, кортикостерона и цитокинов в сыворотке крови
Образцы крови собирали в пробирки и центрифугировали при 2400 g.Концентрацию триацилглицерина (TG), общего холестерина (TC) и холестерина высокой плотности (HDL-C) в сыворотке крови измеряли ферментативным колориметрическим методом с использованием коммерческих наборов для анализа ферментов (Olvex Diagnosticum, Санкт-Петербург, Россия). Содержание холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП) рассчитывали по формуле: Х-ЛПНП = ОС — (Х-ЛПВП + ТГ / 2,2). Концентрацию свободной жирной кислоты (FFA) в сыворотке крови измеряли с помощью ферментативного колориметрического анализа в соответствии с протоколом производителя ’ (свободная жирная кислота, полумикро-тест; Roche Diagnostics, Penzberg, Германия).Гомогенат кортикостерона в сыворотке и надпочечниках анализировали с помощью иммуноферментного анализа. Пределы чувствительности составляли 30 пг / мл, а коэффициенты вариации составляли 7-9% с использованием набора для иммуноферментного анализа (EIA) (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA). Уровни фактора некроза опухоли-α (TNF-α) и интерлейкина-6 (IL-6) измеряли с помощью коммерчески доступных наборов ELISA для крыс (eBioscience, Калифорния, США).
Определение содержания триацилглицерина в печени
Примерно 0,2 г ткани печени гомогенизировали в 0.15 М раствором NaCl и экстрагируют смесью гексан: изопропанол (3: 2, об. / Об.), Содержащей 0,005% (мас. / Об.) Бутилированного гидрокситолуола, по методу Хара и Радина [22]. После 10 мин центрифугирования при 3000 g и 10 ° C верхнюю органическую фазу собирали и упаривали в жидком азоте. Общие сухие липиды ресуспендировали в 10% Triton X-100 и изопропаноле, и содержание ТГ определяли с помощью коммерческого набора для анализа ферментов (Olvex Diagnosticum, Санкт-Петербург, Россия) на автоматическом биохимическом анализаторе.
Приготовление экстракта ядерного белка печени
Ядерный белок выделяли в соответствии с методом Kang et al. [23]. Ткань печени (0,5 г) гомогенизировали в буфере, содержащем 0,32 М сахарозы, 10 мМ Трис · HCl, pH 7,4, 1 мМ ЭГТА, 2 мМ ЭДТА, 5 мМ NaN 3 , 10 мМ β-меркаптоэтанол, 20 мкМ лейпептин, 0,15 мкМ пепстатина А, 0,2 мМ PMSF, 50 мМ NaF, 1 мМ ортованадат натрия и 0,4 нМ микроцистина. Гомогенаты центрифугировали (1000, г, , 10 мин). Осадки солюбилизировали в буфере Triton (1% Triton X-100, 150 мМ NaCl, 10 мМ Tris · HCl, pH 7. 4, 1 мМ EGTA, 1 мМ EDTA, 0,2 мМ ортованадата натрия, 20 мкМ лейпептина A, 0,2 мМ PMSF). Лизаты центрифугировали (15000 г , 30 мин, 4 ° C), и супернатант (ядерный экстракт) хранили при -80 ° C до использования. Концентрации белка оценивали с помощью анализа белка DC Bio-Rad (Hercules, CA).
Определение активности фактора транскрипции PPARα в печени
Активность фактора транскрипции PPARα в ядерных экстрактах печени определяли с использованием набора для анализа фактора транскрипции Cayman Chemical PPAR-α на основе ELISA (Cayman Chemicals, Ann Arbor, MI, USA), который обнаруживает PPAR-α связаны с двухцепочечными последовательностями ДНК, содержащими элемент ответа PPAR.Образец белка ядерного экстракта (40–50 мкг) использовали для определения активности PPARα с использованием протокола, описанного в руководстве по продукту, и оптическую плотность измеряли при 450 нм.
Статистический анализ
Результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка (S. E.M.). Статистический анализ был выполнен с применением одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки. Различия между группами считали достоверными при p <0,05.
Результаты
Влияние на вес эпидидимальной жировой ткани
Никаких существенных различий в массе тела и потреблении энергии между группами не наблюдалось (данные не показаны).Через восемь недель после применения диеты с высоким содержанием жиров вес эпидидимального жира у крыс HFD был значительно повышен (p <0,001) по сравнению с контрольными (SD) крысами (рисунок). Добавка ERC в течение восьми недель крысам HFD значительно снизила вес эпидидимального жира (p <0,05), тогда как добавление EGG или EPG не изменило эту характеристику.
Вес эпидидимальной жировой ткани крыс, получавших стандартную диету (SD), диету с высоким содержанием жиров (HFD) и HFD с добавлением Rhaponticum cathamoides экстракт (ERC), Punica granatum Punica granatum экстракт (EPG) и Glycyrrhiza glabra экстракт (EGG) (300 мг / кг в день) в течение 8 недель. Данные представляют собой среднее значение ± S.E.M. (n = 10). Определяли статистическую значимость различий между крысами, получавшими HFD и SD (# p <0,001) или HFD с добавлением ERC, EPG или EGG (* p <0,01).
Влияние на тест толерантности к глюкозе и липиды крови
Уровень глюкозы в сыворотке был увеличен на 20,0% (p <0,05) у крыс HFD по сравнению с крысами SD (с 4,46 ± 0,16 до 5,34 ± 0,32 ммоль / л). Добавление ERC, но не EGG или EPG, значительно снизило базальный уровень глюкозы на 19.4% по сравнению с группой HFD (p <0,05; данные не показаны). Тест на толерантность к глюкозе внутрибрюшинно проводили в конце восьмой недели эксперимента. Уровни глюкозы в сыворотке в группе HFD были значительно выше через 60, 120 и 180 минут после нагрузки глюкозой по сравнению с группой SD, и все три изученных экстракта растений значительно изменили этот эффект через 60 минут и в каждый момент времени после этого (рисунок). В то же время рисунок демонстрирует, что уровни глюкозы в сыворотке были значительно ниже у крыс, получавших ERC (p <0. 05), чем у крыс, получавших EGG или EPG через 120 и 180 мин после нагрузки глюкозой.
Тест толерантности к глюкозе у крыс, получавших стандартную диету (SD), диету с высоким содержанием жиров (HFD) и HFD с добавлением Rhaponticum cathamoides экстракт (ERC), экстракт Punica granatum EPG) и экстракт Glycyrrhiza glabra (EGG) (300 мг / кг в день) в течение 8 недель. Данные представляют собой среднее значение ± S.Э.М. (n = 10). Статистическая значимость различий между крысами, получавшими HFD и SD (#p <0,001) или HFD с добавлением ERC, EPG или EGG (* p <0,01), между крысами, получавшими HFD с добавлением ERC и EPG или EGG (& p < 0,05).
