Как вырастить мукор: как вырастить мукор ( плесень на хлебе) за 1 день? 50 баллов и вообще возможно ли это?

Содержание

Урок окружающего мира «Грибы. Можно ли вырастить грибы на кусочке хлеба?»

Методическая разработка урока окружающего мира (2 класс)

УМК `Перспективная начальная школа».

Акимова Ирина Павловна

МАОУ СОШ №40 г. Томск

учитель начальных классов

Тема: Грибы. Можно ли вырастить плесень на кусочке хлеба?

Класс: 2Цель: познакомить с новой категорией грибов — плесневые (мукор).

Задачи:

1. На примере плесневых грибов дополнить представления детей о грибах;

2. Доказать необходимость выделения грибов по способу питания в особую группу живой природы;

3. Расширить знания детей о взаимосвязях живых организмов в природе.

4. Формировать исследовательские навыки;

Ожидаемый результат:

Понимание обучающимися определения – гриб;Усвоение основных свойств отличий шляпочного гриба и плесневого;Умение грамотно строить свои высказывания.

Оборудование: микроскопы, большие лупы, ТСО, запись «Звуки леса», плакаты солнышка (грустное и весёлое), учебник «Окружающий мир», презентация.

Выставка «Грибная полянка»: аппликации шляпочных грибов из бумажных салфеток.

Ход урока:

Этап

Цель

Деятельность

педагога

Деятельность

обучающегося

I Самоопределение к деятельности.

Организационный момент.

Включение учащихся в деятельность на личностно-значимом уровне.

— Долгожданный дан звонок,

Начинается урок.

— Но сегодня мы проведём необычный урок.

На фоне песни Улыбка говорит учитель.

— Улыбнитесь друг другу. Улыбка украшает человека, дарит всем настроение радости. Улыбка может рассеять мрачные мысли, погасить зарождающуюся ссору, разогнать серые тучки, поднять настроение. Только это настроение понадобится для работы. Пусть у вас на уроке будет такая же очаровательная улыбка, как у этого СОЛНЫШКА.

(слайд 1)

Дети улыбаются, настраиваются на работу.

II. Актуализация опорных знаний.

Повторение изученного материала, необходимого для «открытия нового знания».

На фоне мелодии «Леса» говорит учитель:

— Посмотрите на экран. Представьте, что вы оказались в этом замечательном уголке природы.

— Какой это уголок?

-Что вы могли встретить на своём пути, увидеть?

— Давайте вспомним, что мы знаем о грибах.

(слайд 2)

Это ЛЕС.

— Животных, насекомых, растения, цветы, грибы.

— Шляпочные грибы относятся к живой природе. Грибы дышат, питаются, растут и размножаются спорами. Тело гриба спрятано в земле: на поверхности выступает только плодовое тело гриба, в котором созревают споры. Среди грибов есть съедобные и несъедобные

Игра «Съедобные и несъедобные».

— Разделить на ИД грибы на две группы (съедобные и несъедобные).

(слайд 3)

Два ученика выполняют задание у ИД.

А каково строение гриба? Давайте вспомним.

(на ИД собрать гриб из частей).

— А чем особенны грибы?

(слайд 4)

— Гриб состоит из грибницы, ножки, шляпки.

— Это отдельное царство природы).

III Открытие нового знания.

— А кто может сказать, чем питаются грибы?

(слайд 5)

— Правильно. Главное отличие растений от грибов способ питания.

(слайд 6)

— Грибы могут расти на пне, на стволе дерева, на почве, в листьях растений. Грибница шляпочного гриба срослась с корнями дерева. Грибы питаются с помощью деревьев.

IV. Работа по учебнику

— Прочитайте в учебнике текст на стр.110 — 111 до вопроса.- Что вы узнали из текста?

(слайд 7)

— Тонкие нити грибницы добывают пищу из находящихся в почве остатков погибших растений и животных

— Некоторые грибы растут на стволах деревьев, эти грибы не помогают деревьям, а сами едят деревья и разрушают их кору.

— Какие это грибы?

— Любой гриб добывает себе питание не так, как добывает его зелёное растение, поэтому выделяют грибы в отдельное царство.

(слайд 8)

— Грибы трутовики.

V.Физми

нутка.

Формирование двигательной активности обучающихся, здоровьесбережение.

— Игр немало есть на свете,

поиграть хотите, дети!

Дети выполняют движения «Хлопай-топай» под музыку.

VI. Самоопределение к деятельности. Постановка учебной задачи.

— Посмотрите и скажите, что у меня в руках?

— Причем здесь хлеб, когда речь идет о грибах?

(слайд 9)- Значит, задача нашего урока будет в чем состоять?

— А можно ли вырастить плесень на кусочке хлеба?

— Дома вы тоже проделали такую работу.

— Как появилась плесень на ваших кусочках хлеба?- Эту загадку природы мы сегодня и будем разгадывать.

(слайд 10)

— Хлеб плохой,

— Что такое плесень, или доказать, что плесень тоже грибы плесень.

VII. «Открытие нового знания».

Решение устной задачи и обсуждение проекта ее решения.

Обучающиеся класса делятся на группы:

1 Группа — Исследуют плесень через лупы;

Группа — Исследуют плесень через микроскоп;

— Работают с хрестоматией, учебником;

— Добывают дополнительную литературу о пользе и вреде плесени, сообщения о проделанном опыте дома.

— Исследуйте в своей команде с помощью лупы и микроскопа эту загадку. Рассмотрите внимательно, что находится на тарелке.

— Итак, что вы увидели?

(слайд 11)

Дети исследуют с помощью микроскопа и лупы кусочки хлеба с плесенью, принесённые из дома0.

Каждый рассказывает своему соседу, что он увидел

Правильно, ребята, это плесень. Это плесневый гриб, который называется мукор. Для того чтобы увидеть грибы, оказывается, необязательно ходить в лес. Плесень в виде пушистого налёта на корке хлеба это тоже грибы.

— Можно ли назвать плесень шляпочным грибом?

— А с помощью чего эти грибы появились у меня в блюдце?

Учебник с. 112

-Прочитайте.

(слайд 12)- Учёные выделили плесень в группу грибов, поэтому она размножается, как и шляпочные грибы спорами.

— А откуда взялись эти споры?

— Что ещё вы увидели через лупу?

— На концах пушка образуются чёрные точки. Это головки со спорами. Когда споры созрели, головки лопаются. Потоки воздуха разнесли эти споры по всему помещению. Поэтому никто плесневые грибы не сажает, а они вырастают на забытом кусочке хлеба, в невымытой кастрюле.

— Нет. У неё нет шляпки

Дети читают вывод в учебнике.

— Чёрные точки, это споры

VIII. Самостоятельная работа с самопроверкой.

Соотнесение области знания и незнания.

— А встречали вы такие же грибы дома?

— Плесневые грибы поселяются на пищевых продуктах.- Можно ли есть испорченные плесенью продукты?

Учебник с.112 (прочитайте).

(слайд 13)

— Да, в банке с вареньем, на трубе и т.д

Дети читают вывод в учебнике.

IX. Включение нового знания в систему знаний и повторение

Поиграем в игру Да или нет

— Шляпочный гриб состоит из грибницы и плодового тела? — Плодовое тело состоит из шляпки и ножки? — Грибы сами из воды и углекислого газа на солнечном свету приготавливают себе пищу? — Гриб часть пищи всасывает из почвы, а часть из корней деревьев? — Грибница вредит корням деревьев, около которых растёт? — Трутовики разрушают кору деревьев? — Плесень, которую можно увидеть на кусочке хлеба, в банке с вареньем это тоже грибы? — Плесневые грибы относятся к шляпочным грибам?

— МОЛОДЦЫ!

— Да

-Да

— Нет

— Да

Нет

-Да.

-Да.

— Нет.

X. Рефлексия деятельности

— Какую ставили учебную задачу?- Удалось её решить? — Какое открытие для себя вы сегодня сделали?

(слайд 14)

— Мы узнали о плесневых грибах. Они не шляпочные, называются мукор. Эти грибы размножаются спорами. Грибы — это особая группа потому, что добывать себе пищу из воды и углекислого газа не могут

XI .Итог занятия.

— Давайте оценим свою работу. Определите качество успеха. Возьмите картинку с изображением СОЛНЫШКА по своему настроению и покажите.

(слайд 15)

Дети показывают в своей команде своё настроение (картинка солнышка – грустное или весёлое).

-Вы подарили мне тепло и радость хорошей работой. Всем за урок спасибо.

Если Вы являетесь автором этой работы и хотите отредактировать, либо удалить ее с сайта — свяжитесь, пожалуйста, с нами.

Методические указания по проведению лабораторной работы по дисциплине «Основы биологии. Основы общей биологии», страница 2

3.   Медленно вращая макровинт (11) и глядя в микроскоп, добейтесь четкого изображения объекта (в данном случае целлюлозных волокон ваты). Обследуйте морфологию волокон по всей длине, используя на рукоятке (16) винты продольного и поперечного перемещения. «Пройдитесь» по препарату вдоль и поперек. Сидящие рядом за столом студенты рассматривают препарат самостоятельно. Бинокулярная насадка (2) устанавливается в удобном для каждого положении и фиксируется винтом (15).

4.  Для просмотра препарата на бóльшем увеличении установите в револьверное устройство соответствующий объектив. На малом увеличении добейтесь резкого изображения, затем аккуратно поверните револьверное устройство так, чтобы объектив с большим увеличением оказался строго над препаратом. О правильной установке судят по легкому щелчку. Аккуратно вращая микровинт (12) добейтесь четкого изображения. Качество изображения можно улучшить также регулировкой диафрагмы и аккуратным перемещением конденсора рукояткой (13).

5.

  Закончив просмотр, переведите микроскоп на малое увеличение. Извлеките препарат, выключите микроскоп клавишей (8), регулятором яркости горения лампы (17) уменьшите яркость лампы 1 и выньте вилку (9) из сети.

Вопросы для самоконтроля по теме № 1

1.  Из каких систем состоит световой микроскоп и какова его разрешающая способность?

2.  Назовите основные детали светового микроскопа, которым вы пользовались при выполнении работы. Каково назначение этих деталей?

3.  В чем преимущество бинокулярного микроскопа по сравнению с монокулярным?

4.  Опишите последовательность операций при приготовлении пробного микропрепарата и подготовке микроскопа к работе.

5.  Какова последовательность операций при микроскопическом изучении объекта на малом и большом увеличении?

Методические указания к теме № 2

Плесневый гриб мукор является удобным объектом для микроскопического изучения особенностей клеточного строения грибов. В лабораторной работе вы будете использовать как постоянный препарат мицелия мукора, так и свежеприготовленный.

Вырастить мицелий плесневого грибы мукора можно самостоятельно в домашних условиях. За 7-10 дней до проведения лабораторной работы поместите в чашку Петри (или в пластиковую коробочку с крышкой, например, из-под творога, печенья и т.д.) кусок фильтровальной бумаги или марли, смоченной водой. Сверху положите мякиши черного или белого хлеба, подержите 2-3 часа в открытой коробочке, затем закройте крышку. Полученную «влажную камеру» с хлебом оберните плотной материей и поместите в темное место при температуре 25-28ºС. В течение срока выращивания необходимо следить за поддержанием в камере высокой влажности и при необходимости подливать в нее немного воды. При соблюдении необходимых условий выращивания (температура, влажность, темнота) мицелий активно разрастается на поверхности и внутри хлебных мякишей, причем хорошо видны на мицелии и многочисленные черные точки – это головки (спорангиеносцы) со спорами. При внимательном рассмотрении нитей мицелия мукора на постоянном препарате даже на малом увеличении можно заметить важную особенность строения – мицелий представляет собой одну ветвящуюся гигантскую клетку, т.  е. мукор имеет несептированный (не подразделенный на клетки) мицелий (рис. 4). Это пример так называемой сифоновой структурной организации, характерной для многих (не для всех) грибов и некоторых водорослей. При анализе препарата обратите внимание на места ветвления мицелия, на органы спороношения – спорангии, имеющие шаровидную форму и заполненные многочисленными спорами, на спорангиеносцы и их утолщенную верхнюю часть – колонку. Последняя хорошо видна на уже вскрывшихся спорангиях.

Ход работы

1.  Установите на предметный столик постоянный препарат мукора, укрепив предметное стекло в зажим препаратоводителя.

2.  Рассмотрите препарат на малом увеличении, передвигая его в поле зрения, пользуясь рукояткой препаратоводителя. Размер нитей, спорангиеносцев и самих спорангиев мукора позволяет ограничиться малым увеличением для общего анализа.

3.  Для более тщательного микроскопического анализа препарата можно перевести микроскоп на большое увеличение. При этом обратите внимание на места ветвления нитей, на отсутствие перегородок по всей их длине, на оболочку спорангия и на морфологию спор.

4.  Зарисуйте препарат мукора с указанием особенностей строения его мицелия и спорангиев.

5.  Переведите микроскоп на малое увеличение. Извлеките препарат.

6.  Приготовьте препарат свежего мицелия мукора, отщепив пинцетом несколько нитей с головками и поместив их на сухое предметное стекло.

7.  Поместите препарат на предметный столик и внимательно изучите его при малом увеличении. Зарисуйте препарат и сделайте соответствующие подписи.

8.  Нанесите каплю воды на поверхность препарата, накройте его покровным стеклом. Рассмотрите сначала при малом, затем при большом увеличении микроскопа.

9.  Зарисуйте препарат и сделайте соответствующие подписи.

Вопросы для самоконтроля

1.  К какому типу структурной организации относят мукор и почему?

2.  Как можно приготовить растущий мицелий мукора самостоятельно?

3.   Каково назначение тех частей тела гриба мукора, которые вы рассмотрели под микроскопом?

4.  Укажите типы структурной организации у представителей царства грибов.

Урок окружающего мира во 2-м классе по теме «Грибы. Можно ли вырастить грибы на кусочке хлеба?»

Цель: познакомить с новой категорией грибов — плесневые (мукор).

Задачи: на примере плесневых грибов дополнить представления детей о грибах; доказать необходимость выделения грибов по способу питания в особую группу живой природы; расширить знания детей о взаимосвязях живых организмов в природе.

Оборудование: тарелки с выращенным плесневым грибом-мукором (одна на парту), лупы, учебник, хрестоматия.

I. Организационный момент.

(Под сопровождение фонограммы шума леса). Приложение 1

Окружающий нас мир интересно познавать!
Его тайны и загадки мы готовы разгадать.

II. Актуализация опорных знаний.

— Посмотрите на экран. Представьте, что вы оказались в этом замечательном уголке природы.

— Что вы могли встретить на своём пути, увидеть? (Животных, насекомых, растения, грибы)

— Давайте вспомним, что мы знаем о грибах. (Шляпочные грибы относятся к живой природе. Грибы дышат, питаются, растут и размножаются спорами. Тело гриба спрятано в земле: на поверхности выступает только плодовое тело гриба, в котором созревают споры. Среди грибов есть съедобные и несъедобные)

— А каково строение гриба? Давайте вспомним. На карточках отмечают названия частей, карточку сдают. (Проверка домашнего задания)

III. Самоопределение к деятельности. Постановка учебной задачи.

— Ребята, как вы думаете, вы всё знаете о грибах? (Нет)

— Посмотрите и скажите, что у меня в руках? (Хлеб плохой, плесень)

— Предположите, о чём пойдёт сегодня разговор? (Мы должны выяснить, что это у вас в руках)

IV. Открытие нового знания.

— А кто может сказать, чем питаются грибы? (Грибы могут расти на пне, на стволе дерева, на почве, в листьях растений. Грибница шляпочного гриба срослась с корнями дерева. Грибы питаются с помощью деревьев)

— Правильно. Главное отличие растений от грибов – способ питания.

Прочитайте в учебнике текст на стр.110.

— Что вы узнали из текста? (Тонкие нити грибницы добывают пищу из находящихся в почве остатков погибших растений и животных)

— А как деревья добывают себе питание? (Зелёное растение может “приготовить” себе пищу из воды и углекислого газа с помощью солнечного света)

— Правильно. Грибница – основная часть гриба – это тонкие нити, белые перепутанные нити, спрятанные под землёй. Эти нити срастаются с корнями деревьев. По стеблю в корни деревьев поступает пища, “приготовленная” в зелёных листьях. А корни деревьев делятся этой пищей с грибами. Так грибы и деревья вместе добывают питание. Некоторые грибы растут на стволах деревьев, эти грибы не помогают деревьям, а сами “едят” деревья и разрушают их кору. (Грибы – трутовики). Любой гриб добывает себе питание не так, как добывает его зелёное растение.

Физминутка. Приложение 2 (имеет большой объем, находится у автора)

Под клип на песенку “На лесной полянке выросла поганка” выполняют движения.

Выступление обучающихся с защитой исследовательской работы “Что такое грибы?”.

Обучащиеся задают вопросы по работе выступающим.

— Ребята, как вы думаете можно ли вырастить грибы на кусочке хлеба?

— Мнения разделились. Поднимите руки, кто любит разгадывать тайны природы. Одна из загадок природы находится у вас на парте и у меня в руках.

— Исследуйте со своим соседом по парте с помощью лупы эту загадку. Рассмотрите внимательно, что находится на тарелке.

— Итак, что вы увидели?

— Правильно, ребята, это плесень. Это плесневый гриб, который называется мукор. Для того чтобы увидеть грибы, оказывается, необязательно ходить в лес. Плесень в виде пушистого налёта на корке хлеба – это тоже грибы.

— Можно ли назвать плесень шляпочным грибом? (Нет. У неё нет шляпки)

— А с помощью чего эти грибы появились у меня в блюдце?

— Учёные выделили плесень в группу грибов, поэтому она размножается, как и шляпочные грибы – спорами.