Как показано в таблице, HFD значительно увеличивал сывороточные уровни TC (p <0,001), TG (p <0,001), LDL-C (p <0,001) и FFA (p <0,001) по сравнению с SD, тогда как Содержание ХС-ЛПВП в сыворотке снизилось (р <0,05). Прием ERC заметно снизил уровни ТГ в сыворотке (на 22,6%, p <0,05), TC (на 18,0%, p <0,05), LDL-C (на 52,0%, p <0,01) и уровни FFA (на 32,4%, p <0,05) и восстановил уровень ХС-ЛПВП (на 37,0%, p <0,05), что указывает на то, что ERC обращает вспять дислипидемию, вызванную HFD (таблица). Некоторое улучшение липидных профилей было также отмечено для групп EGG (значительное снижение содержания TG и FFA на 25,0 и 27,0% соответственно) и EPG (значительное снижение уровня LDL-C на 26,0%) по сравнению с группой HFD.Остальные липидные показатели в группах EGG и EPG продемонстрировали слабую тенденцию к восстановлению, хотя и незначительную (p> 0,05).
Таблица 1
Содержание липидов в сыворотке крови (ммоль / л) у крыс, получавших стандартную диету (SD), диету с высоким содержанием жиров (HFD) и HFD с добавлением Rhaponticum cathamoides экстракт (ERC), Punica granatum экстракт (EPG) и Glycyrrhiza glabra экстракт (EGG) (300 мг / кг в день) в течение 8 недель
Липид | SD | HFD | HFD + ERC | HFD + EPG | |||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
TC | 2.![]() | 2,82 ± 0,24 # | 2,31 ± 0,19 * | 2,89 ± 0,32 | 2,59 ± 0,22 | ||||||||||||||||||||||
LDL-C | 0,439 | ± 0,24 | 0,439 0,35 # | 0,70 ± 0,24 * | 1,22 ± 0,34 | 1,08 ± 0,28 * | |||||||||||||||||||||
HDL-C | 1,20 ± 0,11 | 9007 0,81 1.![]() | 1,08 ± 0,24 | 0,95 ± 0,22 | |||||||||||||||||||||||
TG | 1,79 ± 0,14 | 3,27 ± 0,37 # | 2,53 ± 0,239 * | 2,82 ± 0,37 | |||||||||||||||||||||||
FFA | 0,76 ± 0,09 | 1,43 ± 0,24 # | 1,11 ± 0,12 * | 1,04 ± 0,12 * | 1,39 ± 0,16 |
. | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | |||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
6 ч. . | 24 ч. . | 6 ч. . | |||||||||||||||||||||||||
MNTC a . | IC50 . | MNTC a . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | ||||||||||||||||||||||
20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | |||||||||||||||||||||
Dexamet 90 1001936 Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7.1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | |||||||||||||||||||||||
Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6,6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | ||||||||||||||||||||||
Генистеин | 9 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | 43,4 ± 8,5 | ||||||||||||||||||||||
Ксантогумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0.4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 | |||||||||||||||||||||
Витаферин A | 5,1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 3 0,25 ± 0,04 ± 0,3 | ||||||||||||||||||||||
WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 ± 0,7 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||||||||||||||||||||
99 Парфенолид 3 | 0 ± 0,320,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 3,2 ± 2,2 | ||||||||||||||||||||||
Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80,0 ± 2,7 | 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | |||||||||||||||||||||
Хлорогеновая кислота | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 37,6 ± 2,7 | 66,09 | 37,6 ± 2,7 | 66,01 . | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | 6 ч.
. | 24 ч.
. | 6 ч.
. | MNTC a . | IC50
. | MNTC a . | IC50
. | MNEC b . | IC50
. | | |||||||
20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | |||||||||||||||||||||
Dexamet 90 1001936 Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | |||||||||||||||||||||||
Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6.6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | ||||||||||||||||||||||
Генистеин | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 43,4 ± 9,199 | ||||||||||||||||||||||
Ксантохумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 | |||||||||||||||||||||
Витаферин А | 5.1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 | |||||||||||||||||||||
WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||||||||||||||||||||
Партенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 2,2||||||||||||||||||||||
Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80.0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | |||||||||||||||||||||
Хлорогеновая кислота | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 2,79,619 ± 36 9,619 ± 36 11,8 |
Влияние 20E, дексаметазона и эталонных стандартов на жизнеспособность клеток через 6 и 24 ч инкубации (анализ MTT, диапазон испытаний 0,4–100 мкм) и на PMA-активированный NF- κ B (6 ч после стимуляции) определено в клетках HeLa-IL-6
. | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
6 ч. . | 24 ч. . | 6 ч. . | ||||
MNTC a . | IC50 . | MNTC a . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | |
20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 |
Dexamet 90 1001936 Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | ||
Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6.6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | |
Генистеин | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 43,4 ± 9,199 | |
Ксантохумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 |
Витаферин А | 5.1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 |
WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 |
Партенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 2,2|
Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80.0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 |
Кислота хлорогеновая | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 2,79,619 ± 36 9,619 ± 36 11,8 |
. | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | |||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
6 ч. . | 24 ч. . | 6 ч. . | |||||||||||||||||
MNTC a . | IC50 . | MNTC a . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | ||||||||||||||
20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59.4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | |||||||||||||
Дексаметазон | > 100 | > 100 | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 7,1 ± 0,2 | 35.2 ± 3 | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6,6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | |||||||
Genistein | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15.7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | 43,4 ± 8,5 | |||||||||||||
Ксантогумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 3,8 ± 1,7 | ||||||||||||||
Витаферин A | 5,1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 | |||||||||||||
18,2 ± 2,0 | 2,5 ± 0,7 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||||||||||||||
Парфенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 362,819 ± 2,8 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 3,2 ± 2,2 | ||||||||||||||
Кофеиновая кислота | > 100 | > 100 | 80,0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | Хлорогеновая кислота84.7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 37,6 ± 2,7 | 66,0 ± 11,8 |
Учитывая результаты МТТ, 20E испытывали при пяти концентрациях (2, 5, 10, 25 и 50 мкм) при модификации PMA, вызвавшей активацию NF- κ B через 6 часов. Опять же, другие синтетические и природные стероидные соединения, а также партенолид, кофейная кислота и хлорогеновая кислота были протестированы в качестве эталонов (Таблица 2). Наиболее сильное ингибирование NF- κ B проявляли партенолид, ксантогумол и витанолиды (IC50 между 1.4 и 5,2 мкм и MNEC 0,25–2,5 мкм), в то время как 20E был сопоставим с дексаметазоном и генистеином, демонстрируя умеренное, но устойчивое ингибирование со значениями IC50 между 32–43 мкм и MNEC 6,6–10,4 мкм. Он также имел аналогичные кривые «концентрация-ответ», показывающие небольшое увеличение активности NF- κ B ниже 5 мкм и явное снижение активации NF- κ B при концентрациях выше 10 мкм. Однако кривая «доза-ответ» обычно выходит на плато при приближении к 50% ингибированию, в то время как начинает вызывать токсические эффекты на уровне около 50 мкм.Поразительно, но мифепристон дал противоречивые результаты в семи независимых экспериментах, демонстрируя иногда ингибирующие, но часто активирующие эффекты. С другой стороны, кофейная и хлорогеновая кислоты лишь незначительно ингибировали NF- κ B. Стало очевидно, что для сильных ингибиторов NF- κ B диапазон между эффективным ингибированием NF- κ B и токсическими эффектами был очень узким. наша клеточная модель. Все нетоксичные концентрации, вызывающие ингибирование NF- κ B через 6 часов, становились токсичными через 24 часа.
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BЭкстракты и фракции корня левзеи и травы были протестированы на их влияние на жизнеспособность клеток с использованием максимальных концентраций 100 мкг / мл после 24 ч инкубации в соответствии со стандартной процедурой МТТ в 96-луночных планшетах (таблица 3). Только два экстракта, H-Me-diclo и H-Et60-etac, отрицательно повлияли на жизнеспособность клеток со значениями IC50 4,2 и 16 мкг / мл соответственно.
Таблица 3 Выход экстракции, влияние на жизнеспособность клеток и активацию NF- κ B и основанный на ВЭЖХ / DAD количественный профиль экстрактов из корня (R) и травы (H) Leuzea carthamoides
. | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 3 9363 2,5 |
R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | Активация | 378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29.6 ± 5,30 |
5,2 ± 2,0 | ||||||||
R-Et60-wa | 16,54 | > 100 | > 100 | Активация | 66,3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,218 | 918 1,5 ± 0,218 918 1,5 12,5 ± 1,25||
125 ± 2,2 | ||||||||
H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 87,5 ± 3,5 | Ингибирование | 21,1 ± 1,19 | 45,5 90.8 ± 0,52 | н.о. ч | |
15,5 ± 1,4 | ||||||||
H-Me-hex | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76,0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 9 1,4 ± 0,236 4,53<0,5 | ||
H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 4,2 ± 0,5 | Ингибирование | 2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5.7 ± 0,71 | <0,5 |
5,9 ± 1,6 | ||||||||
H-Me-etac | 0,85 | 54,5 ± 9,2 | 91,1 ± 12,7 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,0198 | 56,6 ± 2,0198 903 | <0,5 | nd ч |
H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83.3 ± 6,83 | н.о. ч |
12,1 ± 0,8 |
. | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . | |||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181.2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 21,1 ± 0,98 | |||
84 ± 2,5 | |||||||||||
R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 14,21833 | 378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 | ||||
5,2 ± 2,0 | |||||||||||
R-Et60-wa | 16,54 | 18> 100 | > 100 | 66.3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 | ||||
125 ± 2,2 | |||||||||||
H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 8 9018 919 ± 3,5 36 Ингибирование 21,1 ± 1,1945,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | nd ч | ||||||
15,5 ± 1,4 | |||||||||||
H-Me-шестигранник | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76.0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 | 35,4 ± 4,53 | <0,5 | |||
H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 4,219 ± 0,536 Ингибирование2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 | |||||
5,9 ± 1,6 | |||||||||||
H-Me-etac | 0,85 | 54,5 121936 9,2 | 54,5 1219,2 917 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | н.о. ч | |||
H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± | н. ч | |||
12,1 ± 0,8 |
Выход экстракции, влияние на жизнеспособность клеток и активацию NF- κ B и количественный профиль экстрактов корня (R) и травы ( H) из Leuzea carthamoides
. | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (расч.как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0.42 | 32,2 ± 2,25 | 21,1 ± 0,98 |
84 ± 2,5 | ||||||||
R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | ,0218 | ,02 Активация | ,02 <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 |
5,2 ± 2,0 | ||||||||
R-Et60-wa | 16,54 | > 100 | > 100 | Активация 66 | 3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 |
125 ± 2,2 | ||||||||
H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 8 9018 919 ± 3,5 36 Ингибирование 21,1 ± 1,1945,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | nd ч | |||
15,5 ± 1,4 | ||||||||
H-Me-шестигранник | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76.0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 | 35,4 ± 4,53 | <0,5 |
H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 4,219 ± 0,536 Ингибирование2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 | ||
5,9 ± 1,6 | ||||||||
H-Me-etac | 0,85 | 54,5 121936 9,2 | 54,5 1219,2 917 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | н.о. ч |
H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± | н. ч |
12,1 ± 0,8 |
. | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (расч.как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 3 9363 2,5 |
R-Et60-etac | 4.93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | Активация | 378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 |
5,2 ± 2,0 | 9039 Wa18 R3 90-39916,54 | > 100 | > 100 | Активация | 66,3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 |
125 ± 2,2 | ||||||||
41,2 ± 5,3 | 87,5 ± 3,5 | Ингибирование | 21,1 ± 1,19 | 45,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | н.о. ч | ||
15,5 ± 1,4 | ||||||||
H-Me-hex | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76,0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 9 1,4 ± 0,236 4,53<0,5 | ||
H-Me-diclo | 0.83 | 1,9 ± 0,2 | 4,2 ± 0,5 | Ингибирование | 2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 |
5,9 ± 1,6 | ||||||||
H-1 | 0,85 | 54,5 ± 9,2 | 91,1 ± 12,7 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | nd ч |
H-Et60-etac | 3.48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± 6,83 | н.о. ч |
12,1 ± 0,8 |
Для проверки возможного пролиферативного эффекта анализ МТТ был повторен с увеличенным числом клеток с использованием 24-луночных планшетов (с плотностью клеток, как в NF- κ B). Через 12 и 24 часа не было значительного увеличения жизнеспособности митохондрий, что указывает на увеличение количества клеток для любого из образцов (данные не показаны).
В соответствии с этими результатами экстракты корней и трав были затем протестированы на их способность изменять индуцированную PMA активацию NF- κ B в концентрациях, не влияющих только на жизнеспособность клеток (рис. 2). Все три экстракта корня активировали NF- κ B по сравнению с контролем (значения AC150: R-Me, 84 мкг / мл; R-Et60-etac, 5,2 мкг / мл; R-Et60-wa, 125 мкг / мл. ).
Рисунок 2
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя).Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0,05).
Рисунок 2
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0,05).
Что касается экстрактов трав, H-Me показал зависимое от концентрации ингибирование NF- κ B (IC50 15.5 мкг / мл). Две его фракции не имели эффекта (гексан, этилацетат), тогда как фракция дихлорметана имела IC50 5,9 мкг / мл с более сильным ингибированием при более высоких концентрациях, чем неочищенный экстракт, но активирующим действием при концентрациях ниже 1 мкг / мл. H-Et60-etac также ингибируется в зависимости от концентрации (IC50 12,1 мкг / мл).