— А откуда взялись эти споры? Что ещё вы увидели через лупу? (Чёрные точки, это споры)

— На концах пушка образуются чёрные точки. Это головки со спорами. Когда споры созрели, головки лопаются. Потоки воздухи разнесли эти споры по всему помещению. Поэтому никто плесневые грибы не сажает, а они вырастают на забытом кусочке хлеба, в невымытой кастрюле.

— А встречали вы такие же грибы дома? (Да, в банке с вареньем, на трубе и т. д.)

— Плесневые грибы поселяются на пищевых продуктах. Испорченные плесенью продукты есть нельзя, так как ими можно отравиться.

— Ребята, а как вы думаете, эти грибы человек как-нибудь использует, приносят ли они ему пользу?

— Об этом вы прочитаете в хрестоматии текст “Как грибы помогают человеку?”.

— Что вы узнали из этого текста?

— Ну, а если все же случилась беда. Вы отравились грибами. Помощь окажет только врач. (Высвечиваются на доске первые признаки отравления: тошнота, рвота, боли в животе проявляются через 2-4 часа после употребления грибов)

Стук в дверь.

— Ой, ребята, извините, пожалуйста.

Входит доктор. (Ребенок старшеклассник)

— Здравствуйте, ребята!

— Здравствуйте, доктор!

— Итак, вас интересует первая помощь при отравлениях грибами?!

— Тогда слушайте внимательно и запоминайте:

1. При всяком грибном отравлении, даже легком, необходимо немедленно вызвать “скорую помощь” по телефону … “03”.

2. До прибытия врача оказать пострадавшему первую помощь:

Во-первых, нужно давать маленькими глотками соленую холодную воду в большом количестве до появления рвоты.

Во-вторых, дать холодный крепкий чай или кофе.

В-третьих, уложить в постель на живот, положить в ноги грелку.

3. Остатки грибов, вызвавших отравление, сохранить до прихода врача для исследования в лаборатории.

– И вообще! (Грозит пальцем) Детям до 10 лет есть грибы, не рекомендуется! Запомнили?!

– Собирайте только знакомые грибы! В этом вам помогут книги и опытные грибники!

– Ну, мне пора! Рад был вам помочь!

— Спасибо, доктор! До свидания!

Доктор уходит.

V. Закрепление.

Поиграем в игру “Верите или нет” (хором отвечают да – нет).

— Шляпочный гриб состоит из грибницы и плодового тела? (Да)

— Что плодовое тело состоит из шляпки и ножки? (Да)

— Что грибы сами из воды и углекислого газа на солнечном свету приготавливают себе пищу? (Нет)

— Что гриб часть пищи всасывает из почвы, а часть из корней деревьев? (Да)

— Что грибница вредит корням деревьев, около которых растёт? (Нет)

— Что трутовики разрушают кору деревьев? (Да)

— Что плесень, которую можно увидеть на кусочке хлеба, в банке с вареньем – это тоже грибы? (Да)

— Что плесневые грибы относятся к шляпочным грибам? (Нет)

VI. Рефлексия деятельности.

— Какую ставили учебную задачу?

— Удалось её решить?

— Какое открытие для себя вы сегодня сделали?

(Мы узнали о плесневых грибах. Они не шляпочные, называются мукор. Эти грибы размножаются спорами. Грибы — это особая группа потому, что добывать себе пищу из воды и углекислого газа не могут.)

VII. Домашнее задание

Продолжаем готовить доклады о культурных растениях.

Урок и выступление обучающихся сопровождается презентацией. Приложение 3

Краткое сообщение про гриб мукор. Грибы паразиты мукор: осоенности, опасность

Вопрос 1. Где поселяется плесень?

Плесень любит влажность, тепло и сырость. И не обязательно присутствие кислорода.

Вопрос 2. Для чего нужны дрожжи?

Дрожжи разлагают сахар на спирт и углекислый газ. Освобождающаяся при этом энергия используется дрожжами для обеспечения их жизнедеятельности. Пузырьки углекислого газа, образующиеся в тесте, делают его лёгким и пористым.

Лабораторная работа № 7. Плесневый гриб мукор.

1. Вырастите на хлебе белую плесень. Для этого на слой влажного песка, насыпанного в тарелку, положите кусок хлеба, накройте его другой тарелкой и поставьте в тёплое место. Через несколько дней на хлебе появится пушок, состоящий из тонких нитей мукора. Рассмотрите в лупу плесень в начале её развития и позднее, при образовании чёрных головок со спорами.


3. Рассмотрите микропрепарат при малом и большом увеличении. Найдите грибницу, спорангии и споры.



Вывод: мукор – плесневый гриб. Гифы состоят из одной клетки. При размножении на концах гиф появляются шарики (спорангии). Сначала бесцветные, а потом, по мере созревания спор, чернеют. Когда лопаются спорангии, споры высвобождаются.

Лабораторная работа № 8. Строение дрожжей.

1. Разведите в тёплой воде небольшой кусочек дрожжей. Наберите в пипетку и нанесите 1 -2 капли воды с клетками дрожжей на предметное стекло. Накройте покровным стёклышком и рассмотрите препарат с помощью микроскопа при малом и большом увеличении. Сравните увиденное с рисунком 50. Найдите отдельные клетки дрожжей, на их поверхности рассмотрите выросты — почки.


На рисунке 50 в учебнике точно такие дрожжи и тоже почкуются.

3. На основе проведённых исследований сформулируйте выводы.

Вывод: Грибы-дрожжи – это одноклеточные организмы, имеющие форму шарика. Живут в питательной жидкости, богатой сахаром. Размножаются дрожжи почкованием. У них есть клеточная стенка, вакуоль, цитоплазма, ядро, при почковании у материнской клетки появляется почка (иногда отделяется от материнской клетки).

Вопрос 1. Какое строение имеет мукор?

Гифы мукора состоят из одной клетки. При размножении на концах гиф появляются шарики (спорангии со спорами).

Вопрос 2. Как он размножается?

При размножении на концах гиф появляются шарики (спорангии со спорами). Сначала бесцветные, а потом, по мере созревания спор, чернеют. Когда лопаются спорангии, споры высвобождаются. Споры разносятся.

Вопрос 3. Из чего получают лекарство пенициллин?

Лекарство пенициллин получают из плесневого гриба пеницилл. В клетках пеницилла образуется вещество, убивающее некоторые болезнетворные бактерии. Его специально разводят, чтобы получать лекарства для лечения многих болезней.

Вопрос 4. Чем пеницилл отличается от мукора? Что общего у этих плесневых грибов?

Грибница пеницилла, в отличие от грибницы мукора, состоит из ветвящихся нитей, разделённых перегородками на клетки. Споры пеницилла расположены не в головках, как у мукора, а на концах некоторых нитей грибницы в мелких кисточках.

Вопрос 5. В чём особенность строения и размножения дрожжей? Для чего разводят дрожжи?

Эти микроскопические грибы состоят из одной клетки, имеющей форму шарика. Они живут в питательной жидкости, богатой сахаром. Размножаются дрожжи почкованием. Сначала на взрослой клетке появляется небольшая выпуклость. Она увеличивается и превращается в самостоятельную клетку, которая вскоре отделяется от материнской.

Дрожжи разводят для того, чтобы они «ожили» и стали «работать» быстрее. Тогда тесто станет подниматься, т.е. станет пышным.

Подумайте

Как можно объяснить появление плесневых грибов на хлебе, фруктах и других продуктах?

В воздухе в разных формах жизни обитают плесневые грибы. Им необходима среда для их размножения. Чаще всего это сыроватый или влажный хлеб. Продукты питания являются местом для размножения, то есть для дальнейшего развития плесневых грибов. Главным условием появления плесени является влажность. Вторым условием является температура воздуха. При более высокой температуре плесень появляется и развивается быстрее.

Цель урока:
— дать общую характеристику плесневых грибов, рассмотреть роль плесневых грибов в природе и значение для человека.

Задачи урока:
— развивать понятие о многообразии живых организмов;
— раскрыть влияние плесневых грибов на здоровье человека;
— воспитывать культуру научного труда в ходе учебно-эксперементальной деятельности;
— изучить особенности строения плесневых грибов на примере гриба мукора.

Оборудование урока:
— учебник, тетради для практических работ, проектор и мультимедийная доска, слайды «Строение плесневых грибов», ноутбуки с подключением к сети Internet, материалы сайта http://www.virtulab.net «Виртуальная физика биология химия экология | Виртуальная лаборатория ВиртуЛаб» (лабораторная работа «Строение плесневого гриба мукора»).

Ход урока:

I. Вступительное слово учителя
Мы с вами продолжаем путешествие по стране знаний, дороги которого на этот раз пролегают через царство Грибов. На прошлом уроке мы дали общую характеристику грибам. Сегодня же более подробно рассмотрим плесневые грибы. Поговорим об их роли в природе и в жизни человека. А также рассмотрим под микроскопом строение плесневого гриба, но начнем мы с проверки домашнего задания.

II. Проверка домашнего задания
Решение заданий ЕГЭ по теме «Царство грибы. Общая характеристика»:
А1. Грибы – это представители:
1) прокариотов
2) эукариотов
3) самых древних организмов
4) растений
А2. Что образуется при сожительстве мицелия и гриба с корними растения?
1) микропиле
2) микориза
3) зигота
4) ризоиды
А3. Как грибы поглощают питательные вещества?
1) корневыми волосками
2) устьицами
3) микропиле
4) всей поверхностью тела
А4. Как называется наука, изучающая грибы?
1) ботаника
2) палеоботаника
3) экология
4) микология
В1. На сколько групп по типу питания делятся грибы?

III. Общая характеристика плесневых грибов

Кроме шляпочных, в природе встречаются и другие грибы, например, плесени. Они иногда так малы, что рассмотреть их удается только под микроскопом. Таков гриб мукор (слайд «Мукор»), образующий плесень. Этот гриб часто появляется на хлебе, овощах, на конском навозе в виде пушистого белого налета, который через некоторое время становится черным.

Слайд «Мукор»

Размножается мукор спорами. Некоторые нити грибницы поднимаются вверх и расширяются на концах. В этих расширениях, имеющих вид округлых черных головок, образуются споры (слайд «Головка мукора со спорами»).

Слайд «Головка мукора со спорами»

После созревания спор головки вскрываются. Споры разносятся. При благоприятных условиях они прорастают в грибницу. Грибница мукора, как и всех грибов, не имеет хлорофилла. Мукор питается готовыми органическими веществами.

IV. Плесневые грибы и человек

Существует большое количество фактов, свидетельствующих об отрицательном влиянии плесневых грибов на организм человека. Многие грибы вырабатывают ядовитые, галлюциногенные, аллергенные вещества. С другой стороны мир уже невозможно представить без антибиотиков, многочисленных лекарств и пищевых продуктов, вырабатываемых с помощью грибов. Однако, непосредственное влияние плесневых грибов на здоровье человека еще недостаточно изучено. Для того что бы меньше сталкиваться с вредным влиянием плесени надо следовать простым правилам: продукты необходимо его употреблять только в течение срока годности, обозначенного на этикетке; необходимо соблюдать санитарно-гигиенических условия в помещении где вы живете или часто находитесь.

А сейчас мы с вами рассмотрим под микроскопом строение плесневого гриба мукора.

V. Лабораторная работа

Цель нашей работы сегодня — изучить строение плесневого гриба мукора под микроскопом. Для этого мы воспользуемся специальным оборудованием: микроскопом, предметным и покровным стеклом, пинцетом, пипеткой, метиленовым синим красителем, лотком.

Октрываем браузер FireFox, вводим адрес http://www.virtulab.net, окрываем раздел «Биология. 7 класс» и выбираем работу «Строение плесневого гриба мукора». Далее следуем инструкции.

См. ход работы на рисунке.

© Copyright: Солодкая Галина Андреевна, 2013

Рецензии

Ежедневная аудитория портала Проза.ру — порядка 100 тысяч посетителей, которые в общей сумме просматривают более полумиллиона страниц по данным счетчика посещаемости, который расположен справа от этого текста. В каждой графе указано по две цифры: количество просмотров и количество посетителей.

На земле насчитывается невероятно большое количество представителей этого огромного семейства, включающего более ста тысяч видов. Грибы очень сильно отличаются друг от друга: по внешнему виду, среде обитания, есть и съедобные, опасные и полезные. Но объединяет их то, что у всех грибов есть грибница и мицелий. И, как известно, плесень также является грибом. В данной статье речь пойдет о таком грибе, как мукор. Нам он больше известен под названием белая плесень. И каждый из нас наверняка не раз встречался с ней, возможно, даже на своей кухне. Гриб мукор обитает в верхних слоях почвы, а также на органических продуктах. Также он любит темные, влажные и теплые места. Если на кухне оставить небольшой кусочек хлеба, то через некоторое время на нем образуется пушистый белый налет, который со временем сереет — это и есть тот самый гриб мукор. Если внимательно присмотреться, то можно разглядеть его строение. Но хорошо рассмотреть части гриба мукора удастся только под микроскопом.

Размножение и питание

Размножается гриб мукор двумя способами: бесполым и половым. Первый способ более сложный, так как процесс созревания мицелия в спорангиях более длительный. Оболочка спорангий называется каллозой. Она очень устойчива к внешней агрессивной среде. Но под действием атмосферной влаги разрушается, выпуская на свет миллиарды спор. Последние имеют настолько маленькие размеры, что могут проникнуть куда угодно. Они всегда присутствуют в воздухе. Потому при благоприятных условиях плесень появляется всюду. При нити мицелия соединяются, образуя при этом зиготу. Так появляется новый гриб. Мукор — гриб-сапрофит, то есть он питается готовыми органическими веществами. Его еще называют грибом-мусорщиком, так как после него не остается органических отходов. Иногда такие грибы появляются на еще живом, но уже больном организме, после гибели которого останки будут полностью переработаны.

Опасность гриба мукор

Применение в медицине и пищевой промышленности

Определенные виды этого гриба, наоборот, очень полезны для человека. Так, из него готовят некоторые антибиотики (рамицин). Еще этот гриб используют в пищевой промышленности в качестве закваски (китайские дрожжи). С помощью него делают «темпе», «соевый сыр», производят картофельный спирт.

Как предотвратить заражение продуктов плесенью

Конечно же, необходимо следить за тем, чтобы продукты питания не подвергались заражению плесневыми грибами. Помимо того что это опасно, еще и экономически накладно. Для этого не оставляйте рядом с хорошими продуктами остатки еды. Следите за уровнем влажности в помещении. Уезжая надолго, не оставляйте продукты питания. И если на продукте, на первый взгляд еще пригодном для употребления, появилась плесень, кушать его уже нельзя.

Плесневые грибы давно и успешно сосуществуют с человеком. Одни разрастаются на продуктах питания или даже одежде, других специально выращивают в высокотехнологичных лабораториях. Причем нередко это одни и те же виды. Например, гриб мукор или другое его название белая плесень.

Внешний вид: описание и строение

Люди, далекие от микологии, иногда сталкиваются с колонией гриба мукора. У него несколько этапов развития: в самом начале представляет собой налет белесого пушка, именно поэтому в народе он больше известен под именем белой плесени. Хотя нередко бывает бежевым или сероватым.

В зависимости от среды, отдельные волоски достигают нескольких сантиметров в высоту. Со временем пятно темнеет. Это происходит, когда на кончике каждого волоска созревают черные головки со спорами – спорангии.

Строение плесневого гриба мукора очень простое. Мицелий погружен в субстрат и представляет собой сеть белых нитей (гиф) разветвляющихся и постепенно утончающихся к перефирии. Колония белой плесени — это растущие вверх от тела грибницы спорангиеносцы, на которых образуются головки спорангиев со спорами. Строение легко увидеть под микроскопом.

Питание

Для питания грибу мукору необходим кислород, высокая влажность, тепло и органика. Белая плесень с одинаковым успехом поселяется в навозе, продуктах питания и в верхних слоях почвы – там, где больше всего неразложившихся растительных остатков. По способу питания белую плесень относят к сапротрофам (извлекает питательные вещества из мертвого органического материала). Ему подойдут любые продукты, обладающие высокой калорийностью. Поэтому высокоуглеводный хлеб, картофель, фрукты, являются лакомыми объектами для разнообразия меню.

Размножение

В благоприятных условиях, когда нет недостатка в питании, тепло, влажно и есть постоянный доступ воздуха, мукор размножается бесполым способом: спорами.

Споры долго сохраняют жизнеспособность. Если воздушными массами их занесло в неблагоприятные условия – они попросту не будут развиваться, а выждут свой час. При появлении благоприятных условий споры прорастут, образуя новый мицелий гриба мукора.

Помимо этого для гриба мукора свойственно половое размножение, в том случае, если произошло истощение субстрата: гифы разных мицелиев сближаются вздутыми концами друг к другу (гаметангиями ) и образовывают зиготу, покрытую шиповатой оболочкой. По прошествии периода покоя оболочка зиготы лопается и из нее прорастает зародышевый мицелий на котором образуется зародышевый спорангий со спорами полового спороношения. И уже из этих спор начинает свое развитие мощный мицелий.

Использование

На самом деле грибов мукоров насчитывается порядка 60 видов. Некоторые из них выращивают для получения лекарственных препаратов – антибиотиков. Другие используются для приготовления продуктов питания. В этом случае плесневый гриб является закваской, например, для сыров тофу и темпе, кроме того, белая плесень участвует в процессе производства картофельного этанола.

В чем опасность

Безобидный, казалось бы, гриб может вызвать мукоромикоз – крайне редкое, но опасное поражение внутренних органов грибом мукором. Встречается у животных и человека. Споры, попадая в легкие или в порезы на коже, начинают развиваться: тепло, влажно и есть кислород. Это возможно только при снижении защитных функций организма. Правда, опасность представляют не более 5 видов из 60 известных.