Комбинированное воздействие экстрактов 20E и левзеи на активацию NF-
κ BДля оценки вклада 20E, основного экдистероида левзеи, в общий эффект экстрактов левзеи, 20E в трех концентрациях (5, 10, 25 мкм) были добавлены к корню, активирующему NF- κ . экстракты и ингибирующие экстракты трав.Концентрации экстракта были близки к их IC50 (для ингибирующих экстрактов) или AC150 (для активирующих экстрактов) (рис. 3). Хотя один 20E умеренно снижал активацию NF- κ B, после стимуляции как PMA, так и TNF α не наблюдалось устойчивой значимой или дозозависимой модификации эффектов экстрактов ни для активирующих экстрактов корней, ни для ингибирующих трав. экстракты. Неожиданно оказалось, что в некоторых случаях после совместной инкубации экстракта / 20E были обнаружены более высокие уровни NF- κ B, чем после инкубации только экстракта.
Рисунок 3
Влияние экстрактов левзеи отдельно и в сочетании с 20E (5, 10 и 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b), индуцированную активацию NF- κ B в HeLa-IL -6 ячеек. Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним экстрактом (анова с последующим тестом Бонферрони).
Рисунок 3
Влияние экстрактов левзеи отдельно и в сочетании с 20E (5, 10 и 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b) индуцированную активацию NF- κ B в HeLa- Клетки ИЛ-6.Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним экстрактом (анова с последующим тестом Бонферрони).
Чтобы установить комбинированные эффекты определенных классов соединений, присутствующих в экстрактах левзеи, а именно сесквитерпенелактонов и фенолкарбоновых кислот, 20E был объединен с партенолидом, ингибитором NF- κ B в качестве модели сесквитерпенелактона [28,29] , а также с кофейной и хлорогеновой кислотой из-за характерного присутствия фенолкарбоновых кислот в наших экстрактах левзеи (рис. 4).На ингибирующие эффекты партенолида не повлияло, в то время как добавление 20E в концентрациях от 5 до 25 мкм увеличивало NF- κ B умеренно при обработке кофеиновой и хлорогеновой кислотой через 6 часов после стимуляции PMA. Никаких изменений не наблюдалось при измерении через 6 и 24 ч после стимуляции TNF α (данные не показаны). указывает на значимость ( P <0.05) комбинированного лечения по сравнению с одним только 20E (ANOVA с последующим тестом Бонферрони).
Во всех комбинированных экспериментах первые токсические эффекты наблюдались при использовании 20E в концентрациях 50 мкм. Следовательно, эти результаты не были учтены, поскольку они потенциально могут повлиять на люминометрические показания.
Комбинированное действие дексаметазона с экстрактами 20E или левзеи на NF-
κ BЧтобы установить возможные фармакодинамические взаимодействия между 20E, экстрактами левзеи и стероидными противовоспалительными препаратами, в Национальном федеральном федеральном округе были испытаны комбинации с дексаметазоном в различных соотношениях (5: 1, 2: 1, 1: 1, 1: 2, 1: 5). — κ B.20E в низких концентрациях (5 и 10 мкм) не оказывал значительного влияния на эффект дексаметазона после стимуляции PMA. Более высокие концентрации 20E (25 мкм) усиливали ингибирующий эффект дексаметазона после стимуляции как PMA, так и TNF α (фиг. 5).
Рисунок 5
Влияние дексаметазона (DEX 5 мкм, 10 мкм, 25 мкм) на индуцированную PMA- (a) и TNF α — (b) активацию NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 отдельно и в сочетании с 20E (5, 10, 25 мкм).Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Рисунок 5
Влияние дексаметазона (DEX 5 мкм, 10 мкм, 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b) индуцированную активацию NF- κ B в HeLa-IL-6 только клетки и в сочетании с 20E (5, 10, 25 мкм). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего.* Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Дексаметазон (20 минут предварительной инкубации, 20 мкм) в комбинации с активными экстрактами левзеи был протестирован на той же клеточной модели (рис. 6). Одно противовоспалительное лекарственное средство уменьшало PMA-индуцированную активацию NF- κ B дозозависимо, и этот эффект был добавлен к эффекту ингибирующих экстрактов, в то время как эффект активирующих экстрактов казался уменьшенным (например,грамм. водная фракция 60% этанольного экстракта листьев). Следовательно, вызываемое дексаметазоном ингибирование NF- κ B может быть усилено некоторыми экстрактами левзеи, в то время как другие эффективно нейтрализовали этот эффект.
Рисунок 6
Влияние одного дексаметазона (DEX 20 мкм), экстрактов Leuzea отдельно и комбинаций DEX / экстракт на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего.указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Рисунок 6
Влияние одного дексаметазона (DEX 20 мкм), одного экстракта левзеи и комбинаций DEX / экстракт на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя) . Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0.указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Отпечаток пальца ВЭЖХ и содержание 20E в экстрактах левзеи
Обнаружение характерных классов соединений, описанных для Leuzea, было достигнуто путем сравнения УФ-спектров с чистыми эталонными стандартами хлорогеновой кислоты, кофейной кислоты, 20E, кверцетина и партенолида (рис. 7). Был выбран полуколичественный метод для сравнения процентов AUC суммарных пиков из этих групп (таблица 1 и рисунок 8).Экстракты корней (R-Me, R-Et60-etac) содержали преимущественно фенолкарбоновые кислоты, за которыми следовали соединения группы D и группы ECD (с 20E в качестве основного пика при t r 22 мин), но мало флавоноидов (рисунки 7 и 8 ). 20E в меньшей степени также был обнаружен в отпечатке R-Et60-wat. Однако во всех трех экстрактах корней 20E не был основным пиком даже при 256 нм, вблизи максимума поглощения соединения.
Рисунок 7
ПрофилиВЭЖХ при 256 нм (а) эталонных стандартов и (б) экстракта из корня левзеи (R-Me) и профили ВЭЖХ при 220 нм двух экстрактов из травы левзеи: (в) H-Et60- etac и (d) H-Me-дикло.Пики, отличные от 20E, классифицируются согласно УФ-спектрам (см. Таблицу 1).
Рисунок 7
Профили ВЭЖХ при 256 нм (а) эталонных стандартов и (б) экстракта из корня левзеи (R-Me) и профили ВЭЖХ при 220 нм двух экстрактов из травы левзеи: (в) H-Et60 -etac и (d) H-Me-дикло. Пики, отличные от 20E, классифицируются согласно УФ-спектрам (см. Таблицу 1).
Рисунок 8
Полуколичественный профиль экстрактов левзеи в соответствии с основными группами, идентифицированными по УФ / видимому спектрам 200–400 нм.Процент суммарной AUC для каждой группы соединений, обнаруженной при 220 нм (см. Таблицу 1).
Рис. 8
Полуколичественный профиль экстрактов левзеи по основным группам, идентифицированным по УФ / видимым спектрам 200–400 нм. Процент суммарной AUC для каждой группы соединений, обнаруженной при 220 нм (см. Таблицу 1).
Экстракт травы H-Me и фракции H-Me-etac и H-Et60-etac были богаты флавоноидами и соединениями группы A (Рисунки 7 и 8). Две другие фракции не содержали флавоноидов, но преимущественно составляли компоненты без хромофоров (группа B) с небольшими частями ECD и группы C (H-Me-гекс) или в основном присутствовали соединения типа B и C (H-Me-дикло).
Содержание 20E, а также общее количество производных кофейной кислоты, общее количество флавоноидов и общее количество экдистероидов, рассчитанное на основе внешних стандартов (хлорогеновая кислота, кверцетин, 20E, соответственно), показано в таблице 3. Только в экстрактах корней мы смогли детектировать 20E (R-Me 21 мг / г, R-Et60-etac 29 мг / г, R-Et60-wa 12 мг / г). Однако другие соединения со спектром, подобным 20E, также были обнаружены в экстрактах трав (максимум 83 мг / г в H-Et60-etac). Нельзя исключить пониженное присутствие 20E в экстрактах H-Me, H-Me-etac и H-Et60-etac, поскольку отпечаток пальца показал другие пики (флавоноиды и A), элюирующиеся совместно с этим соединением.Производные кофейной кислоты варьировались от 66 мг / г (R-Et60-wa) до 378 мг / г (R-Et60-etac) в экстрактах корней и от 2,5 мг / г (H-Me-diclo) до 62 мг / г. (H-Et60-etac) в экстрактах трав. Более высокие количества флавоноидов были обнаружены только в экстрактах трав, особенно они преобладали во фракциях этилацетата (H-Me-etac 289 мг / г, H-Et60-etac 416 мг / г).
Взаимосвязь между классами метаболитов и активностью экстрактов левзеи NF-
κ BВ совокупности профиль всех экстрактов корня, активирующих NF- κ B, показал преобладание CAF вместе с 20E и другими неидентифицированными экдистероидами.Они сопровождались основными пиками для компонентов D-типа или (водная фракция) A- и B-типов. Напротив, экстракты трав, ингибирующих NF- κ B, содержали явно меньше CAF и ECD, но преобладали другие группы, такие как B в H-Me-дикло и FLA и A в H-Me и H-Et60. -etac (рис. 7c и 7d). Общая картина взаимосвязи между соединениями классов FLA, A или B и измеренным эффектом NF- κ B не может быть установлена из восьми проанализированных здесь экстрактов, поскольку NF- κ B-неактивные экстракты L-Me- В hex и L-Me-etac в равной степени преобладали компоненты B или FLA / C соответственно.Не удалось найти простой, прямой корреляции между содержанием 20E, общим количеством экдистероидов, общим CAF или общим FLA и фармакологическими эффектами.
Обсуждение
Влияние чистого 20E на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BЭкдистероиды, как сообщается, обладают низкой токсичностью, со значениями LD50 выше 10 мг / кг у мышей после перорального или внутрибрюшинного введения; фактически предполагается постоянное безвредное воздействие пищи на животных и человека. [5] Также результаты in vitro для 20E в четырех разных типах клеток, включая HeLa, показали низкую цитотоксичность с IC50 ≥ 50 мкг / мл. [30] Это согласуется с нашими результатами для клеток HeLa-IL-6, где цитотоксичность для 20E была немного выше, чем для дексаметазона.
Различные фармакологические эффекты экдистероидов и экдистероидсодержащих растений стимулировали предположения о возможном вмешательстве в стероидные метаболические пути млекопитающих. [1,5] Однако предполагается, что экдистероиды, включая 20E, не взаимодействуют со стероидными рецепторами у млекопитающих и даже широко используются в коммерческих тестовых наборах in vitro для экспрессии индуцируемых экдистероидами трансгенов генов млекопитающих.В этих системах высококонцентрированные понастерон и муристерон А действуют как индукторы, в то время как другие экдистероиды оказались неактивными. [5] Однако иногда возникает вопрос, действительно ли экдистероиды не влияют на физиологию клеток млекопитающих. Oehme и др. . [31] , например, сообщил об ингибировании апоптоза, индуцированного Fas-лигандом и TNF-лигандом, муристероном А на уровне каспазы-8. В дополнение к этому противоречию следует отметить, что некоторые стероиды и нестероиды растительного происхождения, включая кукурбитацины, витанолиды, стильбеноиды или лигнаны, которые взаимодействуют со стероидными системами позвоночных, оказались лигандами эдистероидных рецепторов, т.е.е. аналоги насекомых рецепторов ядерных гормонов млекопитающих, входящие в суперсемейство регуляторов транскрипции. [32–34]
Наши данные, полученные в модели HeLa-IL-6, предполагают вызванное 20E ингибирование NF- κ B, сравнимое с ингибированием дексаметазоном или генистеином, которые, как известно, ингибируют этот ядерный фактор. in vivo и in vitro . Тем не менее, сравнение с партенолидом, витанолидами и ксантогумолом показывает, что 20E может не достичь эффективности более мощных ингибиторов NF- κ B растительного происхождения.
Признано, что аномальный домохозяйство NF- κ B в раковых клетках — один из механизмов, ответственных за предотвращение гибели клеток в токсичных условиях для нормальных клеток — дает ингибиторам NF- κ B возможность нацеливаться на раковые клетки за счет снижения повышенных исходных уровней, подавляя «нормальный» апоптотический ответ. [35] Наши результаты показывают определенное соответствие между мощным ингибированием NF- κ B (6 часов) и последующей гибелью клеток (24 часа) со сравнимыми значениями IC50 для всех веществ.Наряду с этим связь между ингибированием NF- κ B стероидами, включая муристерон А и понастерон, и последующей индукцией апоптоза уже поддерживалась Donjerković et al. ., [23] при последующем измерении жизнеспособности клеток. моменты времени в ячейках WEHI-231.
Несмотря на ингибирующее действие одного 20E в концентрациях от 7 до 50 мкм, остаются вопросы из-за отсутствия ожидаемого аддитивного или синергетического ингибирования при сочетании с партенолидом, дексаметазоном или экстрактами левзеи.Иногда для некоторых из этих комбинаций обнаруживались даже противоположные эффекты.