Как вырастить

Стремительное развитие и нюансы размножения сделали белую плесень отличным объектом для проведения опытов: все стадии развития видны под микроскопом и представляют практический и научный интерес. Провести эксперимент по выращиванию гриба мукора очень легко. Почему? Потому что споры белой плесени есть практически везде – распространяются потоками воздуха.

Для опыта необходимо:

  1. Создать среду для питания в отдельной емкости (можно использовать тарелку). Например, увлажнить кусочек хлеба или положить на мокрую основу: кусочек ткани, промокательной или фильтровальной бумаги.
  2. Хлеб изолировать, накрыв сверху стеклянной банкой, стаканом или прозрачным пакетом.
  3. Поместить конструкцию в тепло при температуре не ниже 20°С. Допустимые колебания – до 25°С.
  4. В течение нескольких дней при условии, что хлеб постоянно находится во влажной среде, на нем появится белый пушок гриба мукора, который затем постепенно потемнеет.

Микроскопические живые организмы совсем рядом и охотно используют любую возможность для выживания. При этом вряд ли кто-то решится вырастить грибы мукоры в квартире для изготовления лекарств. Поэтому лучше заранее предотвратить саму возможность для их размножения и хранить продукты правильно.

Каждый не понаслышке знает, что если оставить продукты питания в теплой комнатной температуре на долгое время, то на еде появляется белая, с шероховатой поверхностью плесень, от которой исходит неприятный запах. Эта плесень называется гриб мукор. Его можно встретить не только на продуктах, но и на почве и разных остатках органического происхождения.

Мукор относится к грибам, которые могут оказывать негативное влияние на организм человека и животных и вызывать заболевания. Несмотря на это, его часто используют для производства антибиотиков, закваски и сброженных пищевых продуктов. Второе название микроорганизма – белая плесень.

Мукор относится к группе низших плесневых грибов из класса зигомицеты. Данный класс состоит из 60 видов. Отличительной чертой мукора является отсутствие перегородок в неклеточной структуре мицелия.

Как и остальные грибы, плесень имеет мицелий, который представлен большой недифференцированной клеткой, которая обладает большим количеством ядер в цитоплазме. Перегородки в клетке образуются в период размножения. Это способствует отделению спорангиев – репродуктивных органов.





Плесень неприхотлива, потому появиться и расти может в любом месте. Главное условие появления – питательные вещества, влажный и теплый воздух. Специалисты утверждают, что при наличии всех необходимых условий мукор может появиться даже в постройках между кирпичами или бетоном.

В случае неблагоприятных условий, спора покрывается защитной капсулой, обменные процессы замедляются и организм может существовать в таком виде до появления условий для возобновления жизнедеятельности. Мукор был обнаружен историками при раскопках гробниц египетских фараонов, что доказывает его широкую распространенность.

Внешний вид и фото

Внешний вид мукора полностью зависит от стадии развития. На начальном этапе он имеет вид белого пушка, благодаря чему он и получил название «белая плесень». Длина пушка зависит от условий внешней среды.


При активном росте количество спорангиев на концах пушка увеличивается, что придает организму сероватый оттенок. Зрелый организм имеет черный цвет. Как выглядит такой гриб, можно увидеть на фото.

Строение гриба мукора

Подробно изучить структуру белой плесени можно только под микроскопом. Основная часть гриба называется мицелием, который имеет вид клетки с разветвлениями и большим количеством ядер. Неотъемлемыми структурными частями являются гифы, которые отвечают за фиксацию тела в субстрате.


Гифы представлены тонкими ниточками, в основном, белого цвета, которые становятся более тонкими по отношению к периферии. То, что каждый видит невооруженным глазом, называется колонией, которая состоит из тонких волосков – спорангиеносцев. Эти структуры отвечают за размножение организма и растут из тела. Размер спорангиеносцев зависит от условий, они могут достигать до 2-3 см в высоту. В период размножения на конце каждой ворсинки появляется коробочка со спорами.

Размножение

Размножение мукора может происходить двумя путями – половым и неполовым:


Питание

По типу питания мукор относится к гетеротрофам, то есть, он не способен синтезировать органические вещества из неорганических. Для полноценного питания организму необходим высокий коэффициент влажности, тепло, наличие кислорода и готовые органические вещества.

В связи с этим плесень появляется в местах с большим количеством неразложившихся остатков растительного происхождения – пища, навоз. Также данный вид можно отнести к сапротрофным организмам, так как им характерно добывание органических веществ из мертвого материала. Такие высококалорийные продукты, как картофель, мучные изделия, фрукты привлекают белую плесень.

Полезные свойства и область применения

Плесень насчитывает около 60 видов, которые широко используются в разных сферах деятельности человека. В пищевой промышленности мукор используют для изготовления известных видов сыров, таких, как тофу и темпе. Эти сыры готовятся на основе закваски из гриба.

В Италии и Испании, которые славятся изобилием мясных продуктов, белую плесень используют для производства колбас. Так, в течение месяца колбасу хранят в темном прохладном помещении под слоем плесени, после чего продукты обрабатывают, а через несколько месяцев они поступают на прилавки магазинов.



Нередко гриб используют для получения картофельного спирта. Такое его использование базируется на активности ферментов гриба. Также его используют при производстве кисломолочных продуктов. Мукор считается ценным материалом в медицине, где из него получают антибиотик – рамицин.

В связи с широкой сферой использования мукора его выращивают в специальных лабораториях. Для этого в отдельной емкости создают благоприятную среду обитания, например, увлажняют кусок хлеба. После чего емкость изолируют и плотно накрывают. Емкость с субстратом ставят в теплое место с температурой не ниже 20 градусов, где спустя пару дней начинают расти колонии гриба.

Опасность мукора для живых организмов

Несмотря на полезные свойства гриба, он остается опасным не только для здоровья людей, но и для животных. Мукор является возбудителем мукоромикоза. Это заболевание, которое поражает сразу несколько систем организма человека и оказывает на него токсическое влияние.

Симптомами мукоромикоза являются:

  • лихорадка;
  • недомогание, головная боль;
  • отечность и гиперемия кожи;
  • дискомфорт и боль в мышцах лица;
  • нарушения работы зрительного анализатора;
  • мокрота с прожилками крови, что говорит о поражении легких;
  • острые боли в пояснице, которые являются симптомом поражения почек.

Точная постановка диагноза осуществляется врачом после проведения ряда биохимических исследований. Чаще всего диагностируется риноцеребральный тип заболевания. Проникновение возбудителя в организм происходит при вдыхании его спор из зараженного воздуха, также заражение возможно при контакте поврежденного кожного покрова с пелесенью. Под угрозой заражения находятся люди с сахарным диабетом и нейтропенией, слабым иммунитетом.

Mucor — обзор | Темы ScienceDirect

Обсуждение

Alternaria, Aspergillus, Mucor, и Fusarium были наиболее распространенными родами, обнаруженными во всех статьях. Среди них одни роды вызывают большее беспокойство, чем другие, например роды Aspergillus и Mucor . Уже сообщалось о высокой распространенности обоих родов в помещениях и на производстве (Viegas et al ., 2017; Caetano et al ., 2019), что привело к опасностям для здоровья и росту случаев инфицирования Aspergillus и Mucor (Kontoyiannis et al ., 2005; Bitar et al ., 2009; Auberger et al ., 2012).

Aspergillus — очень распространенный род нитчатых грибов, который можно найти во многих различных средах, обычно они классифицируются как сапрофиты, но в некоторых случаях они также могут быть патогенными и причинять вред людям (Heitman, 2011; Seyedmousavi и др. ., 2015). Этот род классифицируется как условно-патогенный микроорганизм, который может вызывать широкий спектр респираторных заболеваний (Hope et al ., 2005). Конидии очень устойчивы в окружающей среде и могут оставаться жизнеспособными в течение нескольких месяцев. Кроме того, они хорошо подходят для рассеивания по воздуху (Pringle и др. , 2005). Кроме того, не следует пренебрегать присутствием Aspergillus , так как некоторые из его частей могут продуцировать токсичные соединения (Varga et al ., 2015; Viegas et al., ., 2018b), а также из-за растущей устойчивости к противогрибковым препаратам в клинике и окружающей среде (Fairlamb et al ., 2016; Nature Microbiology, 2017).

Порядок Mucorales, как известно, преобладает в помещениях и на производстве (Caetano et al ., 2017, 2018a; Viegas et al ., 2018a), и он включает различные виды сапрофитов, которые могут вызывать серьезные инфекции, как мукормикоз (Caetano et al ., 2018b) или другие серьезные проблемы со здоровьем (Lavergne et al ., 2017). Как уже упоминалось, количество случаев Mucorales растет, а количество резистентных к азолам штаммов растет. Их характеристики перекрестной резистентности показывают более критический сценарий в отношении лечения и лечения грибковых инфекций (Leathers and Sypherd, 1985; Cuenca-Estrella, 2014). Эта проблема, возможно, является результатом недостатка воздействия противогрибковых препаратов или других родственных химикатов, что может привести к пересмотру текущей терапии для этих случаев из-за потенциальных неудач лечения (Nature Microbiology, 2017).Более того, родов Mucor в Европе являются одними из наиболее идентифицированных грибов (Kwon-Chung, 2012; Lanternier et al ., 2012).

Уровень воздействия грибков может увеличиваться, если они присутствуют в определенных условиях, где уровни образующейся органической пыли высоки. Частицы действуют как переносчики микроорганизмов, вызывая распространение переносимых грибов (Caetano et al ., 2018a; Viegas et al ., 2020). Подобные сценарии, в которых воздействие органической пыли является высоким, могут быть обнаружены в сельскохозяйственных средах (Нарделл и Мачер и др. ., 1999; Jenerowicz et al ., 2012; Мбарече и др. ., 2019).

Среди методов выборки, использованных во всех наблюдаемых исследованиях, исключительное использование активных методов было наиболее распространенным подходом (10 из 18 исследований), а в 5 из 18 исследований использовались исключительно пассивные методы, в то время как комбинированное использование обоих методов были указаны только в 3 из 18 исследований. Использование пассивной и активной выборки имеет ряд преимуществ и недостатков. Пассивные методы считаются очень универсальным методом обнаружения микробного загрязнения в различных условиях, позволяющим лучше понять присутствующее загрязнение и улучшить характеристики окружающей среды в помещении (Viegas et al ., 2014, 2016а; Каэтано и др. , 2017). Активный отбор проб может предоставить информацию о нагрузке в воздухе в момент отбора проб, поскольку он собирает только часть воздуха на месте отбора проб (Napoli et al ., 2012). Таким образом, рекомендуется применение активных методов в сочетании с пассивными методами, так как таким образом можно получить более надежные данные за долгосрочные периоды (Viegas et al ., 2017; Leppänen et al ., 2018). Интеграция различных видов методов позволяет собирать более точные и полезные данные без необходимости полагаться на один метод для представления заданного сценария (Viegas et al ., 2017; Leppänen et al ., 2018).

Во всех проанализированных исследованиях был заявлен единый аналитический подход: морфологическая идентификация на основе методов, основанных на культуре. Этот метод считается хорошо известным и проверенным методом микробиологических исследований, позволяющим оценивать живые и культивируемые микроорганизмы. Он легко распознает и количественно определяет жизнеспособные клетки в образце и имеет высокую чувствительность при использовании в сочетании с подходящей средой (Фигдор и Гулабивала, 2011).Однако у него есть несколько недостатков, таких как риск внешнего загрязнения, его время и ресурсоемкость, он требует определенного уровня навыков для достижения оптимальных результатов и полагается на фенотипические биохимические характеристики, которые могут привести к предпочтению только некоторых жизнеспособных микроорганизмов. (Яннаш и Джонс, 1959; Аманн и др. ., 1995; Шмит и Лодж, 2005; Лю, 2011; Альшайли и Бани-Хассан, 2018; Виегас и др. ., 2019). Недооценка является основным ограничением этого метода, поскольку может резко недооценить количество и состав образцов (Фигдор и Гулабивала, 2011; Аль-Авади и др. ., 2013). Молекулярные инструменты могут преодолеть некоторые ограничения, поскольку обеспечивают более быстрое и точное описание микробных сообществ, присутствующих в каждом образце, по сравнению с методами, основанными на культивировании (аллохейли и Бани-Хассан, 2018). Однако, как и методы, основанные на культивировании, молекулярные инструменты также имеют некоторые ограничения, связанные с предпочтительным секвенированием некоторых видов, использованием неадекватных праймеров или получением отдельных полос (Polz and Cavanaugh, 1998; Sipos et al ). ., 2007). Таким образом, рекомендуется использовать оба метода параллельно. Действительно, сообщалось, что однократное использование методов на основе культивирования или молекулярных инструментов может привести к совершенно разным результатам (Al-Awadhi et al ., 2013), что добавляет важности применения обоих.

Руководство по борьбе с вредителями / Общегосударственная программа IPM UC (UC IPM)

Симптомы и признаки

Подобно грибку, вызывающему гниение плодов Rhizopus, Mucor spp. вторгаются в плод через малейшую рану.Грибок выделяет фермент, который быстро измельчает весь плод. В условиях повышенной влажности ягода покрывается слоем жесткого, жилистого мицелия и черного спороношения на концах длинных спороносных структур. Гнили плодов Mucor и Rhizopus очень похожи друг на друга, и их трудно различить в полевых условиях.

Комментарии к болезни

Поскольку грибок питается мертвыми и разлагающимися органическими веществами, санитарная обработка полей имеет важное значение.Заболевание особенно часто встречается в периоды теплой погоды в конце лета.

Менеджмент

Уберите с поля все спелые плоды и растительные остатки. Удалите и уничтожьте все спелые и почти спелые плоды с полей после дождя. Используйте пластиковую мульчу, чтобы фрукты не соприкасались с почвой. Соблюдайте правила гигиены во время сбора урожая, упаковки, транспортировки и хранения и всегда избегайте повреждения фруктов. В отличие от Rhizopus, некоторых видов Mucor , таких как M. mucedo и M. piriformis не ингибируются холодными температурами.

Культурный контроль

Санитарная обработка поля чрезвычайно важна. Всегда обращайтесь с фруктами осторожно. Убирайте с поля все спелые плоды во время сбора урожая и избегайте упаковки перезрелых плодов. При сборе плодов убедитесь, что весь плод полностью удален со стебля, не оставляя мясистого сосуда плода, поскольку он может служить местом для заражения грибком.

Органически приемлемые методы

Используйте санитарные меры, отбор сортов и быстрое послеуборочное охлаждение.

Решения о лечении

Обработка фунгицидами обычно не рекомендуется.

Руководство UC IPM по борьбе с вредителями: клубника
Публикация UC ANR 3468

S.T. Койке (заслуженный), TriCal Diagnostics, Hollister

G.Т. Браун, Патология растений, Калифорнийский университет в Дэвисе,

T.R. Гордон, Патология растений, Калифорнийский университет в Дэвисе

M.P. Болда, UC Cooperative Extension, округ Санта-Крус,

Благодарность за вклад в развитие болезней

W.D. Габлер (заслуженный), Патология растений, Калифорнийский университет в Дэвисе

W.M. Wintermantel, USDA ARS, Salinas (снижение уровня вируса клубники)

Текст обновлен: 18.07

Новый метод культивирования для производства микробного масла: гранулирование клеток и накопление липидов с помощью Mucor circinelloides | Биотехнология для производства биотоплива

  • 1.

    Heredia-Arroyo T, Wei W, Hu B: Накопление нефти посредством гетеротрофных / миксотрофных Chlorella protothecoides . Appl Biochem Biotechnol 2010, 162: 1978–1995. 10.1007 / s12010-010-8974-4

    CAS Статья Google ученый

  • 2.

    Чисти Y: Биодизель из микроводорослей. Biotechnol Adv 2007, 25: 294-306. 10.1016 / j.biotechadv.2007.02.001

    CAS Статья Google ученый

  • 3.

    Angerbauer C, Siebenhofer M, Mittelbach M, Guebitz GM: Преобразование осадка сточных вод в липиды с помощью Lipomyces starkeyi для производства биодизельного топлива. Bioresour Technol 2008, 99: 3051-3056. 10.1016 / j.biortech.2007.06.045

    CAS Статья Google ученый

  • 4.

    Papanikolaou S, Aggelis G: Производство липидов с помощью Yarrowia lipolytica , выращиваемых на промышленном глицерине в одностадийной непрерывной культуре. Биоресур Технол 2002, 82: 43-49. 10.1016 / S0960-8524 (01) 00149-3

    CAS Статья Google ученый

  • 5.

    Meesters PAEP, Huijberts GNM, Eggink G: Культивирование липидонакопительных дрожжей с высокой плотностью клеток Cryptococcus curvatus с использованием глицерина в качестве источника углерода. Appl Microbiol Biotechnol 1996, 45: 575-579. 10.1007 / s002530050731

    CAS Статья Google ученый

  • 6. ​​

    Alvarez RM, Rodriguez B, Romano JM, Diaz AO, Gomez E, Miro D, Navarro L, Saura G, Garcia JL: Накопление липидов в Rhodotorula glutinis на сахарном тростнике одностадийная непрерывная культура. World J Microbiol Biotechnol 1992, 8: 214-215.10.1007 / BF01195853

    CAS Статья Google ученый

  • 7.

    Ахтар П., Грей Дж. И., Асгар А: Синтез липидов некоторыми штаммами дрожжей, выращенными на пермеате сыворотки. J Food Lipids 1998, 5: 283-297. 10.1111 / j.1745-4522.1998.tb00125.x

    CAS Статья Google ученый

  • 8.

    Ykema A, Verbree EC, Kater MM, Smit H: Оптимизация производства липидов в масляных дрожжах Apiotrichum curvatum в пермеате сыворотки. Appl Microbiol Biotechnol 1988, 29: 211-218.

    CAS Google ученый

  • 9.