Противовоспалительные эффекты 20E были описаны некоторыми авторами (как описано Lafont и Dinan 2003), [5] , но есть также сообщения, которые не могут подтвердить такие эффекты in vivo . [7] Harmatha et al . [8] не смог обнаружить сниженную продукцию NO перитонеальными макрофагами при стимуляции LPS или интерфероном, даже после инкубации с 20E до 100 мкм.Наши эксперименты являются первым сообщением о 20E как модулятора активации NF- κ B и предполагают, что необходимы дальнейшие тесты in vitro и in vivo. Ингибирующий эффект наблюдался как после стимуляции PMA, так и TNF α , что может указывать на независимость от задействованного пути; либо классический канонический, либо альтернативный. [36]
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BТрадиционные препараты левзеи представляют собой гидроэтанольные экстракты корня, которые, как сообщается, содержат 0.04–0,81% от 20E. [11] С нашей метанольной (гидроэтанольной) мацерацией 20E был получен в концентрации 20 мг / г корня (35 мг / г корня), что находится в среднем диапазоне предыдущих отчетов. Общее содержание экдистероидов в экстрактах некоторых трав было сопоставимо с таковым в экстрактах корней, что позволяет предположить, что экстракты, обогащенные экдистероидами, также могут быть получены (зарегистрированный диапазон 20E в листьях 0,03–1,22% [11] ). Надземные части могут быть экономической альтернативой корням, потому что многолетние растения допускают постоянное культивирование и повторный сбор урожая. [30]
Протестированные экстракты и фракции демонстрируют различные химические профили и частично противоположные фармакологические эффекты. Экстракты, полученные из трав, были либо эффективными ингибиторами NF- κ B, либо вообще не влияли на активацию NF- κ B. Экстракты корней вызывали умеренное дальнейшее увеличение PMA или TNF- α , индуцированной активации NF- κ B. Этот эффект был наиболее выражен для экстракта с наибольшим содержанием 20E (29,6 мг / г; R-Et60-etac).Если рассматривать не только 20E, но и все экдистероидоподобные соединения, экстракты с самым высоким содержанием экдистероидов (83; 47; 35 мг / мл) ингибируют, активируют или не оказывают никакого эффекта.
Хотя CAF преобладает в экстрактах корней с NF- κ B сверхактивирующими эффектами, решающая роль является спорной, учитывая аналогичное общее содержание CAF в активирующем R-Et60-wa (66 мг / г) и ингибирующем H- Et60-etac (62 мг / г) экстракты. Точно так же концентрация флавоноидов, которые были более характерны для тестируемых здесь экстрактов трав, не коррелировала с влиянием на NF- κ B.Помимо необходимого разделения отдельных компонентов в группах ECD, CAF и FLA, можно сделать вывод, что за измеряемую активность ответственны соединения, отличные от типичных веществ, рассматриваемых здесь для отпечатков пальцев. Левзея содержит интересное сочетание фармакологически активных классов, к которым можно отнести традиционно описанные и доказанные эффекты. Помимо экдистероидов 20E, макистерона C, полиподина B и аджугастерона C [37,38] и флавоноидов, [39,40] больше внимания можно уделить сесквитерпеновым лактонам, [28,29] тиофенполиацетиленам, [41,42] и стильбены, [43] , которые известны своими цитотоксическими и противовоспалительными свойствами в различных моделях, включающих модуляцию активности NF- κ B (см. Также обзор Кокоски и Яновской [11] ).Также уже предлагались N-ферулоилсеротонины. [8] Различная активность составляющих групп в отношении отдельных физиологических мишеней может вызвать непредсказуемые экспериментальные эффекты, когда тестируются целые смеси с определенными пропорциями этих групп. С другой стороны, комбинация B-ингибирующего и активирующего принципов NF- κ в Leuzea может играть роль в его иммуномодулирующем и адаптогенном применении ввиду ранее предполагаемых биполярных умеренных эффектов, ответственных за формирование клеточного ответа на ослабленная стрессовая реакция. [44]
Вклад 20E в действие in vitro на активацию NF-
κ B экстрактов левзеиСомнения относительно вклада 20E в противовоспалительные эффекты экстрактов левзеи были выражены Harmata et al . (2008). [8] Хотя 20E сам по себе был ингибитором NF- κ B в нашей тестовой модели, аналогичные неопределенности возникают в отношении вклада 20E в ингибирование NF- κ B, вызванное экстрактами левзеи по трем причинам.Во-первых, химическая структура активирующих, ингибирующих и неактивных экстрактов: по отпечаткам пальцев наиболее сильными ингибиторами были экстракты с содержанием менее 0,5 мг 20E / г растительного материала или явно низким содержанием 20E по сравнению с другими составляющими. В экстрактах, содержащих больше активированного 20E NF- κ B, концентрация 20E в клеточной среде для диапазона активности экстрактов намного ниже, чем в тестах с одним 20E.
Вторая причина — это минимальное влияние добавления 20E к экстрактам: во время наших экспериментов с добавками мы увеличили естественное содержание 20E в тестируемых экстрактах (максимум 29 мг / г) путем добавления чистого 20E.Используя концентрацию экстракта на уровне примерно IC50 (максимум 100 мг / мл), естественное содержание 20E экстракта в среде максимум 1,3 нг / мл было искусственно увеличено с 2,28 мкг / мл до 11,4 мкг / мл чистого 20E. Однако активность экстракта существенно не изменилась по сравнению с одним экстрактом.
Последней причиной является минимальное воздействие при сочетании 20E с другими ингибиторами NF- κ B: добавление 20E к партенолиду (соотношение 1: 10–2: 1), кофейной кислоте (1: 2–10: 1) и хлорогеновая кислота (1: 1–10: 1) либо не оказали существенного влияния на эффект, полученный при использовании одних только других соединений, либо даже увеличили активность NF- κ B.Также комбинации с дексаметазоном (1: 10–5: 1) не показали значительного эффекта.
Таким образом, ни 20E, ни экдистероидоподобные соединения, по-видимому, не отвечают за модулирующие эффекты экстрактов левзеи NF- κ B. Хотя экстракты левзеи могут быть наделены интересным иммуномодулирующим потенциалом, 20E не объясняет модуляцию κ B NF-. В дополнение к его сомнительному вкладу в противовоспалительное действие, пригодность 20E в качестве аналитического маркера при использовании стандартных методов HPLC-UV ограничена.Несомненно, характерный компонент, указывающий на качество, трудности в обнаружении в УФ / видимом диапазоне по сравнению с более заметными соединениями и различение структурно очень похожих экдистероидов в прошлом приводили к определенному нежеланию обнаруживать 20E стандартными методами ВЭЖХ в смесях. [45]
Хотя 20E не всегда можно было обнаружить с помощью нашего метода отпечатков пальцев, мы показываем, что анализ ВЭЖХ может предоставить полезную информацию о составе экстракта для качественного контроля. Это может быть далее развито для стандартного количественного определения 20E и, что еще более важно, для других составляющих групп (сесквитерпенлактонов, стильбенов).Примечательно, что многие продукты Leuzea, предлагаемые для продажи в Интернете, не имеют спецификации используемой части растения или типа экстракта и декларируют только содержание 20E. Доказательства связи между концентрацией 20E и фармакологическим действием препаратов левзеи в основном отсутствуют. Наши результаты подтверждают предыдущие сомнения и предполагают, что необходимы более сложные стандарты качества для экстрактов левзеи.