    Хуанг С., Цзун М., Ву Х, Лю Q: Производство микробного масла из гидролизата рисовой соломы с помощью Trichosporon fermentans . Bioresour Technol 2009, 100: 4535-4538. 10.1016 / j.biortech.2009.04.022

    CAS Статья Google ученый

  • 10.

    Ху С, Чжао X, Чжао Дж, Ву С., Чжао ЗК: Влияние побочных продуктов гидролиза биомассы на маслянистые дрожжи Rhodosporidium toruloides . Bioresour Technol 2009, 100: 4843-4847. 10.1016 / j.biortech.2009.04.041

    CAS Статья Google ученый

  • 11.

    Chen X, Li Z, Zhang X, Hu F, Ryu DDY, Bao J: Скрининг штаммов маслянистых дрожжей, устойчивых к соединениям разложения лигноцеллюлозы. Appl Biochem Biotechnol 2009, 159: 591-604. 10.1007 / s12010-008-8491-x

    CAS Статья Google ученый

  • 12.

    Андре А., Диамантопулу П., Филиппусси А, Саррис Д., Комайтис М., Папаниколау S: Биотехнологические преобразования глицерина, полученного из биодизельного топлива, высшими грибами в соединения с добавленной стоимостью: производство биомассы, одноклеточного масла и щавелевая кислота. Ind Crops Prod 2010, 31: 407-416.10.1016 / j.indcrop.2009.12.011

    CAS Статья Google ученый

  • 13.

    Du Preez JC, Immelman M, Kock JLF, Kilian SG: Производство γ-линоленовой кислоты с помощью Mucor circinelloides и Mucor rouxii 901 901 . Biotechnol Lett 1995, 17: 933-938. 10.1007 / BF00127429

    CAS Статья Google ученый

  • 14.

    Peng X, Chen H: Производство одноклеточного масла при твердофазной ферментации с помощью Microsphaeropsis sp . из паровой пшеничной соломы, смешанной с пшеничными отрубями. Bioresour Technol 2008, 99: 3885-3889. 10.1016 / j.biortech.2007.08.015

    CAS Статья Google ученый

  • 15.

    Peng XW, Chen HZ: Накопление микробного масла и секреция целлюлазы эндофитными грибами из масличных растений. Ann Microbiol 2007, 57: 239-242. 10.1007 / BF03175213

    CAS Статья Google ученый

  • 16.

    Zhao X, Hu C, Wu S, Shen H, Zhao ZK: Производство липидов с помощью Rhodosporidium toruloides Y4 с использованием различных стратегий подачи субстрата. J Ind Microbiol Biotechnol 2011, 38: 627-632. 10.1007 / s10295-010-0808-4

    CAS Статья Google ученый

  • 17.

    Liao W, Liu Y, Chen SL: Изучение образования гранул мицелиальных грибов Rhizopus oryzae для увеличения производства органической кислоты. Appl Biochem Biotechnol 2007, 137: 689-701. 10.1007 / s12010-007-9089-4

    Google ученый

  • 18.

    Ratledge C, Cohen Z: Микробные и водорослевые масла: есть ли у них будущее для биодизеля или товарных масел? Липид Технол 2008, 20: 155-160.10.1002 / lite.200800044

    Артикул Google ученый

  • 19.

    Hiruta O, Futamura T, Takebe H, Satoh A, Kamisaka Y, Yokochi T, Nakahara T, Suzuki O: Оптимизация и расширение производства γ-линоленовой кислоты с помощью Mortierella ramanniana MM 15-1, мутант с высоким уровнем продуцирования γ-линоленовой кислоты. J Ferment Bioeng 1996, 82: 366-370. 10.1016 / 0922-338X (96) 89152-5

    CAS Статья Google ученый

  • 20.

    Chen HC, Liu TM: Влияние инокулята на продукцию γ-линоленовой кислоты путем встряхивания культуры Cunninghamella echinulata CCRC 31840. Enzyme Microb Technol 1997, -142 21: 10.1016 / S0141-0229 (96) 00262-1

    CAS Статья Google ученый

  • 21.

    Ratledge C: Регулирование накопления липидов в маслянистых микроорганизмах. Biochem Soc Trans 2002, 30: 1047-1050.

    CAS Статья Google ученый

  • 22.

    Чжан Ю., Адамс И. П., Рэтледж C: Яблочный фермент: контролирующая активность для производства липидов? Сверхэкспрессия яблочного фермента в Mucor circinelloides приводит к увеличению накопления липидов в 2,5 раза. Микробиология 2007, 153: 2013-2025. 10.1099 / мик. 0,2006 / 002683-0

    CAS Статья Google ученый

  • 23.

    Висенте Г., Баутиста Л.Ф., Родригес Р., Гутьеррес Ф.Дж., Садаба I, Руис-Васкес Р.М., Торрес-Мартинес С., Гарре В.: Производство биодизеля из биомассы маслянистого гриба. Biochem Eng J 2009, 48: 22-27. 10.1016 / j.bej.2009.07.014

    CAS Статья Google ученый

  • 24.

    Vicente G, Bautista LF, Gutiérrez FJ, Rodríguez R, Martínez V, Rodríguez-Frómeta RA, Ruiz-Vázquez RM, Torres-Martínez S, Garre V: Прямая трансформация биомассы грибов из погруженных культур . Energy Fuels 2010, 24: 3173-3178. 10.1021 / ef

    72

    CAS Статья Google ученый

  • 25.

    Xiong W, Li XF, Xiang JY, Wu QY: Ферментация микроводорослей высокой плотности Chlorella protothecoides в биореакторе для производства микробио-дизельного топлива. Applied Microbiol Biotechnol 2008, 78: 29-36. 10.1007 / s00253-007-1285-1

    CAS Статья Google ученый

  • 26.

    Ngo TT, Phan APH, Yam CF, Lenhoff HM: Помехи при определении аммиака методом Бертло с гипохлоритом и щелочным фенолом. Anal Chem 1982, 54: 46-49. 10.1021 / ac00238a015

    CAS Статья Google ученый

  • 27.

    Ratledge C, Hopkins S: Липиды из микробных источников. В Модификация липидов для использования в пищевых продуктах . Отредактировано: Gunstone FD. Бока-Ратон: CRC Press; 2006: 80-113.

    Глава Google ученый

  • 28.

    Чен Ф, Джонс MR: Влияние соотношения углерод / азот и аэрации на состав жирных кислот гетеротрофных Chlorella sorokiniana . J Appl Phycol 1991, 3: 203-209. 10.1007 / BF00003578

    CAS Статья Google ученый

  • 29.

    Dostalek M: Производство липидов из крахмала с помощью азотсодержащей смешанной культуры Saccharomycopsis fibuliger и Rhodosporidium toruloides . Appl Microbiol Biotechnol 1986, 24: 19-23.

    CAS Google ученый

  • 30.

    Fakas S, Papanikolaou S, Batsos A, Galiotou-Panayotou M, Mallouchos A, Aggelis G: Оценка возобновляемых источников углерода в качестве субстратов для производства одноклеточного масла с помощью Cunninghamella echinulata и 9017 Mortierella isabellina . Биомасса Биоэнергетика 2009, 33: 573-580.10.1016 / j.biombioe.2008.09.006

    CAS Статья Google ученый

  • 31.

    Кендрик А., Рэтледж C: Образование липидов в маслянистой плесени Entomophthora exitalis , выращенные в непрерывной культуре: влияние скорости роста, температуры и напряжения растворенного кислорода на полиненасыщенные жирные кислоты. Appl Microbiol Biotechnol 1992, 37: 18-22.

    CAS Google ученый

  • 32.

    Вайнштейн Р.Н., Монтиель П.О., Джонстон K: Влияние температуры роста на синтез липидов и растворимых углеводов грибами, выделенными из почвы холмов в морской Антарктике. Mycologia 2000, 92: 222-229. 10.2307 / 3761554

    CAS Статья Google ученый

  • 33.

    Converti A, Casazza AA, Ortiz EY, Perego P, Del Borghi M: Влияние температуры и концентрации азота на рост и содержание липидов Nannochloropsis oculata и Chlorella для производства биодизеля. Chem Eng Process 2009, 48: 1146-1151.

    CAS Статья Google ученый

  • 34.

    Aggelis G: Два альтернативных пути ассимиляции субстрата Mucor circinelloides . Folia Microbiol (Praha) 1996, 41: 254-256. 10.1007 / BF02814626

    CAS Статья Google ученый

  • 35.

    Liu Y, Liao W., Chen S: Совместное производство молочной кислоты и хитина с использованием гранулированного мицелиального гриба Rhizopus oryzae , выращенного на отбракованном картофеле и глюкозе. J Appl Microbiol 2008, 105: 1521-1528. 10.1111 / j.1365-2672.2008.03913.x

    CAS Статья Google ученый

  • 36.

    Гиббс П.А., Севиур Р.Дж., Шмид F: Рост мицелиальных грибов в погруженной культуре: проблемы и возможные решения. Crit Rev Biotechnol 2000, 20: 17-48. 10.1080 / 073885500177

    CAS Статья Google ученый

  • Два новых вида Mucor из клинических образцов | Медицинская микология

    Аннотация

    Два новых вида в отряде Mucorales, Mucor velutinosus и Mucor ellipsoideus , выделенные из клинических образцов человека в США, описаны и проиллюстрированы.Первый вид похож на Mucor ramosissimus , от которого его можно отличить по способности расти при 37 ° C и продуцировать спорангиоспоры веррукозы. Mucor ellipsoideus также способен расти и спорулировать при 37 ° C, как и M. indicus , ближайший филогенетический вид в этом исследовании, однако первый имеет узкие эллипсоидальные спорангиоспоры в отличие от спорангиоспор от субглобальных до эллипсоидальных из M. Индикус . Анализ последовательностей ITS и D1 – D2 участков генов рРНК подтвердил новизну этих видов. in vitro противогрибковая чувствительность нового вида показала, что амфотерицин B был активен против всех изолятов, а позаконазол и итраконазол показали низкую активность.

    Введение

    Тип Zygomycota — это искусственное скопление грибов с неопределенным таксономическим положением. Большинство родов этого типа в настоящее время включены в подтип Mucoromycotina [1], причем Mucor является родом с наибольшим количеством видов.Молекулярные исследования показали, что Mucor — это полифилетический род [2]. Члены Mucor характеризуются быстрорастущими колониями, простыми или разветвленными спорангиофорами без базальных ризоидов, неапофизатными спорангиями и зигоспорами, имеющими более или менее равные противоположные суспензоры без придатков [3–5]. Несколько видов Mucor имеют важные биотехнологические применения и используются при разработке различных видов азиатских продуктов питания [6–8]. Mucor является, после Rhizopus , наиболее клинически значимым родом Mucorales [9,10].Виды, наиболее часто вызывающие инфицирование человека, — это Mucor circinelloides , Mucor indicus , Mucor racemosus и Mucor ramosissimus [3,9].

    В недавнем филогенетическом исследовании видов мукоралеев из США, куда была включена широкая панель клинических изолятов, некоторые изоляты Mucor не могли быть должным образом идентифицированы на уровне видов. Эти изоляты показали важные отличительные морфологические признаки и были разделены на две хорошо обоснованные филогенетические клады ( Mucor sp.1 и Mucor sp. 2) [9]. В настоящем исследовании мы продемонстрировали, что эти две клады представляют собой два новых вида Mucor , которые описаны и проиллюстрированы здесь.

    Материалы и методы

    Изоляты грибов

    Всего в настоящее исследование включены семь клинических изолятов Mucor , которые ранее не удалось идентифицировать [9]. Три из этих изолятов были разработаны как Mucor sp.1, четвертый изолят как Mucor sp. 2 и трое других не были названы. Типовые или эталонные штаммы наиболее клинически значимых видов этого рода и некоторые штаммы видов, морфологически родственные некоторым из этих изолятов, такие как Mucor fragilis и Mucor fuscus , также были включены в это исследование (Таблица 1). Все изоляты пересевали на картофельный агар с декстрозой (PDA, Pronadisa, Мадрид, Испания) при комнатной температуре (25 ° C) в течение 2–5 дней.

    Таблица 1 Изоляты

    , включенные в исследование, и их происхождение.

    FN650665 -85 indicus
    . . . Номер доступа GenBank .
    Изолятор . Виды . Источник . ЕГО . 28S рДНК .
    UTHSC 03-1044 Mucor sp. Кровь, Юта, США FN650648 FN650661
    UTHSC 03-1823 Mucor sp. Бронхиал, Индиана, США FN650649 FN650662
    UTHSC 04-2492 Mucor sp. Правое бедро, Миннесота, США FN650651 FN650663
    UTHSC 02-1981 Mucor sp. 1 Центральная венозная линия, Коннектикут, США FN650646 FN650672
    UTHSC 06-1667 Mucor sp.1 Кровь, Миннесота, США FN650652 FN650656
    UTHSC 04-1961 Mucor sp. 1 Кровь, Нью-Йорк, США FN650650 FN650657
    UTHSC 02-2090 Mucor sp. 2 Жидкость для перитонеального диализа, Флорида, США FN650647 FN650660
    UTHSC 03-2919 Mucor circinelloides f. circinelloides Предплечье, Миннесота, США FN663959 n.d
    UTHSC 05-3221 Mucor circinelloides f. circinelloides Колорадо, США FN663960 n.d
    UTHSC 06-3784 Mucor circinelloides f. circinelloides Юта, США FN663961 н.о.
    CBS 195.68 NT Mucor circinelloides f. circinelloides Окружающая среда, воздух, Нидерланды FN650639 FN650667
    CBS 384.95 Mucor circinelloides f. circinelloides Face, Китай FN663957 FN663953
    CBS 108.17 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650644 FN650664
    CBS 108.19 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестный FN650645
    CBS 236,35 Mucor ломкая Tremella, Hann.-Munden, Германия FN650655 FN650671
    CBS 132,22 T Mucor fuscus Неизвестно FN650653 FN650658
    CBS 230.29 Mucor fuscus Франция FN650654 FN650659
    CBS 201.65 NT Mucor hiemalis f. hiemalis Michigan, USA FN650640 FN650668
    CBS 226.29 T Mucor indicus Mucor indicus Ткань стомы, Пенсильвания, США FN663955 n.d
    UTHSC 02-2453 Mucor indicus Ручная рана, Род-Айленд, США FN663956 nd
    CBS 260.68 06 T 9085 9085 9085 FN650642 FN650670
    CBS 135.65 NT Mucor ramosissimus Поражение носа, Уругвай FN650643 850 FN650643 850 FN650643 850 FN93 T Rhizomucor variabilis var. variabilis Man, Китай FN663958 FN663954
    USA
    . . . Номер доступа GenBank .
    Изолятор . Виды . Источник . ЕГО . 28S рДНК .
    UTHSC 03-1044 Mucor sp. Кровь, Юта, США FN650648 FN650661
    UTHSC 03-1823 Mucor sp. Бронхиал, Индиана, США FN650649 FN650662
    UTHSC 04-2492 Mucor sp. Правое бедро, Миннесота, США FN650651 FN650663
    UTHSC 02-1981 Mucor sp.1 Центральная венозная линия, Коннектикут, США FN650646 FN650672
    UTHSC 06-1667 Mucor sp. 1 Кровь, Миннесота, США FN650652 FN650656
    UTHSC 04-1961 Mucor sp. 1 Кровь, Нью-Йорк, США FN650650 FN650657
    UTHSC 02-2090 Mucor sp.2 Жидкость для перитонеального диализа, Флорида, США FN650647 FN650660
    UTHSC 03-2919 Mucor circinelloides f. circinelloides Предплечье, Миннесота, США FN663959 n.d
    UTHSC 05-3221 Mucor circinelloides f. circinelloides Колорадо, США FN663960 n.d
    UTHSC 06-3784 Mucor circinelloides f. circinelloides Юта, США FN663961 n.d
    CBS 195.68 NT Mucor circinelloides f. circinelloides Окружающая среда, воздух, Нидерланды FN650639 FN650667
    CBS 384.95 Mucor circinelloides f. circinelloides Face, Китай FN663957 FN663953
    CBS 108.17 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650644 FN650664
    CBS 108.19 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650645 FN650665
    CBS 236.35 Mucor fragilis Tremella, Hann.22 T Mucor fuscus Неизвестно FN650653 FN650658
    CBS 230.29 Mucor fuscus 9000 France6 8 Fuscus 9000 France6 NT5 Mucor hiemalis f. hiemalis Мичиган, США FN650640 FN650668
    CBS 226.29 T Mucor indicus Швейцария FN650641 FN650669
    UTHSC 01-667 Mucor indicus 9085 Mucor, Пенсильвания 9085 UTHSC 02-2453 Mucor indicus Ручное ранение, Род-Айленд, США FN663956 nd
    CBS 260.68 Т Mucor racemosus Швейцария FN650642 FN650670
    КОС 135,65 NT Mucor ramosissimus Носовые поражения, Уругвай FN650643 FN650666
    CBS 103.93 T Rhizomucor variabilis var. variabilis Man, China FN663958 FN663954
    Таблица 1. Изоляты

    , включенные в исследование, и их происхождение.

    FN650665 -85 indicus
    . . . Номер доступа GenBank .
    Изолятор . Виды . Источник . ЕГО . 28S рДНК .
    UTHSC 03-1044 Mucor sp. Кровь, Юта, США FN650648 FN650661
    UTHSC 03-1823 Mucor sp. Бронхиал, Индиана, США FN650649 FN650662
    UTHSC 04-2492 Mucor sp. Правое бедро, Миннесота, США FN650651 FN650663
    UTHSC 02-1981 Mucor sp. 1 Центральная венозная линия, Коннектикут, США FN650646 FN650672
    UTHSC 06-1667 Mucor sp.1 Кровь, Миннесота, США FN650652 FN650656
    UTHSC 04-1961 Mucor sp. 1 Кровь, Нью-Йорк, США FN650650 FN650657
    UTHSC 02-2090 Mucor sp. 2 Жидкость для перитонеального диализа, Флорида, США FN650647 FN650660
    UTHSC 03-2919 Mucor circinelloides f. circinelloides Предплечье, Миннесота, США FN663959 n.d
    UTHSC 05-3221 Mucor circinelloides f. circinelloides Колорадо, США FN663960 n.d
    UTHSC 06-3784 Mucor circinelloides f. circinelloides Юта, США FN663961 н.о.
    CBS 195.68 NT Mucor circinelloides f. circinelloides Окружающая среда, воздух, Нидерланды FN650639 FN650667
    CBS 384.95 Mucor circinelloides f. circinelloides Face, Китай FN663957 FN663953
    CBS 108.17 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650644 FN650664
    CBS 108.19 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестный FN650645
    CBS 236,35 Mucor ломкая Tremella, Hann.-Munden, Германия FN650655 FN650671
    CBS 132,22 T Mucor fuscus Неизвестно FN650653 FN650658
    CBS 230.29 Mucor fuscus Франция FN650654 FN650659
    CBS 201.65 NT Mucor hiemalis f. hiemalis Michigan, USA FN650640 FN650668
    CBS 226.29 T Mucor indicus Mucor indicus Ткань стомы, Пенсильвания, США FN663955 n.d
    UTHSC 02-2453 Mucor indicus Ручная рана, Род-Айленд, США FN663956 nd
    CBS 260.68 06 T 9085 9085 9085 FN650642 FN650670
    CBS 135.65 NT Mucor ramosissimus Поражение носа, Уругвай FN650643 850 FN650643 850 FN650643 850 FN93 T Rhizomucor variabilis var. variabilis Man, Китай FN663958 FN663954
    USA
    . . . Номер доступа GenBank .
    Изолятор . Виды . Источник . ЕГО . 28S рДНК .
    UTHSC 03-1044 Mucor sp. Кровь, Юта, США FN650648 FN650661
    UTHSC 03-1823 Mucor sp. Бронхиал, Индиана, США FN650649 FN650662
    UTHSC 04-2492 Mucor sp. Правое бедро, Миннесота, США FN650651 FN650663
    UTHSC 02-1981 Mucor sp.1 Центральная венозная линия, Коннектикут, США FN650646 FN650672
    UTHSC 06-1667 Mucor sp. 1 Кровь, Миннесота, США FN650652 FN650656
    UTHSC 04-1961 Mucor sp. 1 Кровь, Нью-Йорк, США FN650650 FN650657
    UTHSC 02-2090 Mucor sp.2 Жидкость для перитонеального диализа, Флорида, США FN650647 FN650660
    UTHSC 03-2919 Mucor circinelloides f. circinelloides Предплечье, Миннесота, США FN663959 n.d
    UTHSC 05-3221 Mucor circinelloides f. circinelloides Колорадо, США FN663960 n.d
    UTHSC 06-3784 Mucor circinelloides f. circinelloides Юта, США FN663961 n.d
    CBS 195.68 NT Mucor circinelloides f. circinelloides Окружающая среда, воздух, Нидерланды FN650639 FN650667
    CBS 384.95 Mucor circinelloides f. circinelloides Face, Китай FN663957 FN663953
    CBS 108.17 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650644 FN650664
    CBS 108.19 Mucor circinelloides f. lusitanicus Неизвестно FN650645 FN650665
    CBS 236.35 Mucor fragilis Tremella, Hann.22 T Mucor fuscus Неизвестно FN650653 FN650658
    CBS 230.29 Mucor fuscus 9000 France6 8 Fuscus 9000 France6 NT5 Mucor hiemalis f. hiemalis Мичиган, США FN650640 FN650668
    CBS 226.29 T Mucor indicus Швейцария FN650641 FN650669
    UTHSC 01-667 Mucor indicus 9085 Mucor, Пенсильвания 9085 UTHSC 02-2453 Mucor indicus Ручное ранение, Род-Айленд, США FN663956 nd
    CBS 260.68 Т Mucor racemosus Швейцария FN650642 FN650670
    КОС 135,65 NT Mucor ramosissimus Носовые поражения, Уругвай FN650643 FN650666
    CBS 103.93 T Rhizomucor variabilis var. variabilis Ман, Китай FN663958 FN663954

    Экстракция, амплификация и секвенирование ДНК

    ДНК

    экстрагировали и очищали непосредственно из грибковых колоний в соответствии с протоколом набора Fast DNA (Bio101, Vista, Calif., США) с незначительной модификацией, состоящей из стадии гомогенизации, повторенной трижды с помощью прибора FastPrep FP120 (Thermo Savant, Холбрук, Нью-Йорк, США). ДНК количественно определяли с помощью GeneQuant pro (Amersham Pharmacia Biotech, Кембридж, Англия). Внутренний транскрибируемый спейсер (ITS) гена ядерной рРНК амплифицировали с парой праймеров ITS5 и ITS4 [11], а домены D1-D2 гена 28S рРНК амплифицировали с парой праймеров NL1-NL4 [12].

    Смесь для ПЦР (25 мкл) включала 10 мМ трис-HCl (pH 8.3), 50 мМ KCl и 2,5 мМ MgCl 2 (10X буфер Перкина-Элмера II плюс MgCl 2 раствор Roche Molecular Systems, Бранчбург, Нью-Джерси, США), по 100 мкМ каждого дНТФ (Promega, Мэдисон, Висконсин, США) , 1 мкМ каждого праймера и 1,5 ед. ДНК-полимеразы Ampli Taq (Roche). Программа амплификации включала начальную денатурацию при 94 ° C в течение 5 минут, затем 35 циклов денатурации при 95 ° C в течение 30 с, отжиг в течение 1 минуты при 55 ° C и удлинение в течение 1 минуты при 72 ° C. После ПЦР продукты очищали с помощью набора для очистки ДНК и гель-ленты Illustra GFX ™ PCR (General Electric Healthcare, Бакингемшир, Великобритания) и хранили при -20 ° C до их использования в секвенировании.Продукты ПЦР секвенировали с использованием тех же праймеров, которые использовались для амплификации, и в соответствии с протоколом Taq DyeDeoxy Terminator Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, Gouda, Нидерланды). Реакции проводили на секвенаторе ДНК 310 (Applied Biosystems). Согласованные последовательности получали с использованием программы Autoassembler (PerkinElmer-Applied Biosystems) и программы Seqman (Lasergene, Madison, WI). Некоторые последовательности, соответствующие нескольким видам Mucor , которые могли быть родственны нашим клиническим изолятам, или другим родам Mucorales, которые были филогенетически связаны с Mucor в предыдущих исследованиях [2], были извлечены из GenBank и включены в филогенетическое исследование.

    Филогенетические анализы

    Clustal X 1.8 использовали для выравнивания последовательностей с последующей ручной корректировкой с помощью текстового редактора. Для индивидуального анализа генов использовали программу MEGA 4.0. Алгоритм максимального совокупного правдоподобия был использован для определения эволюционных расстояний между последовательностями. Деревья были созданы с использованием метода объединения соседей (NJ). Пробелы обрабатывались опцией попарного удаления MEGA. Поддержка внутренних ветвей оценивалась путем поиска 1000 начальных наборов данных.

    Фенотипические исследования

    Изолятов культивировали на КПК, агаре Чапека (CZA; Difco, Becton Dickinson, Франция) и агаре с солодовым экстрактом (MEA; 10 г солодового экстракта, 20 г агара и 1000 мл дистиллированной воды), инкубировали при 25 ° C. в темноте и осматривали ежедневно. Цветовые обозначения в скобках взяты из работы Корнерупа и Ваншера [13]. Микроскопические характеристики были определены в креплениях на молочной кислоте. Микрофотографии были сделаны с использованием светового микроскопа Zeiss Axio Imager M1.Микрофотографии, полученные с помощью сканирующего электронного микроскопа (СЭМ), были получены с помощью сканирующего электронного микроскопа Jeol JSM-6400 с использованием методик, описанных ранее Фигерасом и Гуарро [14]. Все изоляты были охарактеризованы морфологически в соответствии с традиционными критериями [3–5,15–17]. Скорость роста изолятов при различных температурах (4, 15, 25, 30, 37, 42, 45 и 50 ° C) определяли на чашках Петри PDA диаметром 90 мм, которые были засеяны в центре, и диаметры колоний (в мм) измеряли ежедневно в течение 10 дней.

    Чувствительность к противогрибковым препаратам

    Активность in vitro амфотерицина B (USP, Роквилл, Мэриленд, США), позаконазола (Schering-Pllow Europe, Брюссель, Бельгия) и итраконазола (Janssen Pharmaceutica, Beerse, Бельгия) в отношении семи клинических изолятов оценивалась после эталонный метод микроразбавления (M38-A2) [18].

    Номера доступа нуклеотидной последовательности

    Последовательности ITS-области и D1-D2-доменов гена 28S рРНК изолятов, перечисленных в таблице 1, депонированы в GenBank.Номера доступа показаны в той же таблице.

    Результаты

    Филогенетические анализы

    С использованными праймерами длины ампликонов ITS-областей и D1 – D2-доменов гена 28S рРНК составляли 530–572 п.н. и 576–658 п.н. соответственно. Филогенетическое древо, выведенное из анализа нуклеотидных последовательностей ITS с помощью NJ (рис. 1), показало, что Mucor sp. 1 и Mucor sp. 2 были расположены в двух хорошо опертых кладах.Три изолята Mucor sp. 1 составляла ветвь с высокой степенью поддержки (100% поддержка бутстрапа (bs)) в самой большой кладе (96% bs), куда также были помещены Mucor circinelloides f. circinelloides , M. circinelloides f. lusitanicus , M. fragilis , M. plumbeus , M. racemosus и M. ramosissimus , а также клинические изоляты UTHSC 03-1823, UTHSC 03-1044 и 04-2492.Изоляты UTHSC 03-1823 и UTHSC 03-1044 были генетически очень близки к референсным штаммам M. circinelloides f. lusitanicus и последовательности EU484227, депонированной в GenBank. Изолят UTHSC 04-2492 был вложен в эталонный штамм (CBS 236.35) M. fragilis , но две последовательности, извлеченные из GenBank (EU862184 и EU484238), депонированные как M. fragilis , были четко отделены от них. Изолят Mucor sp. 2 гнездился в очень далекой кладе (94% bs) вместе с M.amphibiorum и M. indicus , но четко отделены от этих видов. По этому маркеру, филогенетически более далекие виды Mucor — это Mucor flavus и M. hiemalis , последний образует кладу с типом Rhizomucor variabilis var. variabilis . Виды нескольких родов, которые другие авторы [2] ранее сообщали как тесно связанные с Mucor , такие как Actinomucor elegans и Parasitella parasitica , были более разделены.

    Рис. 1

    Дерево соединения соседей основано на максимальном суммарном правдоподобии скорректированных нуклеотидных расстояний между участками рибосомного внутреннего транскрибируемого спейсера (ITS) и последовательностями гена 5.8S рРНК штаммов Mucor и родственных таксонов. Значения поддержки Bootstrap выше 70% указаны на узлах. Полоса указывает на генетическую дистанцию. Последовательности Parasitella и Actinomucor использовали для укоренения филограммы.

    Фиг.1

    Дерево соединения соседей основано на максимальном суммарном правдоподобии скорректированных нуклеотидных расстояний между рибосомными внутренними транскрибируемыми спейсерами (ITS) и последовательностями гена 5.8S рРНК штаммов Mucor и родственных таксонов. Значения поддержки Bootstrap выше 70% указаны на узлах. Полоса указывает на генетическую дистанцию. Последовательности Parasitella и Actinomucor использовали для укоренения филограммы.

    Филогенетическое дерево, полученное на основе анализа доменов D1 – D2 гена 28S рРНК (рис.2) имел топологию, аналогичную топологии ITS-дерева. Семь клинических изолятов, исследованных в этом исследовании, показали генетические отношения, аналогичные показанным на рис. 1.

    Рис. 2

    Дерево объединения соседей, основанное на максимальном суммарном правдоподобии скорректированных нуклеотидных расстояний между последовательностями гена 28S рРНК доменов D1-D2 штаммов Mucor и родственных таксонов. Значения поддержки Bootstrap выше 70% указаны на узлах. Полоса указывает на генетическую дистанцию.Последовательность Backusella использовали в качестве внешней группы для корневой филограммы.

    Рис. 2

    Дерево объединения соседей, основанное на максимальном суммарном правдоподобии скорректированных нуклеотидных расстояний между последовательностями гена 28S рРНК доменов D1-D2 штаммов Mucor и родственных таксонов. Значения поддержки Bootstrap выше 70% указаны на узлах. Полоса указывает на генетическую дистанцию. Последовательность Backusella использовали в качестве внешней группы для корневой филограммы.

    Фенотипические анализы

    Минимальная, оптимальная и максимальная температуры роста изолятов Mucor sp.1 составляли 7 ° C, 25 ° C и 37 ° C соответственно. Эти изоляты хорошо росли на всех протестированных средах, давая серовато-бархатные колонии. Микроскопически их спорангиофоры были в основном разветвлены симподиально, а спорангиоспоры были от шаровидных до субглобковых, толстостенных и бородавчатых. Изолят Mucor sp. 2 также имели минимальную, оптимальную и максимальную температуры роста 7 ° C, 25 ° C и 37 ° C, соответственно, но образовывали колонии от белого до бледно-желтого цвета во всех тестируемых средах. Микроскопически спорангиофоры были простыми или симподиально разветвленными, а спорангиоспоры были узкоэллипсоидными, с толстыми и гладкими стенками.Минимальная, оптимальная и максимальная температуры роста клинических изолятов UTHSC 03-1823, UTHSC 03-1044 и UTHSC 04-2492 из Mucor sp. составляли 15 ° C, 25 ° C и 37 ° C соответственно. Микроскопические характеристики этих трех изолятов были схожими, то есть их спорангиофоры были симподиально разветвленными, а спорангиоспоры были очень разнообразными по форме (яйцевидными, эллипсоидальными, субсферическими или неправильными), а также тонкими и гладкими стенками.

    Чувствительность к противогрибковым препаратам

    Минимальные ингибирующие концентрации протестированных противогрибковых препаратов показаны в таблице 2.Амфотерицин B был активен против всех изолятов. Позаконазол и итраконазол показали низкую активность.

    Таблица 2 Результаты

    теста на чувствительность к противогрибковым препаратам in vitro .

    14943 Mucor 14943 Mucor 9085 -1961
    . МИК (мкг / мл) .
    . AMB . PSC . ITC .
    Штамм . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов .
    Mucor sp.l
    UTHSC
    02-1981
    0,125 0,25 1 4 1 4
    4
    0.06 0,25 2 2 4 16
    Mucor sp.l
    UTHSC
    06-1667
    0,06 0,125 0,5
    Mucor sp.2
    UTHSC
    02-2090
    0,06 0,25 2 > 16 4 > 16
    .00 9 9 Mucor sp.2
    UTHSC
    02-2090
    МИК (мкг / мл) .
    . AMB . PSC . ITC .
    Штамм . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов .
    Mucor sp.л
    UTHSC
    02-1981
    0,125 0,25 1 4 1 4
    Mucor sp. 2 4 16
    Mucor sp.l
    UTHSC
    06-1667
    0,06 0,125 0,5 2 0,06 0,25 2 > 16 4 > 16
    Таблица 2

    Результаты тестирования противогрибковой чувствительности in vitro .

    Mucor 12 9 00 9 9 Mucor sp.2
    UTHSC
    02-2090
    . МИК (мкг / мл) .
    . AMB . PSC . ITC .
    Штамм . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов .
    Mucor sp.l
    UTHSC
    02-1981
    0,125 0,25 1 4 1 4
    4 Mucorл
    UTHSC
    04-1961
    0,06 0,25 2 2 4 16
    Mucor sp. 2 1 2
    Mucor sp.2
    UTHSC
    02-2090
    0,06 0,25 2 > 16 4
    . МИК (мкг / мл) .
    . AMB . PSC . ITC .
    Штамм . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов . 24 ч . 48 часов .
    Mucor sp.л
    UTHSC
    02-1981
    0,125 0,25 1 4 1 4
    Mucor sp. 2 4 16
    Mucor sp.l
    UTHSC
    06-1667
    0,06 0,125 0,5 2 0,06 0,25 2 > 16 4 > 16

    На основании молекулярных и фенотипических результатов мы предлагаем Mucor sp. 1 и Mucor sp. 2 в качестве следующего нового вида.

    Mucor velutinosus E. Álvarez, Stchigel, Cano, D. A. Sutton & Guarro, sp. ноя (Рис. 3A – D; Рис. 4; Рис. 5)

    Рис.3

    Mucor velutinosus UTHSC 02-1981. (A) Схема ветвления спорангиеносов. (B) Колумеллы. (C) Спорангиоспоры. (D) Хламидоспоры. Штанги: A – B = 50 мкм; C – D = 5 мкм.

    Рис.3

    Mucor velutinosus UTHSC 02-1981. (A) Схема ветвления спорангиеносов. (B) Колумеллы. (C) Спорангиоспоры. (D) Хламидоспоры. Штанги: A – B = 50 мкм; C – D = 5 мкм.

    Рис.4

    Mucor velutinosus UTHSC 02-1981.(A) Спорангий и споры спорангиев (СЭМ). Mucor ellipsoideus UTHSC 02-2090. (B) Спорангии и спорангиоспоры (СЭМ). Масштаб обозначается полосами.

    Рис.4

    Mucor velutinosus UTHSC 02-1981. (A) Спорангий и споры спорангиев (СЭМ). Mucor ellipsoideus UTHSC 02-2090. (B) Спорангии и спорангиоспоры (СЭМ). Масштаб обозначается полосами.