Влияние дексаметазона в сочетании с экстрактами 20E или левзеи на NF-
κ BСпособность глюкокортикоидов подавлять иммунную функцию тесно связана со способностью рецептора глюкокортикоидов (GR) ингибировать транскрипционную активность NF- κ B.Это осуществляется посредством прямой физической ассоциации вместе с дополнительным механизмом антагонизма, включающим конкуренцию за общие механизмы транскрипционных кофакторов антагонизма NF- κ B-GR. [46] Точки пересечения этих двух физиологических медиаторов воспаления — популярная тема для исследований. [47] Дексаметазон предотвращает активацию NF- κ B с помощью различных внеядерных и внутриядерных механизмов. Например, повышающая регуляция синтеза I κ Ba, которая зависит от ранней и временной активации NF- κ B, связывание лиганда с C-концом глюкокортикоидных рецепторов, способствующее ядерной транслокации рецептора, а также связывание с Было высказано предположение, что NF- κ B через ДНК-связывающий домен глюкокортикоидного рецептора. [48–50] Эффект подавления NF- κ B дексаметазоном в клетках HeLa, обнаруженный в наших экспериментах, был ранее описан. [51] В отличие от других методов обнаружения модуляции NF- κ B в большей степени восходящего потока, люминометрическое обнаружение экспрессии IL-6 позволяет измерить общий, конечный результат перекрестного разговора глюкокортикоида-NF- κ B при транскрипционный уровень и не зависит от реальных задействованных вышестоящих механизмов.
Результаты после добавления 20E к клеткам, обработанным дексаметазоном, не были окончательными.Напротив, значительная модификация эффекта дексаметазона на активацию NF- κ B была обнаружена как для ингибирования, так и для активации экстрактов левзеи. Следовательно, наши результаты предполагают, что 20E не может существенно влиять на другие стероидные методы лечения с точки зрения опосредованной NF- κ B иммунореактивности на клеточном уровне, в то время как экстракты левзеи влияют. Если подтвержден in vivo , этот потенциал может открыть возможности для более низких концентраций стероидов, когда требуется ингибирование NF- κ B, как при некоторых противовоспалительных методах лечения или сопутствующем лечении рака.С другой стороны, наши результаты требуют дальнейшего изучения широкого использования препаратов левзеи в анаболических целях, где можно ожидать комбинации с другими стероидами. Возможные противоположные эффекты в зависимости от состава экстракта указывают на лучшую стандартизацию и фармаконадзор.
Выводы
Таким образом, 20E впервые описывается здесь как in vitro ингибитор активации NF- κ B, но это соединение вряд ли будет основным игроком в ингибирующих эффектах NF- κ B, проявляемых некоторые экстракты левзеи.Судя по нашим результатам, следует проявлять осторожность в отношении продаваемых экстрактов левзеи, которые не стандартизированы или стандартизированы только для 20E, поскольку естественные вариации химического состава исходного материала и его экстрактов могут вызывать различные эффекты. Что еще более важно, наши результаты указывают на потенциал взаимодействия левзеи со стероидными противовоспалительными препаратами. Это должно быть дополнительно изучено in vivo , чтобы исключить риски при использовании не по назначению. Однако это может также предоставить возможности, когда желательно снижение дозы стандартных стероидных препаратов.
Декларации
Конфликт интересов
Автор (ы) заявляют (ют), что у них нет конфликта интересов, который необходимо раскрывать.
Финансирование
Это исследование не получало специального гранта от какого-либо финансирующего агентства в государственном, коммерческом или некоммерческом секторах.
Сокращения
20E
AC150
Активирующая концентрация 150%
CAF
Производные кофейной кислоты (аттестованные в соответствии со спектром UV / VIS по отпечатку пальца HPLC)
ECD
ecdysteroids / VIS спектр)
FLA
флавоноиды (квалифицированы в соответствии с УФ / видимым спектром)
MNEC
максимальная не влияющая концентрация
Благодарности
Авторы благодарны профессору М.L. Lienhard Schmitz, Университет Гиссена, Германия, за любезно предоставленную линию клеток HeLa-IL-6 и полезные комментарии по их биохимии.
Список литературы
1Холодова
УД
.Фитоэкдистероиды: биологические эффекты, применение в сельском хозяйстве и дополнительной медицине
.Укр Биохим Ж
2001
;73
:21
—29
,2Курнуков
AG
,Сыров
VN
.[Противовоспалительные свойства экдистерона]
.Мед Ж Узбекистана
1988
;10
:27
—29
[на русском языке] .3Сахибов
AD
et al.[Экспериментальный анализ иммунотропного действия фитоэкдистероидов]
.Докл Акад. Наук Узбекской ССР
1989
;8
:55
—57
[на русском языке] .4Фомовская
GN
et al.[Иммуномодулирующее действие экдистероидов]
.Укр Биохим Ж
1992
;64
:56
—61
[на украинском языке] .5Lafont
R
,Dinan
L
.Практическое использование экдистероидов у млекопитающих, включая человека: обновление
.J Insect Sci
2003
;3
:1
—30
.6Тренин
DS
,Володин
В.В.
20-гидроксиэкдизон как модулятор лимфоцитов и нейтрофилов человека: оценка in vitro
.Arch Insect Biochem Physiol
1999
;41
:156
—161
,7Танигучи
SF
et al.Влияние Pfaffia iresinoides на экспериментальный воспалительный процесс у крыс
.Phytother Res
1997
;11
:568
—571
.8Harmatha
J
et al.Отсутствие влияния обычных фитоэкдистероидов на продукцию оксида азота иммуноактивированными макрофагами млекопитающих
.Стероиды
2008
;73
:466
—471
,9Соколов
ПД
. (глав. красный)[Растительные Ресурсы СССР. Цветковые растения. Их Химический состав. Использование.]
Санкт-Петербург
:Семейство сложноцветных
,1993
[на русском языке].10Оплетал
L
et al.[Фитотерапевтические аспекты болезней системы кровообращения 6. Leusea carthamoides (WILLD.) DC: современное состояние исследований и возможное использование таксона]
.Чешский Слов Фарм
1997
;46
:247
—255
[на чешском языке] .11Kokoska
L
,Janovska
D
.Химия и фармакология Rhaponticum carthamoides : обзор
.Фитохимия
2009
;70
:842
—855
.12Slama
K
et al.Гормоны насекомых у позвоночных: анаболические эффекты 20-гидроксиэкдизона у японского перепела
.Experientia
1996
;52
:702
—706
,13Гаджиева
RM
и др.[Сравнительное исследование анаболической активности веществ растительного происхождения: Экдистен, леветон и Прайм Плюс]
.Эксп Клин Фармакол
1995
;58
:46
—48
[на русском языке] .14Гольдберг
ED
et al.Влияние экстрактов лекарственных растений на развитие метастатического процесса
.Булл Эксп Биол Мед
2004
;138
:288
—294
.15Gaube
F
et al.Эффекты Leuzea carthamoides DC.на клетках аденокарциномы рака молочной железы человека MCF-7, обнаруженных с помощью профилирования экспрессии генов и функциональных анализов
.Planta Med
2008
;74
:1701
—1708
.16Худзенко
OP
et al.[Лекарственные растения как потенциальные источники антигипоксических препаратов с термозащитными свойствами]
.Фарм Ж
1992
;0
:62
—64
[на украинском языке].17Смоленова
Л
и др.[Клиническое исследование действия экстракта Leuzea carthamoides на пожилых людей]
.Фарм Обзор
1993
;62
:197
—202
. 18Азизов
AP
,Сейфулла
RD
.[Влияние элтона, леветона, фитотона и адаптона на работоспособность экспериментальных животных]
.Эксп Клин Фармакол
1998
;61
:61
—63
[на русском языке].19Азизов
AP
et al.Влияние настойки левзеи и леветона на гуморальный иммунитет спортсменов]
.Эксп Клин Фармакол
1997
;60
:47
—48
[на русском языке] .20Кормош
N
и др.Влияние комбинации экстрактов из нескольких растений на клеточный и гуморальный иммунитет пациентов с распространенным раком яичников
.Phytother Res
2006
;20
:424
—425
.21Володин
В.В.
и др.[Биологическая активность 20-гидроксиэкдизона и его ацетатов]
.Растительные ресурсы
1999
;2
:76
—81
[на русском языке] .22Li
Q
,Verma
IM
.Регуляция NF-kappaB в иммунной системе
.Nat Rev Immunol
2002
;2
:725
—734
.23Donjerković
D
et al.Опосредованная стероидами и ретиноидами остановка роста и апоптоз в клетках WEHI-231: роль NF- κ B, c-Myc и CKI p27kip1
.евро J Immunol
2000
;30
:1154
—1161
.24Sun
Y
,Yasukawa
K
.Новые противовоспалительные экдистероиды эргостанового типа из склероция Polyporus umbellatus
.Bioorg Med Chem Lett
2008
;18
:3417
—3420
.25Либерман
TA
,Балтимор
D
.Активация экспрессии гена мтерлейкина-6 посредством фактора транскрипции NF-KB
.Mol Cell Biol
1990
;10
:2317
—2334
.26Plaisance
S
et al.Белок, связывающий сигнальную последовательность рекомбинации, Jkappa конститутивно связан с сайтом NF-kappaB промотора интерлейкина-6 и действует как негативный регуляторный фактор
.Mol Cell Biol
1997
;17
:3733
—3743
.27Mosmann
T
.Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализа пролиферации и цитотоксичности
.J Immunol Methods
1983
;65
:55
—63
,28Nowak
G
et al.[Сесквитерпеновые лактоны ххх. Цинаропикрин у видов подтрибы centaureinae]
.Acta Soc Bot Pol
1986
;55
:17
—22
[на польском языке] 29Nowak
G
et al.[Сесквитерпеновые лактоны xxxiv. Guaianolides в роду Leuzea D.C]
.Acta Soc Bot Pol
1988
;57
:157
—164
[на польском языке] 30Biskup
E
,Lojkowska
E
.Оценка биологической активности экстрактов Rhaponticum carthamoides
.J Med Plants Res
2009
;3
:1092
—1098
.31Oehme
I
et al.Агонисты экдизон-индуцируемой системы экспрессии млекопитающих ингибируют апоптоз, индуцированный Fas-лигандом и TRAIL, в клеточной линии карциномы толстой кишки человека RKO
.Разница в гибели клеток
2006
;13
:189
—201
.32Динан
L
et al.Кукурбитацины — антагонисты стероидных гормонов насекомых, действующие на рецептор экдистероидов
.Biochem J
1997
;27
:643
—650
.33Динан
L
et al.Растительные натуральные продукты как агонисты и антагонисты стероидных рецепторов насекомых
.Наука о пестицидах
1999
;55
:331
—335
.34Harmatha
J
,Dinan
L
.Биологическая активность лигнанов и стильбеноидов, связанная с химическими взаимодействиями растений и насекомых
.Phytochem Rev
2003
;2
:321
—330
0,35Takahashi
N
et al.Ингибирование апоптоза, опосредованного 53BP2S, ядерным фактором κ B и белками семейства Bcl-2
.Genes Cells
2005
;10
:803
—811
,36Niederberger
E
,Geisslinger
G
.Путь IKK-NF- κ B: источник новых молекулярных мишеней лекарств в терапии боли?
FASEB J
2008
;22
:3432
—3442
.37Girault
JP
et al.Экдистероиды leuzea-carthamoides
.Фитохимия
1988
;27
:737
—742
.38Pis
J
et al.Экдистероиды из корней Leuzea carthamoides
.Фитохимия
1994
;37
:707
—711
.39Варга
E
et al.Флавоноиды из Leuzea carthamoides DC
.Herba Hungarica
1990
;29
:51
—55
.40Sharaf
M
et al.Два флавонольных 5-O-гликозида из корней Leuzea carthamoides
.Фитотерапия
2001
;72
:940
—942
.41Szendrei
K
et al.Ацетилены тиофена из корней левзеи
.Фитохимия
1984
;23
:901
—902
.42Chobot
V
et al.Фототоксическая активность тиофенполиацетилена из Leuzea carthamoides
.Фитотерапия
2006
;77
:194
—198
.43Хайду
Z
et al.Стильбен из корней Leuzea carthamoides
.J Nat Prod
1998
;61
:1298
—1299
.44Паносиан
A
et al.Адаптогены растений III. Более ранние и более свежие концепции и аспекты их действия
.Фитомедицина
1999
;6
:287
—300
.45Динан
L
et al.Хроматографические процедуры выделения стероидов растений
.J Chromatogr A
2001
;935
:105
—123
.46McKay
LI
,Cidlowski
JA
.Перекрестная связь между ядерным фактором каппа B и рецепторами стероидных гормонов: механизмы взаимного антагонизма
.Мол эндокринол
1998
;12
:45
—56
.47McKay
LI
,Cidlowski
JA
.Молекулярный контроль иммунных / воспалительных реакций: взаимодействия между ядерным фактором каппа B и путями передачи сигналов стероидным рецептором
.Endocr Ред.
1999
;20
:435
—459
.48Scheinman
RI
et al.Характеристика механизмов, участвующих в трансрепрессии NF-каппа B активированными глюкокортикоидными рецепторами
.Mol Cell Biol
1995
;15
:943
—953
.49Кастро-Кальдас
M
et al.Дексаметазон предотвращает индуцированную интерлейкином-1b активацию ядерного фактора-kB, регулируя синтез IkB-a в лимфобластных клетках
.Медиаторы воспаления
2003
;12
:37
—46
.50Гарсайд
H
et al.Глюкокортикоидные лиганды определяют различные взаимодействия с NF- κ B за счет аллостерических эффектов на ДНК-связывающий домен глюкокортикоидного рецептора
.J Biol Chem
2004
;279
:50050
—50059
.51Дворжак
Z
et al.Дифференциальное действие выбранных природных соединений с противовоспалительной активностью на рецептор глюкокортикоидов и NF-kappaB в клетках HeLa
.Chem Biol Interact
2006
;159
:117
—128
.© 2011 Авторы.