    Рис. 5

    Морфология колоний на КПК. (A) Mucor velutinosus UTHSC 02-1981.(B) Mucor racemosus CBS 260.68.

    Рис. 5

    Морфология колоний на КПК. (A) Mucor velutinosus UTHSC 02-1981. (B) Mucor racemosus CBS 260.68.

    = Mucor sp. 1 sensu Álvarez et al . J Clin Microbiol 2009; 47 : 1650–1656.

    Ad 25 ° C в agaro cum decocto malturorum (MEA) coloniae velutinosae, высота 0,5–2 мм, надколенники Петри в кварто, primum albae, cito cinerea (M.1E1), у adversum albidum. Sporangiophora erecta, simplicia et simpodialiter ramosa, длина 200–1000 мкм, ширина 4–15 мкм; rami sporangiophoris 10–200 мкм longi, 5–12 мкм lati, eseptati vel cum septum 1-pluribus, hyalini vel brunnei, cum sporangio terminatibus nonapophysati. Sporangia globosa vel subglobosa, диаметр 15–60 мкм, griseola vel griseola-brunnea, parietibus subpersistentibus, lente tabidis vel disruptis. Columellae globosae vel turbinatae, диаметр 10–50 мкм, hyalinae vel brunneae; collaria independenta.Sporangiosporae globosae, subglobosae, ovoideae vel irregulares, 4–15 мкм в диаметре, griseo-brunneae, eminenter verrucosae. Zygosporae ignotae.

    Колонии бархатистые, высотой 0,5–2 мм, заполняющие чашку Петри после 4 дней инкубации при 25 ° C на MEA, сначала белые, вскоре становятся серыми (M. 1E1), обратными беловатыми. Ризоиды обильные. Спорангиеносцы прямостоячие, преимущественно симподиально разветвленные (5–15 раз), длина 200–1000 мкм, ширина 4–15 мкм; ветви 10–200 мкм длиной, 5–12 мкм шириной, без перегородок или с одной перегородкой, бесцветные или коричневатые, простые, заканчивающиеся неапофизатным спорангием.Спорангии шаровидные или почти шаровидные, диаметром 15–60 мкм, от серого до серовато-коричневого цвета, стенка медленно растворяется, иногда сломанная. Колумеллы от шаровидных до конических, диаметром 10–50 мкм, от прозрачных до коричневых; воротник очевиден. Спорангиоспоры шаровидные, почти шаровидные, яйцевидные или неправильной формы, толстостенные, серовато-коричневые, диаметром 4–15 мкм, крупнозернистые. Концевые или интеркалярные хламидоспоры, одиночные или короткоцепочечные (до 4), от гиалиновых до субгиалиновых, шаровидные, эллипсоидальные, бочкообразные, цилиндрические или неправильные, 9–25 × 6–15 мкм, очень толстостенные, образуются на гифах , спорангиеносцы.Зигоспоры отсутствуют.

    Колонии на КПК аналогичны колониям на МЭА. На CZA колонии были гиалиновыми, а наоборот — однотонными, с редким воздушным мицелием высотой до 2 мм. Оптимальная температура роста составляла 25 ° C, минимальная — 7 ° C. При 37 ° C рост происходил, но споруляции не наблюдалось. Гриб не мог расти при 42 ° C.

    Голотип . CBS H-20399, из участка центральной венозной линии, Коннектикут, США. Живые культуры ex-type FMR 10020, UTHSC 02-1981 и CBS 126272

    Этимология .Эпитет velutinosus относится к бархатистой текстуре колоний.

    Mucor ellipsoideus E. Álvarez, Cano, Stchigel, D. A. Sutton & Guarro, sp. ноя (Рис. 4B; Рис. 6A – D)

    = Mucor sp. 2 sensu Álvarez et al . J Clin Microbiol 2009; 47 : 1650–1656.

    Рис.6

    Mucor ellipsoideus UTHSC 02-2090. (А) Хламидоспоры. (B) Колумеллы.(C) Спорангий. (D) Спорангиоспоры. Все стержни 10 мкм.

    Рис.6

    Mucor ellipsoideus UTHSC 02-2090. (А) Хламидоспоры. (B) Колумеллы. (C) Спорангий. (D) Спорангиоспоры. Все стержни 10 мкм.

    Ad 25 ° C в agaro cum decocto malturorum (MEA) coloniae velutinosae, высотой 2–5 мм, надколенниками Петри в die nono, primum albae, cito flavidae (M. 4A3), в adversum flavidum (M. 4A4). Sporangiophora erecta, simplicia et simpodialiter ramosis ad basim et bifurcata vel trifurcata ad apicem, длина 1000–3000 мкм, ширина 4–10 мкм; rami sporangiophoris 20–1000 мкм longi, 3–6 мкм lati, eseptati vel cum septum 1-pluribus, hyalini, cum sporangio terminatibus tenuiapophysati.Sporangia subglobosa, (11–) 16–48 × (12–) 18–50 мкм, pallide aurantiobrunnea, cum parietibus spinulosus, lente tabidis vel disruptis. Columellae globosae vel subglobosae, диаметр 10–45 мкм, hyalinae; коллария нечеткая. Sporangiosporae 4–8 × 2–3 мкм, hyalinae, levitunicatae. Zygosporae ignotae.

    Колонии бархатистые, высотой 2–5 мм, заполняющие чашку Петри после 9 дней инкубации при 25 ° C на MEA, сначала белые, вскоре становятся бледно-желтыми (M. 4A3), обратными бледно-желтыми (M. 4A4). Ризоиды очень многочисленные, образуются из различных частей гиф, простые или разветвленные, без перегородок, прямые или изогнутые, быстро исчезают.Спорангиеносцы прямостоячие, простые и симподиально разветвленные (5–10 раз) в основании и от двух до трехстворчатых на вершине, отходящие непосредственно от поверхностных и надземных гиф, длиной 1000–3000 мкм, шириной 4–10 мкм; ветви 20–1000 мкм длиной, 3–6 мкм шириной, без перегородок или с одной перегородкой, бесцветные, простые. Спорангии субглобные, (11–) 16–48 × (12-) 18–; 50 мкм, бледно-желтовато-коричневые, со стенкой шиповидной, медленно растворяющейся, иногда сломанной. Колумеллы от округлых до конических, диаметром 10–45 мкм, гиалиновые, устойчивые, разрушающиеся у основания; воротник не виден.Спорангиоспоры узкоэллипсоидные (иногда уплощенные с одной стороны), 4–8 × 2–3 мкм, гиалиновые, гладкостенные. Обильные хламидоспоры, оидиеподобные, толстостенные, терминальные или интеркалярные, одиночные или в виде длинных цепочек, от гиалиновых до субгиалиновых, шаровидные, эллипсоидальные, бочкообразные, цилиндрические или неправильные, 4–30 × 7–20 мкм, очень толстостенные , образующиеся на гифах, спорангиеносах, спорангиях и ризоидах. Зигоспоры отсутствуют.

    Характеристики колоний на КПК были аналогичны тем, которые можно было увидеть на MEA. На CZA колонии были гиалиновыми с однотонной обратной стороной.Оптимальная температура роста составляла 25 ° C, минимальная — 7 ° C. При 37 ° C наблюдался рост и спороношение. Гриб не рос при 42 ° C.

    Голотип . CBS H-20398 из жидкости для перитонеального диализа пациента-человека с хронической почечной недостаточностью, Флорида, США. Живые культуры ex-type FMR 10021, UTHSC 02-2090 и CBS 126271.

    Этимология . Эпитет ellipsoideus указывает на форму спорангиоспор.

    Обсуждение

    Вариабельность нуклеотидных последовательностей ITS-области сообщается несколькими авторами как полезный признак для различения таксонов, включенных в отряд Mucorales [19,20].Рабочая группа ISHAM по молекулярной идентификации грибов также предложила использовать ITS-последовательности в качестве надежного метода для этой цели [21]. В предыдущем исследовании, используя этот маркер, мы смогли идентифицировать многочисленные виды Mucorales из клинических образцов в США [9]. Однако в этом исследовании не удалось идентифицировать несколько изолятов Mucor . Здесь они могли быть однозначно идентифицированы после морфологического и генетического сравнения этих изолятов с эталонными штаммами родственных видов Mucor .Изоляты UTHSC 04-1961, UTHSC 02-1981 и UTHSC 06-1667 описаны здесь как новый вид M. velutinosus . Этот вид показал тесную молекулярную связь с M. circinelloides и M. ramosissimus , но его можно отличить от них по образованию более крупных и украшенных спорангиоспор . Mucor velutinosus также имеет некоторые сходства с другими видами Mucor с симподиально разветвленными спорангиеносами и шаровидными спорангиоспорами, такими как M.amphibiorum , M. fuscus и M. plumbeus. Однако Mucor amphibiorum не растет при 37 ° C, образует более высокие (до 25 мм) колонии, более широкие (до 20 мкм) спорангиофоры и спорангиоспоры с гладкими стенками и меньшего размера (3,4–5,4 мкм в диаметре); Mucor fuscus является наиболее похожим видом на M. velutinosus , поскольку оба образуют орнаментированные спорангиоспоры, но это украшение состоит из мельчайших выступов на стенках M. fuscus , которые имеют крупную веррукозу на M.velutinosus . Кроме того, M. fuscus отличается от M. velutinosus отсутствием роста при 37 ° C, образованием грушевидной формы и более крупных (до 80 × 52 мкм) колумелл и спорангиев (до 140 мкм в диаметре) и незначительной спорангиоспоры меньшего размера (до 11 мкм в диаметре). Mucor plumbeus , также продуцирует шаровидные и веррукозные спорангиоспоры, но его спорангиоспоры менее крупно орнаментированы, чем у M. velutinosus , он дает колумеллы с одним или несколькими выступами и не может расти при 37 ° C.

    Изолят UTHSC 02-2090 описан здесь как новый вид Mucor ellipsoideus . Этот вид генетически родственен M. amphibiorum и M. indicus . Однако M. ellipsoideus легко отличить от них, поскольку M. amphibiorum не растет при 37 ° C и дает более мелкие и сферические спорангиоспоры, а M. indicus растет при 42 ° C и дает спорангии меньшего размера. и более мелкие эллипсоидальные спорангиоспоры [3,17].

    Три других клинических изолята, UTHSC 03-1823, UTHSC 03-1044 и UTHSC 04-2492, были идентифицированы как M. lusitanicus . Шиппер [17] считал M. circinelloides f. lusitanicus в отличие от M. circinelloides f. circinelloides в зависимости от формы и размера спорангиоспор. Мы исследовали эти грибы морфологически и согласны с Шиппером в том, что они фенотипически различны. Эти различия были подтверждены в нашем филогенетическом исследовании; однако мы делаем вывод, как сообщалось ранее, что эти два гриба следует рассматривать как два разных вида, т.е.е., M. lusitanicus и M. circinelloides [22,23], вместо двух formae того же вида. Следовательно, два клинических изолята были идентифицированы как M. lusitanicus .

    Изолят UTHSC 04-2492, сгруппированный в наших филогенетических анализах, со штаммом M. fragilis (CBS 236.35) и двумя последовательностями, депонированными в GenBank как M. fragilis (EU862184 и EU484238). К сожалению, типа этого вида не существует и штамм CBS 236.35, идентифицированный Zycha в 1935 г. [24], является единственным доступным эталонным штаммом этого вида. Мы согласны с Шиппером [15], что этот штамм отличается от исходного описания вида [25] по важным признакам, например, он не производит зигоспор, а его спорангиоспоры крупнее (4–10 × 3–7 мкм против 4,2 мкм). × 2,1 мкм в исходном описании M. fragilis ), и они не имеют голубоватого оттенка. Напротив, этот изолят морфологически похож на штаммы M. lusitanicus , включенные в наше исследование, показывая процент сходства с типовым штаммом этого вида (CBS 108.17) 98% (область ITS) и 99,6% (домены D1-D2).

    Таксономия рода Rhizomucor , морфологически близкого к Mucor , остается нерешенной. Ранее мы продемонстрировали, что Rhizomucor variabilis var. regularior и R. variabilis var. variabilis были двумя разными видами, генетически связанными с Mucor spp. и четко отделен от Rhizomucor pusillus , типового вида этого рода [9]. Rhizomucor variabilis var. regularior морфологически и генетически неотличим от M. circinelloides [9] и R. variabilis var. variabilis, в настоящем исследовании, генетически родственны Mucor hiemalis и M. mucedo . Производство ризоидов и термофильные свойства традиционно считались основными характеристиками, которые отличают Rhizomucor от Mucor ; однако эти признаки следует рассматривать как гомоплазивные, поскольку несколько видов Mucor , например M.circinelloides и M. velutinosus также продуцируют ризоиды, а также некоторые виды Mucor , такие как M. indicus, , являются термотолерантными. Подробное исследование важнейших морфологических характеристик R. variabilis var. variabilis и R. variabilis var. regularior показал, что недостаточно признаков, чтобы отделить их от Mucor , и поэтому мы предлагаем следующие таксономические изменения:

    Mucor circinelloides Tieghem — Annls Sci.физ. 1: 94. 1875

    Mucor ambiguus Vuill. — Бык. Soc. Sci. Нэнси 8: 92. 1886

    Mucor alternans Tieghem in Gayon & Dubourg — Annls Inst. Pasteur, Paris 1: 532. 1887

    Mucor javanicus Wehmer — Zentbl. Бакт. ParasitKde, Abt. 2, 6: 619. 1900

    Mucor dubius Wehmer — Zentbl. Бакт. ParasitKde, Abt. 2, 7: 318. 1901 ( nomen provisorium ).

    Mucor prainii Chodat & Nechitch в Нечиче — Sur les ferments de deux levains de I’Inde.Le Mucor Prainii et le Dematium chodati, Женева, стр. 38. 1904

    Mucor griseo-roseus Linnemann — Beitrag zu einer Flora der Mucorineae Marburgs, p. 189. 1936

    Mucor ramificus B. S. Mehrotra & Nand — Sydowia 20: 69. 1966

    Mucor mandshuricus Saito — Rep. Cent. Лаборатория. С. Мандш. Railw. Ко. 1: 16. 1914 = Mucor circinelloides Tieghem var. mandshuricus (Saito) Milko — Атлас мукоральных грибов, с.67. 1971

    Circinomucor circinelloides (Tiegh.) Arx — Sydowia 35 : 18. 1982

    Rhizomucor variabilis var . regularior R. Y. Zheng & G.Q. Chen — Mycosystema 6 : 2. 1993

    M ucor lusitanicus Bruderl. — Бык. Soc. Бот. Genève 8 : 276. 1916

    Mucor griseo-lilacinus Povah — Бык. Бот Торри. Club 44 : 301. 1917.

    Mucor jauchae Lendner — Bull.Soc. бот. Женева 10 : 374. 1918

    Mucor zeicolus Graff — Список культур CBS, стр. 71. 1939 г. ( nomen nudum )

    Mucor racemosus Fresen var. lusitanicus (Bruderlein) Наумов — Clés des Mucorinées (Mucorales), стр. 47. 1939

    Mucor circinelloides Tiegh. f. lusitanicus (Bruderl.) Schipper — Stud. Mycol. 12 : 9. 1976

    Mucor irregularis Stchigel, Cano, Guarro & Álvarez, nom.ноя

    = Rhizomucor variabilis var. variabilis R. Y. Zheng & G. Q. Chen, Mycosystema 4 : 47. 1991

    Non M. variabilis A.K. Sarbhoy, Trans. Br. mycol. Soc. 48 : 559. 1965.

    Ключ для различения наиболее подходящих клинических видов Mucor

    .Диаметр 4–5,4 мкм 000 Спорангиоспоры очень изменчивой формы
    (1) Спорангиофоры неразветвленные или слабо разветвленные 2
    Спорангиофоры с многократным разветвлением 3
    M. amphibiorum
    Спорангиоспоры эллипсоидальные, 5,7–8,7 × 2,7–5,4 мкм M. hiemalis
    (3) Рост при 40 ° M. indicus
    Отсутствие роста при 40 ° C 4
    (4) Спорангиоспоры шаровидные или почти около 5
    Спорангиоспоры в остальном 6
    Спорангиоспоры гладкостенные 7
    (6) Рост при 37 ° C; спорангиоспоры грубо орнаментированные M.velutinosus
    Рост при 37 ° С отсутствует; спорангиоспоры с мелким орнаментом M. plumbeus
    (7) Растут при 35 ° C; спорангиеносцы с несколькими вздутием; спорангии на коротких боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,0–8,0 × 4,5–6,0 мкм M. ramosissimus
    Рост отсутствует при 35 ° C; у спорангиеносов нет вздутия; спорангии на длинных боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5.5–10,0 × 4,0–7,0 мкм M. racemosus
    (8) Спорангиоспоры эллипсоидальные, 4,4–6,8 × 3,7–4,7 мкм M. circinelloides
    9
    (9) Колумеллы неправильной формы; спорангиоспоры 2,5–16,5 × 2,0–7,0 мкм M. irregularis
    Columellae globose; спорангиоспоры 5,5–17,6 × 3,4–12,8 мкм M.lusitanicus
    00 спорангиофоры 3,49 M. amphibiorum 6
    (1) Спорангиеносцы неразветвленные или слабо разветвленные 2
    Спорангиофоры, многократно разветвленные
    Спорангиоспоры эллипсоидальные, 5,7–8,7 × 2,7–5,4 мкм M. hiemalis
    (3) Рост при 40 ° C M.indicus
    Нет роста при 40 ° C 4
    (4) Спорангиоспоры шаровидные или почти так 5
    Спорангиоспоры в остальном 8
    Спорангиоспоры гладкостенные 7
    (6) Рост при 37 ° C; спорангиоспоры с крупной росписью M. velutinosus
    При 37 ° С роста не происходит; спорангиоспоры с мелким орнаментом M.plumbeus
    (7) Выращивание при 35 ° C; спорангиеносцы с несколькими вздутием; спорангии на коротких боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,0–8,0 × 4,5–6,0 мкм M. ramosissimus
    Рост отсутствует при 35 ° C; у спорангиеносов нет вздутия; спорангии на длинных боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,5–10,0 × 4,0–7,0 мкм M. racemosus
    (8) Спорангиоспоры эллипсоидальные, 4.4–6,8 × 3,7–4,7 мкм M. circinelloides
    Спорангиоспоры очень разнообразны по форме 9
    (9) Колумеллы неправильной формы; спорангиоспоры 2,5–16,5 × 2,0–7,0 мкм M. irregularis
    Columellae globose; спорангиоспоры 5,5–17,6 × 3,4–12,8 мкм M. lusitanicus

    Ключ для различения наиболее релевантных клинических видов Mucor

    6085 разветвленных неразветвленных 000 Спорангиоспоры очень изменчивой формы
    (1) 2 спорангиеносных типа
    Спорангиоспоры многократно разветвленные 3
    (2) Спорангиоспоры сферические, 3.Диаметр 4–5,4 мкм M. amphibiorum
    Спорангиоспоры эллипсоидальные, 5,7–8,7 × 2,7–5,4 мкм M. hiemalis
    (3) Рост при 40 ° M. indicus
    Отсутствие роста при 40 ° C 4
    (4) Спорангиоспоры шаровидные или почти около 5
    Спорангиоспоры в остальном 6
    Спорангиоспоры гладкостенные 7
    (6) Рост при 37 ° C; спорангиоспоры грубо орнаментированные M.velutinosus
    Рост при 37 ° С отсутствует; спорангиоспоры с мелким орнаментом M. plumbeus
    (7) Растут при 35 ° C; спорангиеносцы с несколькими вздутием; спорангии на коротких боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,0–8,0 × 4,5–6,0 мкм M. ramosissimus
    Рост отсутствует при 35 ° C; у спорангиеносов нет вздутия; спорангии на длинных боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5.5–10,0 × 4,0–7,0 мкм M. racemosus
    (8) Спорангиоспоры эллипсоидальные, 4,4–6,8 × 3,7–4,7 мкм M. circinelloides
    9
    (9) Колумеллы неправильной формы; спорангиоспоры 2,5–16,5 × 2,0–7,0 мкм M. irregularis
    Columellae globose; спорангиоспоры 5,5–17,6 × 3,4–12,8 мкм M.lusitanicus
    00 спорангиофоры 3,49 M. amphibiorum 6
    (1) Спорангиеносцы неразветвленные или слабо разветвленные 2
    Спорангиофоры, многократно разветвленные
    Спорангиоспоры эллипсоидальные, 5,7–8,7 × 2,7–5,4 мкм M. hiemalis
    (3) Рост при 40 ° C M.indicus
    Нет роста при 40 ° C 4
    (4) Спорангиоспоры шаровидные или почти так 5
    Спорангиоспоры в остальном 8
    Спорангиоспоры гладкостенные 7
    (6) Рост при 37 ° C; спорангиоспоры с крупной росписью M. velutinosus
    При 37 ° С роста не происходит; спорангиоспоры с мелким орнаментом M.plumbeus
    (7) Выращивание при 35 ° C; спорангиеносцы с несколькими вздутием; спорангии на коротких боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,0–8,0 × 4,5–6,0 мкм M. ramosissimus
    Рост отсутствует при 35 ° C; у спорангиеносов нет вздутия; спорангии на длинных боковых ветвях;
    спорангиоспоры 5,5–10,0 × 4,0–7,0 мкм M. racemosus
    (8) Спорангиоспоры эллипсоидальные, 4.4–6,8 × 3,7–4,7 мкм M. circinelloides
    Спорангиоспоры очень разнообразны по форме 9
    (9) Колумеллы неправильной формы; спорангиоспоры 2,5–16,5 × 2,0–7,0 мкм M. irregularis
    Columellae globose; спорангиоспоры 5,5–17,6 × 3,4–12,8 мкм M. lusitanicus

    В филогении рДНК D1 – D2 видов Chaetocladium brefeldii , Kirkomyces 9000 и paradense cordense были связаны с некоторыми паразитными паразитами и паразитами 0006 из Mucor .О такой связи также сообщили О’Доннелл и др. . [2] на основе филогенетического анализа генов 18S рДНК и факторов элонгации трансляции. На основе явной полифилии Mucor необходимы дальнейшие молекулярно-филогенетические анализы для определения границ природных таксонов и родственных связей. Род Parasitella был создан Bainier [25] (1903) для размещения Mucor parasiticus , который морфологически родственен другим видам рода Mucor , но отличается от них способностью паразитировать на других Mucorales и по наличию пальцевидных выступов на подвесках зигоспор [26].Позже другие авторы [5,24,27] также дифференцировали Parasitella от Mucor путем образования узловатых вегетативных структур, полученных в результате слияния гиф паразита и хозяина. Однако этих морфологических и экологических различий недостаточно, чтобы рассматривать Parasitella и Mucor как отдельные роды. Размещение Chaetocladium и Kirkomyces , смешанных с различными видами Mucor , на филогенетических деревьях, о которых сообщает O’Donnell et al .[2] продемонстрировали полифилию Mucor.

    Результаты по чувствительности к противогрибковым препаратам показали, что амфотерицин B является наиболее активным противогрибковым средством против нового вида (Таблица 2), факт, сообщенный многими другими авторами для других видов Mucor , имеющих клиническое значение [28]. Позаконазол и итраконазол показали ограниченную активность.

    Предоставляется дихотомический ключ для различения наиболее важных клинических видов Mucor ( M. ellipsoideus не включен, поскольку он был выделен только один раз из жидкости для перитонеального диализа, и его истинная клиническая роль проблематична).

    Благодарности

    Эта работа была поддержана грантами CGL 2007-65669 / BOS и CGL 2009-08698 / BOS, предоставленными Министерством экономики и технологий Испании. Благодарим Каталину Нуньес за техническую помощь.

    Заявление об интересах: Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов. Только авторы несут ответственность за содержание и написание статьи.

    Список литературы

    1.« и др.

    Филогенетическая классификация грибов более высокого уровня

    ,

    Mycol Res

    ,

    2007

    , vol.

    111

    (стр.

    509

    547

    ) 2.,,,.

    Эволюционные взаимоотношения между мукоралеановыми грибами (Zygomycota): свидетельства крупномасштабной семейной полифилии

    ,

    Mycologia

    ,

    2001

    , vol.

    93

    (стр.

    286

    296

    ) 3.,,,. ,

    Атлас клинических грибов

    ,

    2000

    2-й

    Утрехт, Нидерланды

    Centraalbureau voor Schimmelcultures

    4 ..

    По некоторым видам Mucor с ключом ко всем принятым видам

    ,

    Stud Mycol

    ,

    1978

    , т.

    17

    (стр.

    1

    52

    ) 5.,,. ,

    Mucorales: Eine Beschreibungaller Gattungen und Arten Dieser Pilzgruppe

    ,

    1969

    Lehre (Германия)

    Cramer

    6.,,,,.

    Микрофлора и отдельные метаболиты картофельной пульпы, ферментированной индонезийской закваской Ragi Tapé

    ,

    Food Technol Biotechnol

    ,

    2004

    , vol.

    42

    (стр.

    169

    173

    ) 7.,,.

    Эффективность Rhizopus , Rhizomucor и Mucor при производстве этанола из глюкозы, ксилозы и гидролизатов древесины

    ,

    Enzyme Microb Technol

    ,

    2005

    , vol.

    36

    (стр.

    294

    300

    ) 8.,,, Et al.

    Биоразложение циклодиенового инсектицида эндосульфана под действием Mucor thermohyalospora MTCC 1384

    ,

    Curr Sci

    ,

    2000

    , vol.

    79

    (стр.

    1381

    1383

    ) 9.,,, Et al.

    Спектр видов зигомицетов, идентифицированных на клинически значимых образцах в США

    ,

    J Clin Microbiol

    ,

    2009

    , vol.

    47

    (стр.

    1650

    1656

    ) 10.,,.

    Зигомицеты при болезнях человека

    ,

    Clin Microbiol Rev

    ,

    2000

    , vol.

    13

    (стр.

    236

    301

    ) 11.,,,. ,,,.

    Амплификация и прямое секвенирование генов рибосомной РНК грибов для филогенетики

    ,

    Протоколы ПЦР: Руководство по методам и применению

    ,

    1990

    Нью-Йорк

    Academic Press

    (стр.

    315

    322

    ) 12 .. ,.

    Fusarium и его ближайшие родственники

    ,

    Грибковый голоморф: митотическая, мейотическая и плеоморфная разновидности в грибковой систематике

    ,

    1993

    Wallingford

    CAB International

    (стр.

    225

    233

    ) (стр.

    225

    233

    ) . ,

    Methuen Handbook of Color

    ,

    1978

    3rd

    London, UK

    Methuen

    14.,.

    Сканирующее электронно-микроскопическое исследование развития аскомы у Chaetomium malaysiense

    ,

    Mycologia

    ,

    1988

    , vol.

    80

    (стр.

    298

    306

    ) 15 ..

    Исследование изменчивости Mucor hiemalis и родственных видов

    ,

    Stud Mycol

    ,

    1973

    , vol.

    4

    (стр.

    1

    40

    ) 16 ..

    Mucor mucedo , Mucor flavus и родственные виды

    ,

    Stud Mycol

    ,

    1975

    , vol.

    10

    (стр.

    1

    33

    ) 17 ..

    На Mucor circinelloides , Mucor racemosus и родственные виды

    ,

    Stud Mycol

    ,

    1976

    , vol.

    12

    (стр.

    1

    40

    ) 18.

    Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам

    Эталонный метод определения чувствительности мицелиальных грибов к противогрибковым растворам в бульоне: утвержденный стандарт — второе издание. Документ M38-A2

    ,

    2008

    Wayne, PA

    Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам

    19.,,, et al.

    Молекулярная идентификация зигомицетов в культуре и экспериментально инфицированных тканях

    ,

    J Clin Microbiol

    ,

    2006

    , vol.

    44

    (стр.

    340

    349

    ) 20.,,, Et al.

    Филогения Zygomycota на основе данных ядерных рибосомных последовательностей

    ,

    Mycologia

    ,

    2006

    , vol.

    98

    (стр.

    872

    884

    ) 21.,,, Et al.

    Идентификация последовательностей Aspergillus, Fusarium и Mucorales в лаборатории клинической микологии: где мы находимся и куда нам двигаться дальше?

    ,

    J Clin Microbiol

    ,

    2009

    , т.

    47

    (стр.

    877

    884

    ) 22 ..

    Nouvelles recherches sur les Mucorinées

    ,

    Annl Sci Nat

    ,

    1875

    , vol.

    1

    (стр.

    5

    175

    ) 23 ..

    Mucor lusitanicus n.sp

    ,

    Bull Soc Bot Genève

    ,

    1916

    , vol.

    8

    (стр.

    273

    276

    ) 24.,.

    Mucorineae . Kryptogamenflora der Mark Brandenburg 6a

    ,

    Leipzig

    ,

    1935

    25..

    Sur quelques espèces de Mucorinées nouvelles ou peu connues

    ,

    Bull Soc Mycol Fr

    ,

    1903

    , vol.

    19

    (стр.

    153

    172

    ) 26 ..

    Untersuchungen über Sexualität und Parasitismus bei Mucorineen I

    ,

    Bot Abh

    ,

    1924

    , vol.

    4

    (стр.

    1

    135

    ) 27 ..,

    Clés des Mucorinées (Mucorales)

    ,

    1939

    Paris

    P. Lechevalier

    28.,,,,.

    In vitro Чувствительность 217 клинических изолятов зигомицетов к традиционным и новым противогрибковым агентам

    ,

    Противомикробные агенты Chemother

    ,

    2007

    , vol.

    51

    (стр.

    2587

    2590

    )

    Эта статья была впервые опубликована на сайте Early Online 21 июля 2010 года.

    © 2011 ISHAM

    Mucor sp. | Виноградарство и энология

    Род / вид: Mucor sp .

    Классификация: Зигомицет

    Морфология:

    • Ячейка: Форма очень тонких нитей, увенчанных шарообразными скоплениями спор
    • Колония: солодовый агар: обычно от белого до бежевого или серого цвета, быстрорастущий.
    • WL: обычно от белого до бежевого или серого, быстрорастущий.
    • Спора: образовалась на шаровидном спорангии
    • Зигота: используется при половом размножении, зигоспорангий обычно содержит одну зигоспору
    • Ascus: НЕТ
    • Рост жидкости: Рост плесени на поверхности жидкости

    Физиологические признаки:

    В грибах используются сахар и аминокислоты от растений-хозяев, таких как фрукты, почва и т. Д.в качестве источников питательных веществ, а затем колонизируют поверхность питательного хозяина.

    Экологические признаки:

    Почва, пищеварительная система, поверхности растений, гнилые растительные вещества, органические вещества и навоз

    Отличительные особенности:

    Спорангиофоры Mucor могут быть простыми или разветвленными и образовывать апикальные глобулярные спорангии, которые поддерживаются и приподнимаются столбчатой ​​колумеллой. Виды Mucor можно отличить от плесневых грибов родов Absidia , Rhizomucor и Rhizopus по форме и расположению колумеллы, а также по отсутствию ризоидов.Около видов Mucor продуцируют хламидоспоры.

    Роль в вине:

    Mucor Гниль возникает как послеуборочная болезнь фруктов, включая столовый виноград, и может причинить значительный ущерб. Гниль очень редко встречается у винограда для производства вина.

    Чувствительность:

    SO2: Есть

    Сорбат: Да

    DMDC: Неизвестно

    pH: неизвестно

    Кислоты: Есть

    Этанол: Есть

    Анаэробиоз: есть

    Температура:> 25 градусов Цельсия

    Артикул:

    Кениг, Гельмут и Юрген Фрелих.2009. Биология микроорганизмов на винограде, в сусле и в вине . Springer-Verlag Berlin Heidelberg.

    Обнаружение диморфных фаз Mucor circinelloides в культурах крови от самок с подавленным иммунитетом

    Мукормикоз фунгемия редко документируется, поскольку посев крови почти всегда отрицательный. Мы описываем случай фунгемии Mucor circinelloides у пациента с инфекцией носовых пазух в анамнезе, саркоидозом и дефицитом IgG.Идентичность изолята подтверждается его микроскопической морфологией и его способностью превращаться в дрожжевые формы в анаэробных условиях. Раннее выявление, начало лечения липосомальным амфотерицином B и устранение основных предрасполагающих факторов риска привели к хорошему результату.

    1. Введение

    Мукормикозы — это инфекционные заболевания, вызываемые мицелиальными грибами, относящимися к отряду Mucorales [1]. Заражение происходит, когда чувствительный (например, с ослабленным иммунитетом) человек подвергается воздействию спор при вдыхании, проглатывании или травматической имплантации.Возникающие в результате патологические процессы часто характеризуются быстрым клиническим прогрессом и высокой смертностью [1, 2]. Mucorales редко вызывают инфекцию у иммунокомпетентных людей, но могут вызывать смертельную инфекцию у пациентов с ослабленным иммунитетом. Факторы риска включают гематологические злокачественные новообразования, трансплантацию костного мозга или твердых органов, нейтропению, сахарный диабет, кортикостероиды, железохелатную терапию, антибиотики широкого спектра действия, противогрибковую профилактику, длительное использование вориконазола, разрушение кожи (в результате травм, хирургических ран, уколов иглой или ожогов). ), переедание и тяжелое недоедание [1, 2].Особенности этих организмов, которые способствуют их вирулентности, включают их высокую скорость роста и их способность проникать в кровеносные сосуды [1–3]. Последняя характеристика позволяет им распространяться по всему телу, открывая доступ к многочисленным тканям и органам, которые в конечном итоге могут быть инфицированы [2]. Однако документально подтвержденная фунгемия при мукормикозе встречается очень редко, а посев крови обычно отрицательный. Демонстрация инвазивного заболевания этими организмами обычно требует идентификации грибковых элементов непосредственно в клинических образцах посредством гистопатологического исследования или роста этих организмов из более чем одного образца, полученного из обычно стерильного места [3].

    Известно, что некоторые виды Mucor , но не все, являются диморфными. Эта особая группа зигомицетов демонстрирует рост гиф в аэробных условиях и рост многопучковых дрожжей в анаэробных условиях или условиях с высоким содержанием CO 2 [4]. M. circinelloides является одним из этих видов, наряду с M. racemosus , M. rouxii , M. genevensis , M. bacilliformis , M. subtilissimus и M. amphibiorum . Инфекции M. circinelloides хорошо описаны в литературе и были связаны с кожными, носороговыми и легочными инфекциями [5–9]. Насколько нам известно, зарегистрировано только два случая фунгемии, вызванной этим организмом [10, 11]. В этом отчете мы описываем случай фунгемии M. circinelloides у женщины с предшествующей историей хронической инфекции носовых пазух, саркоидозом и дефицитом IgG.

    2. Отчет о болезни

    38-летняя женщина поступила в отделение неотложной помощи больницы в сельской Индиане с одышкой и кашлем, заложенностью носовых пазух и лихорадкой до 39.4 ° C, дренаж из носа, боль в горле и выделение желто-зеленой мокроты. Анамнез пациентки включал саркоидоз, дефицит IgG и инфекцию носовых пазух, от которой она завершила лечение цефдиниром за 1 неделю до госпитализации. Пациент констатировал улучшение на фоне приема антибиотиков, но после завершения терапии симптомы ухудшились. При физикальном обследовании у пациента была температура 37,5 ° C и проявился умеренный респираторный дистресс без хрипов, хрипов или хрипов. Она была настороже, бодрствовала и ориентировалась без ушей, носа, горла, сердечно-сосудистой системы, брюшной полости, спины, конечностей, кожи, неврологических или психических отклонений.Рентген грудной клетки ничего не примечательного. Образцы периферической крови, полученные во время первичной презентации, продемонстрировали лейкоцитоз, гипергликемию и низкий уровень калия, CO 2 , общего белка и магния (Таблица 1). Бутылки для аэробных культур крови (BD BACTEC Plus Aerobic / F) из двух наборов культур крови, собранных во время приема, дали положительный результат в течение 24 часов после инкубации в системе непрерывного мониторинга культуры крови (BACTEC 9240, BD Diagnostics, Sparks, MD).Окрашивание по Граму бульона выявило плеоморфные дрожжевые формы и широкие малочисленные гифы с прямоугольным ветвлением (рис. 1 (а)). Наблюдались дрожжевые формы с одинарными, биполярными и кольцевыми почками. Некоторые из наблюдаемых дрожжевых клеток напоминали дрожжевую фазу Paracoccidioides brasiliensis (рис. 1 (b)). Результаты окрашивания по Граму были зарегистрированы как «присутствуют грибковые элементы» и были немедленно отправлены бригаде клинической помощи.


    Тест Результат пациента Референсный диапазон

    WBC 13.7 кОм / дл 3,6–5,17 кОм / м
    Hgb 11,5 гм / дл 12,0–16,0 гм / дл
    MCV 79 fL 81–998 м / л 81–998 м / л 24,9 пг 27–34 пг
    MCHC 31,5 гм / дл 32,0–36,0 гм / дл
    RDW 15,8%

    11,5–8 нейтро 8,2 тыс. / Куб.м 1.7–7,6 к / м
    Абсолютный лимфоцит 4,0 к / м 1,0–3,2 к / м
    Абсолютный эозинофил 0,4 к / м 0,0–0,3 к / м 0,0–0,3 к / м 908 Калий SerPl QN 2,8 ммоль / л 3,5–5,5 ммоль / л
    Углекислый газ SerPl QN 21 ммоль / л 22–29 ммоль / л
    Глюкоза 608 SerPl Q9 мг / дл 70–99 мг / дл
    Магний SerPl QN 1.3 мг / дл 1,6–2,9 мг / дл
    AST SerPl QN 8 единиц / л 13–39 единиц / л
    Общий белок SerPl QN 6,0 GM / дл –8,0 ГМ / дл

    На следующий день рост плесени наблюдался на пластинах с аэробным агаром с овечьей кровью и шоколадным агаром, инкубированных при 35 ° C в 5% CO 2 и на картофеле декстрозу и агары Сабуро инкубировали при 30 ° C.Быстрорастущие колонии флокозы изначально были бледно-серыми или желтыми, со временем становясь коричневыми при инкубации при 35 ° C. Микроскопическое исследование колонии плесени путем окрашивания лактофеноловым ватным синим выявило широкие ленточные пауцисептатные широкие гифы с прямым разветвлением. Наблюдались симподиально разветвленные и округлые спорангиофоры (рис. 2 (а) и 2 (б)). Шаровидные спорангии размером 25–80 мкм м содержали спорангиоспоры овальной формы (рис. 2 (c)). Колумеллы были сферическими, диаметром до 50 мкм м; воротнички присутствовали (Рисунок 2 (d)).Ризоиды и столоны отсутствовали. Идентичность изолята как M. circinelloides подтверждается его микроскопической морфологией, его способностью превращаться в дрожжевые формы в анаэробных условиях и его неспособностью расти при 42 ° C (рис. 3). Окончательная идентификация, основанная на молекулярных и фенотипических методах, выходила за рамки этого исследования. После сообщения об этих результатах пациенту было начато лечение липосомальным амфотерицином B 500 мг внутривенно каждые 24 часа; последующие посевы крови и пазух были отрицательными.Кроме того, результаты биопсии пазух и компьютерная томография (компьютерная томография) грудной клетки и носовых пазух не показали каких-либо явных доказательств поражения грибком. Как следствие, противогрибковое лечение было прекращено через 6 дней, и пациент был выписан домой без дальнейших осложнений. Через 7 месяцев после выписки у пациента не было признаков инфекции Mucor .


    3. Обсуждение

    Сапрофитная природа Mucorales делает диагностику мукормикоза сложной задачей, когда эти организмы изолированы из нестерильных участков [1].Поскольку они распространены повсеместно, присутствие этих организмов иногда можно не учитывать, поскольку во многих случаях они, вероятно, представляют собой заражение клинического образца или питательной среды. Поэтому очень важно, чтобы врач и лабораторный персонал работали вместе, чтобы определить клиническую значимость лабораторных результатов. В большинстве случаев диагноз инвазивного мукормикоза обычно ставится, когда эти организмы идентифицируются непосредственно из клинических образцов или выделяются в культуре из более чем одного образца, полученного из обычно стерильного места.В представленном случае диагноз мукормикоза был поставлен путем выделения Mucor circinelloides из двух наборов культур крови, собранных из двух разных участков. Это открытие было сочтено клинически значимым, поскольку оно представляло несколько образцов, взятых из обычно стерильного места.

    В этом случае источник инфекции неизвестен, но мы предположили, что это, вероятно, связано с ее синуситом. Успешное лечение и оптимальный результат, скорее всего, были связаны с ранним обнаружением и выделением микроорганизма из посевов крови, что побудило к раннему применению противогрибковой терапии.Кроме того, коррекция гипокалиемии, гипомагниемии и гипергликемии способствовала ее выздоровлению, поскольку, как сообщалось, изменение основных физиологических дисгомеостатических состояний коррелировало с хорошими результатами для пациентов [12]. В хирургической обработке раны не было необходимости, так как контрольные обследования не выявили очагов грибковой инфекции. Основываясь на результатах лечения пациента, мы также можем предположить, что этот случай мог представлять собой преходящую фунгемию или что возбудитель имеет низкую вирулентность [13].

    Насколько нам известно, ранее были описаны только два случая фунгемии, связанной с M. circinelloides . Первые зарегистрированные случаи произошли у 48-летнего мужчины с синдромом короткой кишки в анамнезе, вторичным по отношению к множественным операциям на брюшной полости [10]. У этого пациента был центральный венозный катетер (ЦВК), который требовался для хронического полного парентерального питания. В культурах крови, полученных из CVC в последовательные дни, выросли Candida albicans и M. circinelloides .Было начато лечение липосомальным амфотерицином B, и ЦВК был удален. Как и в нашем случае, авторы заявили, что ранняя диагностика мукормикоза в сочетании с быстрым терапевтическим вмешательством привели к успешному результату. Второй зарегистрированный случай произошел с 83-летней женщиной-диабетиком, у которой во время госпитализации в неврологическое отделение интенсивной терапии развился острый левый лобно-теменный инфаркт [11]. Первоначальное выделение плесени из посевов крови считалось загрязнителем, но в последующие дни у пациентки появилось эритематозное и отечное поражение на правой руке.При биопсии кожи выросла плесень, идентичная культуре крови; оба изолята позже были идентифицированы как M. circinelloides молекулярными методами. Несмотря на лечение, клиническое состояние пациентки ухудшилось, позже она умерла.

    4. Заключение

    Этот случай представляет собой третий задокументированный случай фунгемии, вызванной M. circinelloides . Наиболее вероятные основные факторы, вероятно, были связаны с ее хронической инфекцией носовых пазух, дефицитом IgG и хроническим употреблением стероидов.Обнаружение этой плесени и устранение предрасполагающих основных условий были жизненно важны для успешного лечения.

    Раскрытие информации

    Выраженные взгляды принадлежат авторам и не должны толковаться как отражающие позицию армии США или Министерства обороны.

    Конкурирующие интересы

    Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации данной статьи.

    Профили ассимиляции углерода мукоралевых грибов показывают их метаболическую универсальность

  • 1.

    Mccann, M. & Carpita, N. Проектирование деконструкции стенок растительных клеток. Curr. Opin. Plant Biol. 11 , 314–320 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 2.

    Кендрик Б. Грибы и история микологии. E LS (2001).

  • 3.

    Nelsen, M. P., DiMichele, W. A., Peters, S. E. и Boyce, C. K. Задержка эволюции грибов не стала причиной палеозойского пика добычи угля. Proc. Natl. Акад. Sci. 113 , 2442–2447 (2016).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 4.

    Floudas, D. et al. . Палеозойское происхождение ферментативного разложения лигнина на основе 31 генома грибов. Наука 336 , 1715–1719 (2012).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 5.

    Лутцони, Ф. и др. . Одновременное излучение грибов и растений связано с симбиозом. Nat. Commun. 9 , 5451 (2018).

    ADS Статья Google ученый

  • 6. ​​

    Филд, К. Дж., Прессел, С., Дакетт, Дж. Г., Римингтон, У. Р. и Бидартондо, М. И. Симбиотические варианты завоевания земли. Trends Ecol. Evol. 30 , 477–486 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 7.

    Spatafora, J. W. et al. . Филогенетическая классификация зигомицетов на уровне филумов на основе данных в масштабе генома. Mycologia 108 , 1028–1046 (2016).

    CAS Статья Google ученый

  • 8.

    Desirò, A. et al. . Мультигенная филогения Endogonales , ранняя расходящаяся ветвь грибов, связанных с растениями. IMA Fungus 8 , 245–257 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 9.

    Войт, К. и Вёстемейер, Дж. Филогения и происхождение 82 зигомицетов из всех 54 родов Mucorales и Mortierellales на основе комбинированного анализа генов актина и фактора элонгации трансляции EF-1a. 113–120 (2001).

  • 10.

    Hoffmann, K. et al. . Семейная структура Mucorales : синоптический пересмотр, основанный на обширных мультигенных генеалогиях. Persoonia — Mol. Phylogeny Evol. Грибы 30 , 57–76 (2013).

    CAS Статья Google ученый

  • 11.

    Фойгт, К., Ваас, Л., Стилоу, Б. и де Хуг, Г. С. Зигомицеты в филогенетической перспективе. Persoonia — Mol. Phylogeny Evol. Грибы 30 , 1–4 (2013).

    Артикул Google ученый

  • 12.

    Savory, F.Р., Милнер, Д. С., Майлз, Д. К. и Ричардс, Т. А. Предковая функция и диверсификация горизонтально приобретенного переносчика карбоновых кислот оомицетов. Мол . Биол . Evol . 1–14, https://doi.org/10.1093/molbev/msy082 (2018).

    CAS Статья Google ученый

  • 13.

    Muszewska, A. et al . Образ жизни грибов отражается в репертуаре сериновых протеаз. Sci. Отчет 7 , 9147 (2017).

    ADS Статья Google ученый

  • 14.

    Hesseltine, C. W. & Ellis, J. J. Mucorales. В Грибы . Продвинутый трактат . (ред. Эйнсворт, Г. К., Воробей, Ф. К. и Сассман, А. С.) 4B , 187–217 (Academic Press, 1973).

  • 15.

    Войт, К. и др. . 15 Генетические и метаболические аспекты первичного и вторичного метаболизма зигомицетов. в Биохимии и молекулярной биологии (изд.Хоффмайстер, Д.) 361–385, https://doi.org/10.1007/978-3-319-27790-5_15 (Springer International Publishing, 2016).

    Глава Google ученый

  • 16.

    Krisch, J., Takó, M., Papp, T. и Vágvölgyi, C. Характеристики и потенциальное использование β-глюкозидаз из Zygomycetes. 891–896 (2010).

  • 17.

    Pawłowska, J. et al. . Предварительные исследования эволюции способности к ассимиляции углерода в Mucorales. Fungal Biol. 120 , 752–763 (2016).

    Артикул Google ученый

  • 18.

    Шварц, П. и др. . Молекулярная идентификация грибов, обнаруженных на разложившихся человеческих телах при судебно-медицинских вскрытиях. Внутр. J. Legal Med. 129 , 785–791 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 19.

    Гурнас, К., Превост, М., Краммер, Э.-М. И Андре, Б. Функция и регуляция переносчиков грибковых аминокислот: выводы из прогнозируемой структуры. in Дрожжевая мембрана Транспорт (ред. Рамос, Дж., Сихрова, Х. и Кшишо, М.) 892 , 69–106 (Springer International Publishing, 2016).

  • 20.

    Шварце, В. У. и др. . Экспансия генов формирует архитектуру генома в человеческом патогене Lichtheimia corymbifera: эволюционный анализ геномики у древних наземных Mucorales (Mucoromycotina). PLoS Genet. 10 , e1004496 (2014).

    Артикул Google ученый

  • 21.

    Болдриан, П. и др. . Производство внеклеточных ферментов и разложение биополимеров сапротрофными микрогрибами из верхних слоев лесной почвы. Почва растений 338 , 111–125 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 22.

    Фэрроу, В. М. Тропические почвенные грибы. Mycologia 46 , 632–646 (1954).

    Артикул Google ученый

  • 23.

    Vermelho, A. B. & Couri, S. Методы определения ферментативной активности . (Издательство Bentham Science, 2015).

  • 24.

    Чен В., Се Т., Шао Ю. и Чен Ф. Филогеномные отношения между амилолитическими ферментами из 85 штаммов грибов. PLoS ONE 7 , e49679 (2012).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 25.

    Cantarel, B.L. и др. . База данных углеводно-активных ферментов (CAZy): экспертный ресурс по гликогеномике. Nucleic Acids Res. 37 , D233 – D238 (2009).

    CAS Статья Google ученый

  • 26.

    Battaglia, E. et al. . Углеводно-активные ферменты из зигомицетов Rhizopus oryzae: высокоспециализированный подход к расщеплению углеводов на уровне генома. BMC Genomics 12 , 38 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 27.

    Martinez, D. et al. . Анализ генома, транскриптома и секретома гриба гниения древесины Postia placenta поддерживает уникальные механизмы превращения лигноцеллюлозы. Proc. Natl. Акад. Sci. 106 , 1954–1959 (2009).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 28.

    Мартин, Ф. и др. . Геном Laccaria bicolor дает представление о микоризном симбиозе. Nature 452 , 88–92 (2008).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 29.

    Ричардсон, М. Экология зигомицетов и ее влияние на воздействие окружающей среды. Clin. Microbiol. Заразить. 15 , 2–9 (2009).

    Артикул Google ученый

  • 30.

    Purahong, W. и др. . Жизнь в листовой подстилке: новое понимание динамики сообществ бактерий и грибов во время разложения подстилки. Мол. Ecol. 25 , 4059–4074 (2016).

    CAS Статья Google ученый

  • 31.

    Eichlerová, I. et al . Ферментативные системы, участвующие в разложении, отражают экологию и таксономию сапротрофных грибов. Fungal Ecol. 13 , 10–22 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 32.

    Kuivanen, J., Sugai-Guérios, M.H., Arvas, M. & Richard, P. Новый путь грибкового катаболизма D-глюкуроната содержит L-идонат, образующий 2-кето-L-гулонатредуктазу. Sci. Отчет 6 , 26329 (2016).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 33.

    Бартницки-Гарсиа, С. Химия клеточной стенки, морфогенез и таксономия грибов. Annu. Rev. Microbiol. 22 , 87–108 (1968).

    CAS Статья Google ученый

  • 34.

    Walther, G. et al. . Штрих-кодирование ДНК в Mucorales : перечень биоразнообразия. Persoonia — Mol. Phylogeny Evol. Грибы 30 , 11–47 (2013).

    CAS Статья Google ученый

  • 35.

    de Hoog, G.С., Гуарро, Дж., Джин, Дж. И Фигерас, М. Дж. Атлас клинических грибов . 3-е изд. . — компакт-диск . (2009).

  • 36.

    Престон-Мафхэм, Дж., Бодди, Л. и Рандерсон, П. Ф. Анализ функционального разнообразия микробного сообщества с использованием профилей использования единственного источника углерода — критический анализ. FEMS Microbiol. Ecol. 42 , 1–14 (2002).

    CAS PubMed Google ученый

  • 37.

    R Основная команда. R: Язык и среда для статистических вычислений . (Фонд R для статистических вычислений, 2017).

  • 38.

    Tang, Y., Horikoshi, M. & Li, W. ggfortify: унифицированный интерфейс для визуализации статистических результатов популярных пакетов R. R J. 8 , 478–489 (2016).

    Артикул Google ученый

  • 39.

    Оксанен, Дж. и др. . vegan: Пакет «Экология сообщества» (2008).

  • 40.

    Паради, Э., Клод, Дж. И Стриммер, К. APE: Анализ филогенетики и эволюции на языке R. Биоинформатика 20, (289–290 (2004).

    Google ученый

  • 41.

    Като, К. и Стэндли, Д. М. Программное обеспечение для множественного выравнивания последовательностей MAFFT, версия 7: Улучшения в производительности и удобстве использования. Мол. Биол. Evol. 30 , 772–780 (2013).

    CAS Статья Google ученый

  • 42.

    Козлов, А.М., Дарриба, Д., Флури, Т., Морел, Б. и Стаматакис, А. RAxML-NG: быстрый , масштабируемый , и удобный инструмент для филогенетического вывода с максимальной вероятностью , https://doi.org/10.1101/447110 (Биоинформатика, 2018).

  • 43.

    Stamatakis, A. RAxML версия 8: инструмент для филогенетического анализа и постанализа крупных филогений. Биоинформатика 30 , 1312–1313 (2014).

    CAS Статья Google ученый

  • 44.

    Координаторы ресурсов NCBI. Ресурсы базы данных Национального центра биотехнологической информации. Nucleic Acids Res.

  • 1 thought on “Как вырастить мукор: как вырастить мукор ( плесень на хлебе) за 1 день? 50 баллов и вообще возможно ли это?

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *