Вакцина эмульгированная против пастереллеза крс: ВАКЦИНА ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, БУЙВОЛОВ И ОВЕЦ инструкция по применению, состав, показания, противопоказания, побочные эффекты – эмульсия (инактивированная вакцина)

Содержание

ВАКЦИНА ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, БУЙВОЛОВ И ОВЕЦ инструкция по применению, состав, показания, противопоказания, побочные эффекты – эмульсия (инактивированная вакцина)

Суспензия белого цвета, иногда со светло-желтым оттенком, вязкой консистенции, непрозрачная; при длительном хранении допускается незначительное отслоение на 0.5-1 см минерального масла под эмульсией; при тщательном встряхивании вакцина приобретает однородную гомогенную структуру.

1 мл
инактивированная формалином концентрированная культура пастерелл крупного рогатого скота, буйволов и овец

Вспомогательные вещества: водно-масляная эмульсия, эмульгатор.

Расфасована по 50, 100 или 200 мл во флаконы по ТУ 64-2-10. Флаконы герметично укупоривают резиновыми пробками по ТУ 38-006-108 и обкатывают алюминиевыми колпачками по ОСТ 64-009. На каждом флаконе должна быть этикетка с указанием предприятия-изготовителя и его товарного знака, наименования препарата, количества его во флаконе (мл) и доз для животных, номера серии, номера контроля, срока годности, способа применения, даты изготовления (месяц, год), условий хранения и обозначения ТУ (СТО).

Этикетированные флаконы с вакциной обертывают бумагой или алигнином ГОСТ12923, ав холодное время года серой ватой или другими теплоизолирующими материалами и упаковывают в коробки, обеспечивающие неподвижность флаконов с препаратами при транспортировании.
Маркировка, характеризующая данные об упакованной продукции должна содержать следующие данные: наменование организации-производителя, наименование биопрепарата, его количество в коробке, номер серии, номер контроля, дата изготовления, срок годности, условия хранения и обозначения ТУ (СТО) и надписи "Для животных". Внутрь каждой коробки вкладывают инструкцию по применению вакцины.

Свидетельство о регистрации № ПВР-1-2.5/01417 от 11.12.06

Вакцина Бовирет против пастереллеза КРС и буйволов инактивированная (100мл)

ОПИСАНИЕ

Бовирет - инактивированная вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов. По внешнему виду вакцина представляет собой жидкость светло-желтого цвета, с обильным рыхлым осадком, при встряхивании легко разбивающийся в гомогенную взвесь.

СОСТАВ

Вакцина изготовлена из штаммов Pasteurella multocida № 796, 116, 216, Ф, Д, инактивированных формалином (в концентрации до 0,3% ), с добавлением в качестве адъюванта гидрата окиси алюминия на основе фосфатного буфера (в концентрации 7,5%).

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

Вакцина вызывает формирование иммунного ответа у крупного рогатого скота и буйволов к пастереллезу на 10-20 день после второго введения, продолжительностью не менее 8 месяцев.

В одной иммунизирующей дозе вакцины (5 см3) содержится не менее 5 млрд. микробных клеток каждого штамма: Р. multocida № 796.; Р. multocida № 116 Р. multocida № 216 Р. multocida Ф Р. multocida Д.

Вакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.

ДОЗИРОВКА И ПРИМЕНЕНИЕ

Вакцина предназначена для профилактики пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов.

Иммунизации подлежит поголовье крупного рогатого скота и буйволов в возрасте от одного месяца и старше.

Стельных животных вакцинируют независимо от срока беременности. Вакцинации подвергают вновь вводимых животных, а также подрастающий молодняк, достигший месячного возраста.

Животных вакцинируют двукратно с интервалом 12-15 дней внутримышечно, в область крупа, в дозах соответственно 5 см3 и 1 О см3 • По истечении 6 месяцев все вакцинированные животные подлежат однократной ревакцинации в дозе 1 О см3.

Перед применением флаконы с вакциной тщательно встряхивают и подогревают на водяной бане, до температуры 36-37°С. При проведении вакцинации соблюдают правила асептики и антисептики. Используют стерильные шприцы и иглы, место инъекции дезинфицируют 70° спиртом или другим дезинфицирующим раствором.

ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ

Симптомов проявления пастереллеза или других патологических при знаков при передозировке вакцины не установлено.

Особенностей поствакцинальной реакции не установлено.

Следует избегать нарушений схемы проведения вакцинации, поскольку это может привести к снижению эффективности иммунопрофилактики пастереллеза. В случае пропуска очередного введения вакцины необходимо провести иммунизацию как можно скорее.

Запрещается применение вакцины одновременно с другими иммунобиологическими препаратами.

Молоко и продукты убоя от вакцинированных животных используют без ограничений.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ

Запрещается вакцинировать животных, имеющих повышенную температуру тела, ослабленных, истощенных и больных.

ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ

При применении вакцины в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений и осложнений, как правило, не отмечается. У вакцинированных животных на месте введения вакцины через 12-24 часа может появиться небольшая отечность, которая исчезает через несколько дней.

СРОК ГОДНОСТИ И ХРАНЕНИЯ

Срок годности вакцины 18 месяцев с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности вакцина к применению не пригодна. Вакцину хранят . и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2° С до 8° С.

УПАКОВКА

Вакцина расфасована по 100 (20 доз) мл во флаконы, соответствующей вместимости, укупоренные резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками. Флаконы с вакциной упакованы в коробки. Каждую коробку с вакциной снабжают инструкцией по применению.

Вакцина против пастереллеза КРС, буйволов и овец, эмульгированная 7л/кор

Описание

ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ Иммунизации подлежит поголовье в возрасте от 1 месяца и старше. Прививки проводят через каждые 7-8 месяцев. Перед вакцинацией проводят тщательный клинический осмотр всего поголовья. Животных, подозрительных по заболеванию пастереллёзом, выделяют из стада и вводят им противопастереллёзную сыворотку. Через 10-14 дней после введения сыворотки, при отсутствии у животных признаков заболевания пастереллёзом, их вакцинируют. Стельных животных вакцинируют независимо от срока беременности. Вакцинации подвергают вновь приобретаемых животных, а также подрастающий молодняк, достигший месячного возраста. Одновременно с вакцинацией животных проводят ветеринарно-санитарные мероприятия, направленные на оздоровление хозяйства. Животных вакцинируют независимо от возраста и веса двукратно с интервалом 12-15 дней внутримышечно , в область крупа, в дозах соответственно 5 и 10 мл. Не прививают животных, имеющих повышенную температуру тела, ослабленных, истощённых. Не допускается проведение прививок во время вспышки пастереллёза в хозяйстве и не ранее 15 дней со времени последнего случая заболевания животного пастереллёзом или падежа от него, а также при наличии в хозяйстве других инфекционных заболеваний. После проведения вакцинации не допускается резкое охлаждение или перегревание животных. Вакцина безвредна, лечебным действием не обладает. У вакцинированных животных на месте введения вакцины через 12-24 часов может появиться незначительная отёчность, которая исчезает через несколько дней. Вакцина вызывает индукцию иммунного ответа у животных на 10-20 день после второго введения продолжительностью не менее 8 месяцев. Молоко и продукты убоя от вакцинированных животных используются без ограничений. ФАСОВКА Выпускается во флаконах по 20 см? (4 дозы), 50 см? (10 доз), 100 см? (20 доз) и 200 см? (40 доз). УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ Хранится и транспортируется в сухом темном месте при температуре от 2 °С до 8 °С.

Пастереллез крупного рогатого скота: симптомы и лечение

Как развивается пастереллез крупного рогатого скота. Симптоматика разных форм заболевания. Диагностика, лечение опасной болезни. Профилактика

Что собой представляет заболевание?

Пастереллез КРС является следствием развития в организме патогенных бактерий. При прогрессировании данной болезни у пораженного животного развивается заражение крови, пневмония (включая гнойную), эндометрит, конъюнктивит и ряд других вторичных болезней и осложнений.

Наиболее восприимчивыми к инфекции являются коровы, кролики и домашняя птица. Также заболевание передается многим видам диких животных. Оно распространено практически во всех странах мира. В России наибольшее количество случаев заражения регистрируется в центральных регионах страны.

Общие сведения

Пастереллез (геморрагическая септицемия) относится к инфекциям с контактным механизмом передачи. Впервые нозология была описана в 1878 году. Бактериальная природа возбудителя была установлена в 1880 году Луи Пастером, в честь которого и была названа данная инфекционная патология. Пастереллез распространен повсеместно, четкой сезонности у людей не имеет, заболеваемость преимущественно спорадическая. Группами риска считаются сельскохозяйственные работники, ветеринары, лица пожилого возраста, больные сахарным диабетом, циррозом печени, ХОБЛ, ВИЧ-инфекцией в стадии СПИДа, патологиями сердечно-сосудистой системы и злокачественными новообразованиями, а также пациенты, проходящие гемодиализ. Считается, что пастереллезу наиболее подвержены люди в возрасте 10-19 лет, заболевание чаще регистрируется среди женщин.

Пастереллез

Состав

Сыворотка получена из крови волов, гипериммунизированных инактивированными штаммами возбудителей сальмонеллеза, эшерихиоза и пастереллеза, авирулентными штаммами вирусов парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита.

Причины

Возбудителем инфекции является бактерия Pasteurella multocida, продуцирующая экзотоксин. Пастереллы устойчивы в окружающей среде, до 2-3 недель сохраняются в воде и навозе, до 4-12 месяцев – в трупах животных и замороженном мясе. Погибают при воздействии солнечного света, кипячении, обработке дезинфицирующими средствами. Источниками инфекции становятся бактерионосители и больные сельскохозяйственные, домашние животные и птицы. Чаще всего пастереллез регистрируется у крупного рогатого скота, кур, кроликов и буйволов, при этом пастереллоносительство отмечается у 80% кошек, 70% коров, 50% овец и кроликов, 45% овец, 35% куриц в неблагополучных хозяйствах. Пастереллы выделяются с калом, мочой, носовым отделяемым, кровью, молоком животного, заражение человека обычно происходит при укусах и оцарапывании кожи кошками и собаками. Описаны воздушно-капельный и трансплацентарный пути инфицирования; предполагается возможность трансмиссивной передачи пастереллеза при укусах зараженных слепней.

Форма выпуска, состав и упаковка

Суспензия белого цвета, иногда со светло-желтым оттенком, вязкой консистенции, непрозрачная; при длительном хранении допускается незначительное отслоение на 0.5-1 см минерального масла под эмульсией; при тщательном встряхивании вакцина приобретает однородную гомогенную структуру.

1 мл
инактивированная формалином концентрированная культура пастерелл крупного рогатого скота, буйволов и овец

Вспомогательные вещества: водно-масляная эмульсия, эмульгатор.

Расфасована по 50, 100 или 200 мл во флаконы по ТУ 64-2-10. Флаконы герметично укупоривают резиновыми пробками по ТУ 38-006-108 и обкатывают алюминиевыми колпачками по ОСТ 64-009. На каждом флаконе должна быть этикетка с указанием предприятия-изготовителя и его товарного знака, наименования препарата, количества его во флаконе (мл) и доз для животных, номера серии, номера контроля, срока годности, способа применения, даты изготовления (месяц, год), условий хранения и обозначения ТУ (СТО).

Этикетированные флаконы с вакциной обертывают бумагой или алигнином ГОСТ12923, ав холодное время года серой ватой или другими теплоизолирующими материалами и упаковывают в коробки, обеспечивающие неподвижность флаконов с препаратами при транспортировании.
Маркировка, характеризующая данные об упакованной продукции должна содержать следующие данные: наменование организации-производителя, наименование биопрепарата, его количество в коробке, номер серии, номер контроля, дата изготовления, срок годности, условия хранения и обозначения ТУ (СТО) и надписи “Для животных”. Внутрь каждой коробки вкладывают инструкцию по применению вакцины.

Свидетельство о регистрации № ПВР-1-2.5/01417 от 11.12.06

Фармакологические (биологические) свойства и эффекты

Вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота, буйволов и овец.

Вакцина вызывает формирование специфического иммунитета в организме вакцинированных животных. Иммунитет создается к 10-15 суткам после вакцинации и сохраняется до 12 месяцев.

Вакцина иммуногенна, безвредна и ареактогенна.

Применение

Иммунизации подвергают животных старше месяца в неблагополучной по пастереллезу крс местности. Прививка обеспечивает формирование напряженного иммунитета на 240 суток. Суспензию вводят внутримышечно в область крупа. Ревакцинируют через 2 недели. Стельность и лактация не являются препятствием против иммунизации.

Диагностика

Поскольку болезнь имеет инфекционный характер и часто приводит к смертельному исходу, ее своевременная диагностика является первостепенной задачей. Выявление пастереллеза в организме рогатого скота проводится на основе клинических признаков, лабораторного и патологоанатомического исследования.

Печень коровы

Для лабораторного изучения используют пробы с павших или намеренно убитых животных. Для этой цели подходят частицы печени, легкого, селезенки, лимфатических узлов. Материалы берутся не позже 5 часов с момента гибели скота. Выделенную из полученной пробы культуру помещают в питательную среду и определяют ее принадлежность к роду пастерелл.

При патологоанатомических исследованиях положительный результат анализа устанавливается, если выявлены следующие изменения в органах и системах:

  • многочисленные кровоизлияния в легких, кишечнике, дыхательных путях, а также на перикарде и эпикарде сердца;
  • большие скопления крови и лимфы, которые образуются в клетчатке под кожей;
  • увеличенные в размерах лимфатические узлы;
  • отдельные отделы пищеварительного тракта и кишечника значительно воспалены и отличаются припухлостью.

Внимание! Комплексный анализ проводить крайне важно для того, чтобы отличить пастереллез от пироплазмидоза, сибирской язвы и других болезней, схожих по клиническим проявлениям. Правильное диагностирование такого заболевания является основой его удачного лечения.

Лечение

При выявлении характерных признаков болезни животное сразу же изолируют от остального стада. В качестве карантина используют теплое, сухое помещение с качественно оборудованной вентиляцией. При этом корову переводят на особый рацион, тщательно сбалансированный по витаминному, минеральному составу и питательным веществам.

Весь дальнейший курс предполагает исключительно медикаментозное лечение. Оно предполагает симптоматическую и специфическую направленность. В первом случае предполагается улучшение работы органов и систем организма, пострадавших от заболевания. С этой целью применяют:

  • обезболивающие препараты;
  • жаропонижающие средства;
  • мочегонные составы;
  • лекарства, восстанавливающие нормальную функцию пищеварительного тракта.

Параллельно с лечением симптомов также проводится борьба с развивающейся инфекцией. Для этого может быть использована сыворотка против пастереллеза. Но, стоит отметить, что применяется она лишь на первых стадиях развития острой формы болезни. При дальнейшем прогрессировании заболевания она становиться бесполезной. Вводится вакцина против пастереллеза крс в вену или внутримышечно в дозировках, которые определяет ветеринар.

Вакцина против пастереллеза

В дополнение к основному лечению также приписывают ряд антибиотиков, которые помогают справиться с воспалением и ликвидировать развивающихся пастерелл. К основным препаратам такого плана принадлежат:

  • левомецитин;
  • биомицин;
  • стрептомицин.

Хороший эффект дают различные сульфаниламидные препараты. Для поддержки организма скоту могут быть назначены внутривенные инъекции глюкозы. Общий курс лечения длится до полного выздоровления животного и в каждом конкретном случае определяется индивидуально.

Побочные действия

В очень редких случаях при повышенной индивидуальной чувствительности у животных возможны аллергические реакции.

Вакцина против пастереллеза

Вакцина, которая так и называется «Инактивированная эмульгированная вакцина против пастереллёза крупного рогатого скота», применяется в качестве профилактического средства и больше используется в неблагополучных хозяйствах, где есть риск распространения заболевания. Эта однородная эмульсия вводится нетельным и стельным коровам 1 раз примерно за 45–25 дней до отёла, а телятам — на 20–25-й день жизни или двукратно: в 8–12 дней, с повторной ревакцинацией на 15–21-й день жизни (если речь идёт о поголовье, полученном от невакцинированных родителей). Введение вакцины выполняется внутримышечно, на участке средней трети шеи. Конкретную дозировку препарата должен определять ветеринарный врач.

Профилактика

Более эффективной мерой борьбы с пастереллезом является качественная профилактическая деятельность:

  • обеспечение должных санитарных условий содержания скота на крупных фермах и в подсобных хозяйствах;
  • правильное сбалансирование кормление животных. Сюда также входит постоянный контроль над качеством кормов;
  • приобретение новых голов в стадо исключительно из проверенных и благополучных по различным инфекционным заболеваниям хозяйств;
  • карантинирование новоприобретенных животных на срок не менее 30 дней для проведения обследований и вакинации;
  • обеспечение персонала, работающего на ферме, комплектом рабочей одежды, которой он будет пользоваться исключительно в пределах своего рабочего места;
  • периодические дезинфекции животноводческих помещений, кормушек и инвентаря растворами едкого натра, гашеной извести или креолина.

Для предотвращения массового инфицирования всего поголовья стада при появлении подозрений на наличие пастереллеза у животного, его сразу же изолируют в отдельное помещение. При этом заводчик обязан как можно быстрее обратиться к квалифицированному ветеринару.

Внимание! Если в хозяйстве были зарегистрированы случаи заболевания, стадо в нем доукомплектовывается исключительно животными, которые прошли вакцинацию.

Условия хранения

Хранить в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей и в недоступном для детей и животных месте. Отдельно от пищевых продуктов и кормов при температуре от 2 до 10ºС.

Срок годности — 2 года.

( 1 оценка, среднее 5 из 5 )

✅ Пастереллез крс вакцина инструкция.

Вакцина инактивированная эмульгированная против пастереллёза крупного рогатого скота

Состав:

Вакцина представляет собой смесь инактивированных культур штамма Pasteurella multocida 796, 5264, смешанные с масляным адъювантом (Montanide ISA 70 или 206).

В 1 мл вакцины содержится 6 млрд. микробных клеток пастерелл.

Показания к применению:

Препарат вызывает выработку специфических антител у крупного рогатого скота против возбудителя пастереллеза.

Иммунитет у животных развивается к 10-15 суткам после вакцинации и сохраняется не менее двенадцати месяцев.

Форма выпуска:

Стеклянные флаконы, укупоренные резиновыми пробками и обкатанные металлическими колпачками по 50, 100, 200 мл.

Условия хранения:

Хранить в сухом темном месте при температуре от плюс 2°С до плюс 15°С.

Производитель:

ОАО «БелВитунифарм» 211309, д. Должа, ул. Советская д. 26А, Витебский район, Республика Беларусь.

Способ применения и дозы:

Вакциной иммунизируют клинически здоровых животных. Слабых и больных особей вакцинируют только после соответствующего лечения.

Перед применением и в процессе применения флаконы с вакциной тщательно встряхивают и подогревают на водяной бане до температуры 35-37 °С.

Иммунизации подлежит поголовье крупного рогатого скота внутримышечно. Телятам вакцину вводят двукратно с интервалом между первичным и повторным введением 2-3 недели, начиная с 20-25 дня жизни (срок введения вакцины определяет ветеринарный врач, учитывая напряженность колострального иммунитета и эпизоотологической особенности протекания заболевания в хозяйстве). Доза препарата для телят до 18 месячного возраста 1мл на введение. Схема вакцинации животных старше 18 месячного возраста: двукратно с интервалом между первичным и повторным введением 2-3 недели. Срок иммунизации следует рассчитать так, чтобы повторное введение было проведено не позднее 3 недель до предполагаемых родов.

Ревакцинация — один раз в году однократно. Доза препарата 2мл на введение.

Препарат используют в день вскрытия флакона. Остатки обеззараживают кипячением.

Период выведения (каренция):

Инструкция для скачивания

Вакцина эмульгированная против пастереллеза КРС, буйволов и овец

ОПИСАНИЕ

Вакцина представляет собой инактивированную формалином концентрированную культуру пастерелл крупного рогатого скота, буйволов и овец, заключенную с помощью эмульгатора в водно-масляную эмульсию. По внешнему виду представляет собой суспензию белого цвета, иногда светло-желтого оттенка, вязкой консистенции, непрозрачная. При тщательном встряхивании вакцина приобретает однородную гомогенную структуру.

СОСТАВ

Вакцина инактивированная формалином концентрированная культура пастерелл крупного рогатого скота, буйволов и овец . Вспомогательные вещества: водно-масляная эмульсия, эмульгатор.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

Вакцина вызывает формирование специфического иммунитета в организме вакцинированных животных. Иммунитет создается к 10-15 суткам после вакцинации и сохраняется до 12 месяцев. Вакцина иммуногенна, безвредна и ареактогенна.

ПОКАЗАНИЯ

Вакцину применяют для профилактических и вынужденных прививок в неблагополучных по пастереллезу хозяйствах всего поголовья крупного, мелкого рогатого скота и буйволов, начиная с трехмесячного возраста.

ПРИМЕНЕНИЕ

В стационарно неблагополучных по пастереллезу пунктах подрастающий молодняк животных прививают при достижении трехмесячного возраста. Привитых животных ревакцинируют через 12 месяцев. При проведении вакцинации соблюдают общепринятые правила асептики и антисептики. Шприцы и иглы стерилизуют кипячением в течение 10-15 мин. При введении вакцины рекомендуется использовать укороченные инъекционные иглы достаточно большого диаметра.

При вспышке пастереллеза животным вводят противопастереллезную сыворотку. В дальнейшем, но не ранее, чем через 10 дней после введения сыворотки, этих животных прививают вакциной против пастереллеза.

Перед вакцинацией проводят клинический осмотр животных. Вакцинируют только здоровых животных. Так же перед и после вакцинации животных следует оберегать от сильного переохлаждения и больших утомительных перегонов. Без крайней необходимости не рекомендуется производить прививки в жаркое (+28°С и выше) летнее время. Кормление должно быть полноценным.

Перед применением флаконы с вакциной тщательно встряхивают, а в холодное время года предварительно подогревают в водяной бане до 35-37°С.

На месте инъекции шерсть предварительно выстригают, кожу дезинфицируют спиртом или 0.5-1.0%-ным раствором карболовой кислоты.

Вид животного Способ применения Дозировка
Крупный рогатый скот и буйволы вакцинацию проводят однократно внутримышечно в области средней трети шеи вводят по 3см³ — по 1,5см³ с обеих сторон шеи
Овцы вводят по 2см³ с внутренней стороны бедра

После удаления иглы место инъекции следует слегка помассировать. За привитыми животными ведут клиническое наблюдение в течение 10 дней.

При длительном хранении допускается незначительное отслоение на 0.5-1 см минерального масла под эмульсией. При тщательном встряхивании вакцина приобретает однородную гомогенную структуру.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ

Не разрешается проводить вакцинацию при наличии в хозяйстве других острых инфекционных заболеваний.

При применении вакцины не следует применять антибактериальные препараты или препараты, оказывающие супрессивное действие на иммунную систему животных (иммунодепрессанты).

ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ

Вакцинированных животных можно вывозить в другие хозяйства через 15 суток после вакцинации, а мясо и молоко используют без ограничений.

После вакцинации у части привитых животных в первые 24-48 часов может наблюдаться незначительное угнетение, повышение температуры тела на 0.5-1.0°С и местная реакция в виде незначительной припухлости.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

В случае попадания вакцины на открытые участки тела или слизистые оболочки глаз, рта, носа, а также после окончания работы руки и другие открытые участки тела моют водой с мылом.

ХРАНЕНИЕ

Хранить вакцину в сухом, темном, недоступном для животных и детей месте при температуре от 2°С до 8°С. Срок годности при соблюдении условий хранения — 12 месяцев.

ФАСОВКА

Вакцину выпускают расфасованной по 100мл в стеклянные флаконы.

Пастереллез крс вакцина инструкция.

  • Характеристика:

Вакцина предназначена для специфической профилактики пастереллеза крупного рогатого скота в неблагополучных и угрожаемых по респираторной патологии скотоводческих хозяйствах.

Описание

По внешнему виду вакцина представляет собой однородную эмульсию от белого до кремового цвета слегка вязкой консистенции. При длительном хранении допускается незначительное отслаивание минерального масла над не расслоившейся однородной эмульсией. При тщательном встряхивании вакцина приобретает однородную структуру и устойчиво удерживается на стенках флакона. Вакцина изготовлена из производственных штаммов Pasteurella multocida № 1231 (серогруппа А), Mannheimia (Pasteurella) haemolytica инактивированных формалином до концентрации в культуре 0,3% и заключенных в водно-масляную эмульсию. В 1 см3 вакцины содержится 3 млрд микробных тел инактивированных штаммов Pasteurella multocida № 1231 и Manncheimia (Pasteurella) haemolytica.

Способ вакцинации

Стельных коров и нетелей вакцинируют однократно за 45-25 суток до отела, внутримышечно, в область средней трети шеи, в дозе 2,0 см3. Телят, полученных от вакцинированных коров, иммунизируют однократно на 20-25 день жизни внутримышечно в область средней трети шеи в объеме 1,0 см3. Телят, полученных от невакцинированных коров, иммунизируют двукратно: первично на 8-12 день жизни и повторно на 15-21 день жизни внутримышечно, в область средней трети шеи, в объеме 1,0 см3. Телят, завезенных из других мест для формирования ферм (комплексов), вакцинируют в период карантинирования двукратно в объеме 1,0 см3 с интервалом 20-30 дней. Ревакцинацию проводят через 6 месяцев путем однократной иммунизации внутримышечно, в область средней трети шеи, в объеме 1,0 см3.

Иммунный ответ

Вакцина вызывает выработку специфических антител против Manncheimia (Pasteurella) haemolytica и Pasteurella multocida № 1231 у иммунизированных животных. Колостральный иммунитет у молодняка развивается после приема молозива и сохраняется не менее 20 дней. Иммунитет у вакцинированных коров и телят формируется на 14 день после вакцинации и сохраняется в течение 6 месяцев. Вакцина безвредна, ареактогенна, лечебными свойствами не обладает.

Форма выпуска

Вакцина расфасована по 50, 100, 200 см3 во флаконы соответствующей вместимости.

Условия хранения

Вакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2 °С до 15 °С. Срок годности — 18 месяцев с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования.

Источники:

http://konsulagro.by/catalog/vakczina-inaktivirovannaya-emulgirovannaya-protiv-pasterellyoza-krupnogo-rogatogo-skota/
http://nt-kursk.ru/katalog/vakcina-emulgirovannaya-protiv-pasterelleza-krs-buyvolov-i-ovec
http://www.armbio.info/catalog/item105.html

Контракт на ВАКЦИНУ И АНАТОКСИНЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ В ВЕТЕРИНАРИИ. НАБОР ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СРЕДЫ ЛЕВЕНШТЕЙНА - ЙЕНСЕНА

1 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор для приготовления среды Левенштейна - Йенсена 2423840 Набор 403,85 ₽ 40 16 154,00 ₽
2 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор №1 сыворотки сальмонеллезные О-комплексные агглютинирующие 2423840 Набор 11 176,00 ₽ 2 22 352,00 ₽
3 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Сыворотки «О» коли агглютинирующие 2423840 Набор 9 614,00 ₽ 2 19 228,00 ₽
4 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Сыворотка антитоксическая Клостридиум перфрингенс типов А, С, Д диагностическая 2423840 Набор 3 811,00 ₽ 2 7 622,00 ₽
5 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор реагентов «Плазма кроличья цитратная сухая» амп.1 мл. №10 2423840 Набор 981,50 ₽ 4 3 926,00 ₽
6 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор для выявления антигенов вирусов трансмиссивного гастроэнтерита (ТГС) и ротавируса свиней (РВС) методом ИФА 2423840 Набор 6 678,00 ₽ 2 13 356,00 ₽
7 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор компонентов для диагностики вирусной диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота методом ИФА 2423840 Набор 9 177,00 ₽ 2 18 354,00 ₽
8 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор реагентов «Версена раствор для культур клеток» 2423840 Флакон 239,55 ₽ 20 4 791,00 ₽
9 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор реагентов «Трипсина раствор для культур клеток 2423840 Флакон 383,70 ₽ 10 3 837,00 ₽
10 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Вакцина против некробактериоза животных инактивированная 2423840 Тысяча доз 16 477,60 ₽ 30 494 328,00 ₽
11 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина эмульгированная против пастереллеза крс, буйволов, и овец 2423840 Литр; Кубический дециметр 1 270,00 ₽ 25 31 750,00 ₽
12 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа -3, вирусной диареи, и пастереллеза телят 2423840 Тысяча доз 28 750,00 ₽ 30 862 500,00 ₽
13 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина против вирусной гемораррагической болезни кроликов жидкая 2423840 Тысяча доз 2 880,00 ₽ 20 57 600,00 ₽
14 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина формолквасцовая против сальмонеллеза телят . 2423840 Тысяча доз 1 312,00 ₽ 10 13 120,00 ₽
15 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Набор №2 сыворотки сальмонеллезные монорецепторные О и Н агглютинирующие . 2423840 Набор 11 176,00 ₽ 2 22 352,00 ₽
16 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Антиген паратуберкулезный для РСК . 2423840 Тысяча доз 4 439,25 ₽ 4 17 757,00 ₽
17 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Набор диагностикумов пара гриппа-3 крупного рогатого скота . 2423840 Набор 17 120,50 ₽ 4 68 482,00 ₽
18 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринари.Набор для определения антител к Mycoplasma gallisepticum ИФА методом при тестированиисывороток в одном разведении и. 2423840 Набор 6 370,00 ₽ 3 19 110,00 ₽
19 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор реагентов «Раствор Хенкса с индикатором или без индикатора для культур клеток» . 2423840 Флакон 239,53 ₽ 40 9 581,00 ₽
20 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор для серологической диагностики лейкоза КРС . 2423840 Набор 9 463,50 ₽ 40 378 540,00 ₽
21 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Поливалентный анатоксин против клостридиозов животных . 2423840 Тысяча доз 5 650,00 ₽ 21 118 650,00 ₽
22 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина против ньюкасловской болезни птиц «Владивак-«Ла-Сота» 2423840 Тысяча доз 44,46 ₽ 600 26 678,00 ₽
23 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Вакцина против рожи свиней из штамма ВР-2 живая сухая 2423840 Тысяча доз 825,51 ₽ 127 104 840,00 ₽
24 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Клозальбен 10 . 2423840 Килограмм 575,08 ₽ 831 477 894,00 ₽
25 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Сыворотка лошадиная нормальная для культивирования микроорганизмов жидкая, 100 мл. 2423840 Флакон 284,40 ₽ 20 5 688,00 ₽
26 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Сыворотка паратуберкулезная для РСК-Serum paratuberculosis 2423840 Тысяча доз 4 372,00 ₽ 2 8 744,00 ₽
27 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Вакцина против колибактериоза, сальмонеллеза. клебсиелеза и протейной инфекции СХЖ ассоциированная инактивированная (ОКЗ) 2423840 Литр; Кубический дециметр 1 432,00 ₽ 20 28 640,00 ₽
28 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Тест-набор питательных сред для ускоренного определения лекарственной чувствительности и первичной идентификации микобактерий туберкулеза. 2423840 Набор 704,67 ₽ 3 2 114,00 ₽
29 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор для определения антител к вирусу инфекционного бронхита кур иммуноферментным методом при тестировании в одном разведении 2423840 Набор 2 189,33 ₽ 6 13 136,00 ₽
30 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Питательная среда с гидролизатом лактальбумина(0,5%)в растворе Хенкса для культур клеток 2423840 Флакон 321,03 ₽ 30 9 631,00 ₽
31 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии. Набор реагентов «Питательная среда 199 с индикатором» 2423840 Флакон 383,73 ₽ 30 11 512,00 ₽
32 Вакцины и анатоксины, применяемые в ветеринарии.Набор реагентов «Питательная среда ИГЛА жидкая для культур клеток в комплекте с Л - глутамином» 2423840 Флакон 321,03 ₽ 30 9 631,00 ₽

Разработка и внедрение универсальной технологии изготовления, контроля и применения вакцин против пастереллеза животных

" #

"с г Я1ИНИСТЕРСГВО сельского хозяйстл и продовольствия рф

. "федеральное государственное унитарное предприятие v

"ставропольская биофабрика" всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов

На правах рукописи

ЗАЕРКО ВИКТОР ИВАНОВИЧ

РАЗРАБОТКА И ВНЕДРЕНИЕ УНИВЕРСАЛЬНОЙ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ, КОНТРОЛЯ II ПРИМЕНЕНИЯ ВАКЦИН ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ

16.00.03 - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

ДИССЕРТАЦИЯ

в форме научного доклада на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Москва - 2000

Работа выполнена на ФГУП "Ставропольская биофабрика", Всероссийском государственном научно-исследовательском инсти контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препарато) хозяйствах региона Северного Кавказа и сопредельных областей.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, Заслуженный деятель науки Заслуженный ветеринарный врач РФ, профессор Ипатенко Н.ооо г.

заседании диссертационного совета Д 120.85.01. при Всероссий государственном научно-исследовательском институте ' конт стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов Минсельхозг России (123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, д. 5, ВГНКИ).

С диссертацией в виде научного доклада можно ознакомить! библиотеке. Всероссийского государственного научно-исследователы института контроля, стандартизации и сертификации ветерина •препаратов Минсельхозпрода России.

Диссертация в виде научного доклада разослана У г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат ветеринарных нау Ю.А. Козырев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1 .Актуальность проблемы

Пастереллез - контагиозная инфекционная болезнь домашних и диких животных, Характеризующаяся при остром течении признаками септицемии, крупозным воспалением и отеком легких, плевритом, а при хроническом течении гнойно-некротической пневмонией, артритом, маститом, керато-конъюнктивитом, эндометритом и иногда энтеритом.

Пастереллез (холера) птиц характеризуется септицемией, поражением суставов и сережек.

Возбудитель пастереллеза относится к семейству Pasteurellaceae, роду Pasteurella. Честь открытия возбудителя принадлежит Туссену (1879) и Пастеру (1880).

Род PasteuTella делится на 6 видов: Р. multocida, Р. haemolytica, Р. pneumo-tropica, Р. urea, Р. aerogenes, Р. gallinarum.

Р. multocida - возбудитель геморрагической септицемии животных, и так называемых "легочных пастереллезов", вторичных инфекций, осложняющих течение болезней вирусной и микоплазменной этиологии.

Р. haemolytica вызывает пневмонию у крупного рогатого скота и овец и в отличие от Р. multocida растет на среде Мак-Конки, не образует индол и уреазу, является.одним из возбудителей фибринозной плевропневмонии у крупного рогатого скота, овец и коз, мастита у овец, септицемии у ягнят.

»

Пастереллы других видов практически не патогенны для сельскохо-!яйственных животных.

Морфологические, культуральные и патогенные свойства пастерелл хо->ошо изучены. Можно считать, что пастереллы убиквитарны и паразитируют на кивотных многих видов; взаимоотношения паразита и хозяина сглажены, о чем :видетельствует широко распространенно? бессимптомное пастереллоноси-

тельство, при котором возбудитель паразитирует в организме, не вызывая клинических проявлений. Однако, в ряде случаев он вызывает энзоотии, охватывающие большое число животных, особенно у кур, или выступает как возбудитель вторичной инфекции.

Вирулентность пастерелл наиболее выражена для того вида животных, от которых они выделены.

Широкая распространенность, высокая заболеваемость и смертность делают необходимым проведение рпецифической профилактики пастереллеза.

Пастер на примере Р. гпикос1с1а впервые обосновал возможность направленной аттенуации патогенных микробов вообще и создал живую вакцину против холеры кур.

Созданию высокоиммуногенных вакцин препятствует недостаточная изученность антигенной структуры пастерелл. В отличие от микробов других видов, четко разделенных на подвиды, серогруппы, серовары, биовары и т.д., у пастерелл до сих пор нет общепризнанной номенклатуры, основанной на антигенной структуре.

Согласно Руководства по стандартам Международного эпизоотического бюро (1996), Р. пш1и)С1<1а по Картеру имеет 5 (А, В, Д, Е, И) капсульных (К), по Намиока - 12 (1-12) и по Хедлестоуну 16 (1-16) соматических сероваров. Р. 1шепю1уиса подразделяется на 2 биотипа (А, Т) и 16 сероваров.

Серовариантную принадлежность пастерелл определяют по капсульному антигену в реакции агглютинации (РА), РИГА, РИЭФ, а по соматическому - в РА и реакции иммунофлуоресценции (РИФ) в агаровом геле.

Кроме того, серовар Д образует в растворе акрифлавина крупнохлопчатый не разбивающийся флокулят. Рост штаммов серовара А подавляется гиалурони-дазой, и после чего и они растут медленнее других.

В настоящее время применяют две системы идентификации пастерелл: На-миока-Картера и Картера-Хедлестоуна.

Для профилактики пастереллеза животных применяют 13 инактивирован-ных и две живые вакцины из штаммов АВ и К (Краснодарская НИВС).

Общими недостатками в производстве вакцин против пастереллеза являются следующие:

- отсутствие стандартизованной питательной среды и отработанной технологии изготовления вакцин;

- недостаточная изученность антигенной структуры эпизоотических и вакцинных штаммов;

- отсутствие методов контроля, позволяющих дифференцировать достаточно иммуногенные серии вакцин от слабоиммуногенных.

Кроме того, для большинства вакцин схемы вакцинации против пастереллеза животных различных видов неудовлетворительные.

1.2. Цель исследований

Разработать биопогические основы универсальной технологии изготовления, контроля и применения некоторых вакцин против пастереллеза животных.

1.3. Основные задачи исследований

1. Разработать уни.. реальную питательную среду для культивирования пастерелл с использованием непищевого сырья.

2. Изучить свойства штаммов пастерелл, используемых для изготовления вакцин.

3. Изучить динамику роста популяции пастерелл на предложенной среде, определить оптимальные сроки культивирования, аэрации, перемешивания, рН среды и другие технологические параметры.

4. Разработать способ изготовления, контроля и применения следующих вакцин:

4.1. жчеок против пастереллеза кур;

4.2. инактивированной лиофюшзированной против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов;

4.3. ассоциированной против сальмонеллеза, пастереллеза и стрепто-коккоза поросят;

4.4. против пастереллеза и стрептококкоза нутрий;

5. Усовершенствовать способ изготовления, контроль и применение вакцин.

5.1. против пастереллеза птиц инактивированной сорбированной;'

5.2. против пастереллеза и эшерихиоза птиц;

5.3. против пастереллеза овец и свиней преципитированной;

5.4. против пастереллеза кроликов;

5.5. против пастереллеза норок эмульгированной;

5.6. против пастереллеза нутрий эмульгированной.

1.4. Научная новизна

Получен супрессорный ревертант штамма Р. multocida серовара А, несущий мутации в гене супрессоре и стрептомициновом локусе и использован для типов.теиия вакцины. Обоснована возможность получения аттенуированных ппаммов других видов микробов этим же методом.

Установлены индифферентные взаимоотношения in vitro и in vivo между aimirainuii Р. multocida сероваров А, В и Д, серовары S.clioleraesuis и S t\ plmiuiriuni. Slreptococcus серогрупп С и R. На этой основе разработана технология приготовления вакцины против пастереллеза, сальмонеллеза и стрептококки »а.

Раiработай способ изготовления сухой вакцины против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов с 25%-ным содержанием ГОА. а также методы контроля и применения.

Разработаны технологические условия приготовления ассоциированной вакцины против пастереллеза и стрептококкоза нутрий.

Установлена возможность добавления гидролизатов из куриных эмбрионов и кровяных сгустков в состав среды для культивирования пастерелл.

Дана оценка активности вакцины против пастереллеза птиц из капсульно-го компонента по содержанию белка в активной вакцине, количество белка должно быть не менее 1,2 мг/ %.

Обоснована целесообразность использования в качестве адъюванта 6%-ной гидроокиси алюминия вместо алюмокалиевых квасцов в преципитиро-ванной вакцине против пастереллеза овец, свиней и агара - в вакцине для кроликов. Научная новизна разработок подтверждена тремя патентами: № 161420] от24.03.1989г.; № 2030915 от 31.10.1990г.; № 2103375 от 27.01.1998г.

1.5. Практическая значимость

Предложена среда для культивирования пастерелл, в которой до 65% составляет непищевое сырье.

Разработаны и применяются в практике:- живая-сухая вакцина против пастереллеза кур, ассоциированная вакцина против сальмонеллеза, пастереллеза и стрептококкоза поросят, лиофшшзированная вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов, вакцина против пастереллеза и стрептококкоза нутрий.

' Усовершенствованы и также применяются в практике вакцины: против пастереллеза овец и свиней, кур, кроликов, нутрий и норок. На каждый препарат разработана нормативная документация.

1.6. Апробация

»

. Результаты исследований по диссертационной работе доложены и одобрены на следующих конференциях:

- Международной конференции по актуальным проблемам ветеринарии, г. Барнаул, 1995г.

- Всероссийской конференции РАН по современным достижениям биотехнологии, г. Ставрополь, 1996г.

б

- Научной конференции Краснодарской НИВС, 1996г.

- Всероссийской научно-производственной конференции, посвященной 100-летию биологической промышленности, г. Курск, 1996г.

- Международной конференции, посвященной 30-летию Прикаспийского Зонального НИВИ, г. Махачкала, 1997г.

- Научных конференция}» Ставропольской ГСХА, г.Ставрополь, 1997-99 г г.

- Региональной конференции по актуальным проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе, п. Персианов-ский, 1999г.

- Всероссийской конференции по современным достижениям биотехноло-1Ш! - вклад в науку и практику XXI века, г. Ставрополь, 1999г.

1.7. Основные положения, выносимые на защиту Па защиту выносятся.

- способ получения и применения универсальной питательной среды для настерелл:

- способ получения вакцины для кур из аттенуированного штамма пасте-рс.п.

- и и оюклсипс вакцины против пастереллеза, сальмонеллеза и стрептококком поросят (НПО;

- способ изготовления и применения лпофилизированной вакцины против пас1срс.1.'1с;а крупного рогатого скота и буйволов;

- способ получения вакцины против пастереллеза и стрептококкоза нутрий:

- усовершенствованы технологии изготовления и контроль вакцин против: пасгере.ие!« к\р инаюивированной сорбированной, против пастереллеза кроликов. н\ фий. норок.

II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.1.1. В работе использованы следующие штаммы пастерелл^ Аттенуированньщ штамм Р.о) для

белых мышей кроликов

1 2 3 4 5 6 7

1 1231 А поросенок 5-форма 16 220

2 712 . А курица Б-форма 8

3 396 А утка 8-форма 3

4 606 А гусь Б-форма 5

5 1718 А утка Б-форма 4

6 656 В свиноматка Э-форма 6

7 116 В теленок Б-форма 3

8 216 В буйволенок Б-форма 5

9 796 В бык 8-форма 6 9

10 877 В свинья 8-форма 6 7

11 . Ф В буйволенок Э-форма 6 14

12 д В буйволенок Б-форма 4 16

13 5 В кролик 8-форма 3 6 .

14 15 В кролик 8-форма 10 8

15 550 В кролик 8-форма • 12 4

16 ГНКИ71 В нутрия Б-форма 20 90

17 1015 в нутрия Б-форма 7 15

18 6012 В норка Б-форма 3 7

19 2394 В норка Б-форма 5 13

20 2395 в норка Б-форма 2 6

21 9 д свинья 8-форма 15 39

Из данных таблицы 1 следует, что пастереллы, выделенные от животных различных видов, находятся в биологически активном состоянии, вирулентность соответствует паспортным данным.

2.1.2. Оборудование: реакторы емкостью 250-2000 л, центрифуги марки Т23, Т24, СГ0100, ОТР-Ю1К, торсионные весы типа Г802, сушильные аппараты КС-30, LZ-45, ТГ-50, стерилизуемый паром лиофилизатор "Бенчмарк-5000" и др., сепаратор АСГ-ЗМ, бытовые и шкафные холодильники, микроскопы МБИ-3, МБИ-6 и другое оборудование.

2.1.3. Лабораторная посуда: баллоны, пипетки, пробирки, флаконы,- мат-ры, чашки Петри, шприцы, иглы инъекционные, стекла покровные и предметные и т.д.

2.1.4. В опытах использованы следующие виды животных: овцы-доноры 1-5-летнего возраста - 10, кролики породы шиншилла массой 2,5-3,0 кг - 1270, куры - 2000, крупный рогатый скот - 340, свиньи - 1580, беспородные белые мыши - 8700, морские свинки - 160, цыплята одномесячные - 650, нутрии - 152 и голуби - 564.

Производственные испытания препаратов выполнены на 11000 животных.

2.1.5. В работе использованы бактериологические, серологические и биохимические методы исследований.

2.1.6. Питательные среды:

- бульон Хсттингера по ГОСТ 29730-75;

- мясо-пептонный агар по ТУ 46-12-252-78;

- среда Китг-Тароцци;.

- полужидкий агар Хоттингера с 0,15 - 0,18 %-ным содержанием агар-

агара;

- агар Хотингера с 120-180 мг% аминного азота и 1,5-2,0%-ным содержанием агар-агара;

- среда Сабуро;

- среды Гисса с индикатором Андраде;

- среды, изготовленные из непищевого сырья.

С момента открытия Р. Коха плотной, питательной среды «разработано большое число новых вариантов и прописей изготовления питательных сред. Питательные среды, являясь основой работы микробиолога, определяют успех исследований и поэтому прописи и технологические процессы их изготовления постоянно должны быть объектом особого внимания.

Питательные среды должны содержать углерод, водород, кислород, азот, фосфор, калий, серу, магний, железо, которые находятся в удобоусвояемом для данного вида микробов соединении. Кроме азотистых, углеродистых и минеральных соединений, для роста и размножения бактерий необходимо присутствие факторов роста (витамины или коэнзимы).

Микробы при периодическом культивировании в жидкой среде, включая и пастерелл, проходят ряд фаз развития.

Фазы роста пастерелл

Таблица 2.

| Участок кривой

Фаза

Скорость роста

А Б В Г

д

Е

Лаг-фаза Ускоренная Экспоненциальная Замедленная

Максимально-стационарная Падения_

Нулевая

Увеличивающая

Постоянная

Снижающаяся

Нулевая

Отрицательная

В фазе В клетки находятся в стабильном состоянии. С постоянной скоростью синтезируется клеточный материал, масса которого нарастает экспоненциально. В этой фазе клетки характеризуются наибольшей полноценностью, включая и иммуногенность. Фаза продолжается до истощения тех или иных питательных веществ или накопления токсических продуктов. Часто причиной замедленного роста является недостаток кислорода. Когда концентрация микробных клеток достигает 4-5x10'7см\ кислорода обычно бывает недостаточно даже в аэрируемой культуре.

В фазе Д отмечается равновесие отмирающих и вновь вырастающих клеток. Количество жизнеспособных клеток при таком процессе остается постоянным.

Пастереллы культивируют в бульоне и на агаре Хоттингера с добавлением триптического перевара казеина.

Для изготовления пептона мы использовали в качестве источника растительного белка отходы маслоэкстрактивного производства - жмыхи плодов тунгового дерева и семян хлопчатника, животного белка - бараньи туши после извлечения головного мозг? при изготовлении антирабической вакцины.

Оказалось, что используемые отходы по своим физико-химическим свойствам близки перевару Хоттингера со средней и высокой степенью расщепления белка.

Установлено, что содержание аминокислот в большей степени зависит от способа гидролиза и в меньшей от вида белкового сырья.

Высушенные гидролизаты имели более низкое содержание общего азота и в ряде случаев повышенное содержание золы. Пептоны,-полученные частичным панкреатическим гидролизом (гепатопептон, пептон Б, тунго- и коттопептоны), содержали меньшее количество полипептидов - 60-65% при минимальной норме 70%. Однако, эти отклонения не влияли на рост тест-микробов.

Накопление бактериальной массы тест-микробов на средах с гидролиза-тами вторичного сырья свидетельствует о том, что они пригодны для роста бактериальных культур. Наиболее обильный рост получен в питательных средах на основе ФГМ и лакгопептона, что можно объяснить наличием в них углеводов и факторов роста, поскольку по составу азотсодержащих компонентов все Испытанные гидролизаты близки между собой.

Таким образом, гидролизаты различного непищевого сырья могут заменять гидролизаты мяса, д также коммерческий пептон при изготовлении бактериальных питательных сред.

Добавление непищевого сырья в состав питательных сред обеспечивало рост всех тест микробов (по А.П. Простякову, П.Я. Телишевской), а также.пастерелл.

Мы поставили задачу изучить влияние на рост пастерелл при промышленном культивировании добавления к среде аминопептида и сыворотки крови лошади или крупного рогатого скота, а также использовать для приготовления питательных сред непищевое сырье: гидролизаты из куриных эмбрионов, кровяных сгустков глобулина, фибрина и казеина.

. В таблице 3 приведено количество основных питательных субстратов в средах.

Таблица 3

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

№ Среды Общий азот, мг% Аминный азот, мг% Триптофан, мг% Пептон, %

1 Перевар Хоттингера (1984) 1000-1400 750-900 200-300 2,2

2 Перевар Хоттингера (1988). 800-1200 700-900 170-200 1,5

3 Гидролизат куриных эмбрионов 1000-1125 550-600 100 2,5-3,0

4 Гидролизат из кровяных сгуст- 1100-1200 600-800 180-190 2,3-2,75

5 Гидролизат из глобулина 560-760 80-90 80-90 1,75-3,2

6 Гидролизат из фибрина 610-720 500 100-110 3

7 Гидролизат из казеина 718-725 640-670 90-120 2-3

Из материалов таблицы 3 следует, что наибольшее количество питательных веществ содержит перевар Хоттингера. Следующие места занимают гидролизат куриных эмбрионов и гидролизат кровяных сгустков, которые по своему составу близки к мясным переварам Хоттингера.

О пригодности среды для культивирования пастерелл мы судили по общему количеству микробных клеток, которое определяли прямым подсчетом в счетной камере и по количеству'микробов, определяемых чашечным методом, а также по времени накопления бактериальной массы.

Количество жизнеспособных клеток в каждой среде в экспоненциальной фазе развития, определяли на штаммах пастерелл сероваров А, В, Д.

Установлено, что количество жизнеспособных микробных указанных сероваров клеток составляло в средах 1, 2, 3 - 2,1-3,5х109, в средах 5, 6, 7 - 1,7-2,2x107"8.

Гидролизаты из глобулина, фибрина и казеина давали хорошее накопление живых пастерелл, однако, во всех средах накопление было недостаточным для производства вакцины,

В последующей работе мы изучали следующие технологические вопросы: - оптимальный объем матровой расплодки при засеве пастерелл в произ-

водственные питательные среды;

- влияние на рост пастерелл добавления сыворотки крови в различных концентрациях;

- влияние на рост пастерелл интенсивности перемешивания; •

- оптимальная подача воздуха для ускоренного роста пастерелл.

Установлено, что продолжительность лаг-фазы находится в прямой зависимости от объема матровой расплодки и составляет при 1 % засеваемой культуры - б часов, 2% - 5, 3% - 4,5, 4% - 3,5, 5% - 3 часа и 8-10% - до одного часа.

В таблице 4 показана взаимосвязь концентрации выросших пастерелл от содержания сыворотки крови в питательной среде.

Таблица 4

ВЛИЯНИЕ СОСТАВА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ НА КОНЦЕНТРАЦИЮ ПАСТЕРЕЛЛ

Состав среды Количество живых пастерелл

1 .Перевар Хоттингера 2.Перевар Хоттингера с добавлением 1% сыворотки крови Перевар Хоттингера с добавлением 2% сыворотки крови Перевар Хоттингера с добавлением 3% сыворотки крови Перевар Хоттингера с добавлением 4% сыворотки крови 3.Подача воздуха была оптимальной при 2 объемах в минуту, сокращение подачи воздуха сопровождалось замедлением роста, увеличение подачи воздуха не ускоряло роста 3,2x10'-3,5-4x109 5-6x10" 7-8x10" 1,0-1,2x10'"

Пастереллы сероваров А, В, Д не различаются в своих ростовых потребностях.

В качестве универсальной среды для культивирования пастерелл при производстве вакцин мы рекомендуем среду следующего состава;

Перевар Хоттингера с содержанием аминного азота 175-20" в смеси с гидролизатом куриных эмбрионов или гидролизатом кровяных сгустков, засев

матровой расплодки в объеме 8-10%, добавление 3-4% сыворотки крови лошади или крупного рогатого скота, подачу воздуха из расчета 2 объема в минуту, среда должна перемешиваться из расчета 120 оборотов мешалки в минуту. По мере защелачивания среды добавляется 40%-ный раствор глюкозы! Выход бактериальной массы на описанной среде составляет 18-25 млрд/см3.

2.3. Живые вакцины против пастереллеза птиц.

2.3.1. Сухая живая вакцина из пастеровского штамма.

(ТУ 10-19-604-88)

В 1947 г. из Института им. Пастера в Париже в ВГНКИ поступил авиру-лентный штамм пастерелл, который был использован для изготовления вакцины против пастереллеза птиц. За вакциной сохранилось наименование - Пастеровская.

Проведенное на протяжении 30 с лишним лет исследования вакцины показали отрицательные ее свойства. Так, у части вакцинированной птицы отмечали сонливость, потерю аппетита, гипертермию, снижение яйценоскости, а в' месте введения (грудная мышца) - небольшую отечность и даже ограниченный некроз ткани.

В опытах с контрольным заражением 3-кратно вакцинированных кур продолжительность иммунитета не превышала трех месяцев, что вынуждало проводить неоднократные ревакцинации через каждые 2-2,5 месяца.

Принимая во внимание остаточную реактогенность и слабую имму-ногенность производство вакцины было прекращено.

2.3.2.Вакцина против пастереллеза кур живая (ТУ 9384-002-00494189-00)

Обоснованием для разработка данного препарата послужили:

отрицательные испытания вакцины из пастеровского штамма; неудовлетворительные итоги проверок специфической активности

ряда противопастереллезных вакцин зарубежного производства, что, по-видимому, связано с различной антигенной структурой вакцинных и контрольных штаммов, использованных для заражения птицы;

стремление получить безвредныйи высокоиммуногенный препарат, пригодный не только для индивидуальной, но и групповой иммунизации.

В ВГНКИ (Б.Ю. Шустер, Ю.А. Малахов и-В.И. Заерко) на основе супрес-сорных ревертантов создали моно- и бивалентные вакцины против сальмонел-леза водоплавающей птицы, телят и поросят. Вакцины широко применяются на животноводческих фермах и успешно вытесняют инактивированные формол-вакцины. 1

Мы поставили задачу выяснить возможность использования метода атте-нуации, по аналогшГссальмонеллами, в гене-супрессоре и стрептомициновом локусе. Подобные исследования ранее не проводились. '

Для получения вакцинного штамма использовали вирулентный штамм Р. multocida № 49, выделенный в 1981 г. Р.В. Душуком, В.В. Кашириным и др. в Ростовской области от павшей от пастереллеза курицы. LDso его для'беспород-ных белых мышей массой 16-18 г соответствовала 1x109, а для кроликов массой 1,5-2,0 кг - 2х108 бактерий.

Морфологические, тинкториальные, культуральные и ферментативные свойства штамма Р. multocida № 49 были типичными для микробов вида Р. multocida.

Для выделения спонтанных Str-d мутантов 1-2хЮ10 клеток вирулентного штамма высевали в чашки с агаром Хоттингера и 4%-ным содержанием сыворотки и стрептомицина в концентрации 300 ЕД/см3. Колонии, выросшие через 48 часов культивирования были стрептомицино-устойчивыми (Str-d). Эти колонии пересевали в чашки, разделенные на секторы, в среду со стрептомицином и без него. Колонии, выраставшие на среде с антибиотиком, считали Str-d мутан--тами.

Для получения ревертантов брали 2-суточные культуры мутантов и по 0,1 см' засевали в чашки без стрептомицина. Через 2-3 суток культивирования вырастали колонии из ревертировавших в исходное стрептомицинзависимое .состояние. Частота реверсии составила 2-3x105.

Определение генотипа ревертантов проводили методом трансдукции фагом 322. Оказалось, что среди трансдуктантов имеет место расщепление по чувствительности к стрептомицину: 50-75% трансдуктантов были стрептомицину-стойчивыми, а 15-30% - стрептомицинзависимыми. Они также различались по степени вирулентности. В опытах с сальмонеллами у Б.Ю. Шустера (1988) около 80° о ревертантов оставались авирулентными, а у остальных вирулентность восстанавливалась в той или иной степени.

В наших опытах у ревертантов пастерелл вирулентность восстанавливалась до 25%. Последующие исследования остаточной вирулентности у 78 клонов ревертантов позволило нам селекционировать штамм Р. ти1кхпс1а №11, отвечающий требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам.

Низкая стабильная остаточная вирулентность сальмонелл и высокая йм-муногенность позволили использовать их в качестве живых вакцин для профилактики сальмонеллеза у сельскохозяйственных животных.

Наши опыты показали, что метод селекции супрессорных ревертантов позволяет получать вакцинные штаммы и для профилактики пастереллеза живот-пых. что подтверждено в опытах на курах.

Полученный штамм Р. тикосйа №11 представляет собой супрессорный ревертант стрептомицинзависимого мутанта, несет 2 мутации: в гене супрессоре и сгрептомициновом локусе, каждая из которых снижает вирулентность на 1\10"". а обе на 10"'4.

Остаточная вирулентность исходного штами.а составляла около IхIО2, а аггенунрованного более 1x10'' микробных тел. Пятикратный пассаж через организм цыплят не повысил вирулентность аттенуированного штамма. Мыши,

получившие дозу )х)05 микробов аттенуированного штамма не погибли, а после заражения выжило 18 из 20 мышей.

Иммуногенность (ЕД5о) для 3-месячных цыплят у штамма №11 составила 161,8, а для пастеровского штамма 219 млн. микробных тел.

Технология изготовление вакцины слагается из следующих этапов:

- проверка производственного и контрольного штаммов;

- изготовление универсальной среды и проверка ее на стерильность;

- изготовление и засев в реактор матровой расплодки;

- культивирование до начала стационарной фазы, добавление, по мере необходимости, раствора глюкозы, подача воздуха и работа мешалки;

- осаждение бактериальной массы на центрифуге;

- разбавление сгустка бактерий забуференным физиологическим раствором до концентрации .50 млрд/см3;

- смешивание с сахарозо-пептон-желатиновой средой высушивания;

расфасовка в ампулы по 4 см3; высушивание и запайка под вакуумом; контроль вакцины.

Для определения оптимальной схемы иммунизации мы вакцинировали по 18 кур внутримышечно, подкожно, перорально и аэрозольно однократно. Эффективность одно- и двукратного введения была одинаковой.

Наилучшие результаты получены при внутримышечной иммунизации.

После заражения через месяц выжило 83,3%, через 3 и 6 мес. - 70% цыплят. В

»

остальных группах результаты были хуже.

При вакцинации на неблагополучной ферме 100 кур внутримышечно в дозе по 1 млрд. микробных тел при проверке иммуногенности выжило80 кур. В контроле из 10 зараженных кур пало 10.

Вакцина прошла проверку в производственных условиях с положит тельным результатом.

2.4. Инактивированные вакцины против пастереллеза птиц.

2.4.1. Историческая справка.

В 60-70 гг. наша биопромышленность выпускала 4 инактивированных (с масляным адъювантом) вакцины против пастереллеза птиц, в том числе 2 (одна для кур и индеек и вторая для уток и гусей), предложенные Никифоровой Н.М. с соавт. и 2 (для куриных и водоплавающей птиЦы), разработанные Цимохом В.И. с соавт.

Поток рекламаций на недостаточную эффективность вакцин и возникновение в месте введения изменений, снижающих товарную ценность тушек послужили основанием для проведения комиссионной проверки их реактоген-ности и иммуногенности. По результатам испытаний все вакцины были сняты с производства.

Большие потери от пастереллеза в птицеводстве и отсутствие эффективных средств защиты обусловили необходимость дальнейших изысканий в этой области. Разработанная в ВГНКИ (Р.В. Душук, А.П. Простяков и др.) вакцина против пастереллеза птиц обладала достаточной превентивной активностью при содержании в антигенном компоненте не ниже 1,2 мг в см3.

2.4.2. Вакцина против пастереллеза птиц инактивированназ сорбированная

(извещение № 2 об изменении ТУ 10-19-30-88)

Вакцина предложена А Н. Борисенковой с соавт., представляет собой капсульную фракцию производственного штамма Р. ти1и>ас!а 115 в смеси со взвесью бактерий штамма в концентрации 3,0-3,5 млрд/см3.

По предложенной А.Н. Борисенковой технологии выращивания производственного шгамма пастерелл в реакторе, накопление бактерий в 5-6-часовой культуре должно составлять 8-10, а через 12-24 ч - 18-20 млрд/см3. Выращенную культуру сепарируют, бактериальную массу разводят фосфатным буфером до концентрации 40 млрд/см3 и проверяют на чистоту. Взвесь микробов прогревают 2 часа при .-V . эатуре 56±4,0°С. Охлажденную суспензию повторно центрифугируют. Надослдочную жидкость инактивируют в течение суток 1 %-ным раствором

формалина. Надосадочную жидкость снова прогревают в течение 2 часов при температуре 60°С и добавляют для консервирования тиомерсал 1:10000.

Полученную жидкость смешивают с равным объемом 3%-ного геля гидроокиси алюминия. Адсорбцию проводят в течение 48 часов при температуре 10,0±2,0°С. Взвесь перемешивают 2-3 раза в сутки. Вакцину разливают, проб-куют и этикетируют.

Готовая вакцина должна быть стерильной, содержать капсулытое вещество и упомянутую взвесь бактерий. Иммуногенность вакцины проверяют на курах, вакцинируют 10 кур внутримышечно в крыло в дозе 2,0 см3. Вакцину считают активной, если выживает 7 и более кур из числа вакцинированных при гибели не менее 9 контрольных.

Автор указывает, что вакцина должна содержать 20-40,0 мг% белка, содержание которого определяют с помощью предварительно построенной калибровочной кривой. Автор, однако, не расшифровывает, какой белок и как увязать его с активностью вакцины.

Мы поставили задачу определить оптимальную концентрацию белка и микробных клеток в вакцине и разработать метод ее контроля по содержанию этих компонентов. В опыте использовано 50 цыплят 3-месячного возраста. Полученные данные приведены в таблице 5.

Таблица 5

ИММУНОГЕННОСТЬ ВАКЦИНЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СОДЕРЖАНИЯ БЕЛКА

Доза вакцины Результаты заражения

Цыплят Содержа- Концеч?.. »

•в опыте Объем, см3 ние бел- микр. клеток, пало выжило

ка, т% - млрд'см3

10 2 0,25 1 7 3

10 2 • - 0,50 2 • 5 5

10 2 0,75 .0>и Р. тиКоскй.

Результаты приведены в таблице 6.

Таблица 6

ИММУНОГЕННОСТЬ ВАКЦИНЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КОНЦЕНТРАЦИИ ГОА •

Цыплят в опыте Содержание 6%-ного ГОА в среде Результаты заражения

живы пали

10 10 4 6

10 15 7 3

10 20 6 4

10 25 9 1

10 30 9 1

10 35 10 -

10 40 7 ■ 3

10 50 5 5

Из данных таблицы 6 следует, что наибольшая выживаемость цыплят по-

лучена при концентрации в вакцине ГОА от 25 до 35% 6%-ного ГОА.

Уменьшение или увеличение содержания ГОА снижает иммуногенность вакцины.

Опытные образцы препарата, приготовленного по усовершенствованной

технологии, прошли контроль иммуногенности по предложенной нами схеме.

При проверке в неблагополучных по пастереллезу хозяйствах доказана эпизоотологическая эффективность опытной вакцины.

Таким образом, высокоиммуногенная вакцина против пастереллеза птиц должна содержать не менее 1% белка и 25-35% ГОА 6%-ной концентрации.

2.4.3. Инактивированая сорбированная вакцина против колибактериоза птиц и ассоциированная против пастереллеза и колибактериоза (в стадии разработки АН. Борисенкова, В.И. Заерко с соавторами)

Ставропольская биофабрика изготавливает инактивированную вакцину против колибактериоза птиц.

Вакцина представляет собой взвесь штаммов эшерихий трех серогрупп и предназначена для профилактики эшерихиоза кур, индеек и уток. Иммуноген-ность вакцины не стабильна, что связано с неоднородностью этиологической структуры эшерихиоза птиц. И, если вакцина дает хороший эффект в одном месте, то в другом она может оказаться совершенно не иммуногенной. •

ВНИВИ птицеводства предпринял попытку изготовить вакцину с более широким антигенным спектром. Вакцину готовят из эшерихий.следующих се-роваров: 09:1230 (№1330), 078.К80 (№320), 0141 :К87:К88 (№727), 0115 (№453-37/17), 0141:К99 (353-37/17), 09:КЮЗ:987Р (397-37/14), 0101:Р41 (398,37/14).

Питательной средой для культивирования эшерихий служит бульон Хот-тингера.

Морфологические, культуральные, ферментативные свойства штаммов полностью отвечают паспортным данным. Серогрупповую принадлежность определяют в реакции агглютинации с агглютинирующими 0-коли сыворотками.

Каждую культуру выращивают в отдельном реакторе, осаждают центрифугированием до концентрации 80-100 млрд/см3, прогревают при 60-65°С в те-

чение20мин.

Супернатант отделяют от клеток центрифугированием. Содержание адгезивных антигенов проверяют в РДП. Титр антител во всех случаях должен быть не менее 1:2-1:4.

В реакторе смешивают бактериальную массу и адгезивные антигены, добавляют 0,3% формалина и инактивируют 15-16 суток.

К инактивированной культуре добавляют 6%-ный ГОА до 30%-ной концентрации. Вакцину расфасовывают и контролируют.

Принципиальное отличие предлагаемой вакцины от вакцины .инактивированной против колибактериоза птиц заключается в подборе антигенов. Последняя изготавливается с 1984 г. из корпускулярных антигенов эшерихий.

Вакцина против колибактериоза птиц инактивированная сорбиро-ванная содержит растворимые антигенные комплексы эшерихий. Предназначена для специфической профилактики колибактериоза птиц различных видов, и ту и другую готовят на бульоне Хоттингера', штаммы выращивают в реакторах раздельно Накопление микробных клеток в 12-14-часовой культуре составляет около 14 млрд/см'. Бактериальную массу отделяют от питательной среды центрифугированием и сорбируют- на ГОА.

К числу дефектов предлагаемой против эшерихиоза вакцины относятся следующие: изоляты эшерихий, полученные от кур, крайне редко (сотые доли процента) имеют адгезивные антигены.

Кроме того, основным путем заражения кур является аэрогенный, при котором адгезивные антигены, если бы даже они и были, не играли бы никакой роли.

Роль анатоксинов в иммуногенезе под влиянием вакцин не освещена.

Таким образом, предлагаемая вакцина порочна в своей основе. Вакцина, обогащенная адгезивными антигенами, эффективна в борьбе с эшерихиозом телят и поросят, у которых заражение происходит алиментарным путем.

У иммунизированных животных энтеропатогенные эшерихии не сорбируются в кишечнике, а, следовательно, не вызывают инфекционного процесса.

Куры заражаются возбудителем эшерихиоза аэрогенно и поэтому адгезивные антигены не играют никакой роли в развитии инфекционного процесса, в его специфической профилактике.

В этой связи создание ассоциированной вакцины против эшерихиоза и пастереллеза нуждается в серьезном обосновании.

2.5. Вакцина эмульгированная против пастереллеза нутрий (извещение № 2 об изменении ТУ 10-19-448-87)

Первая вакцина против пастереллеза нутрий предложена Никифоровой Н.М. с соавт. в середине 70-х годов. Готовили вакцину из двух штаммов пасте-релл, выделенных от нутрий.

Бакмассу выращивали в бульоне Хоттингера, приготовленном из говяжьего или конского фарша с добавлением триптического перевара казеина. Оба штамма выращивали в одном реакторе и спустя 8-10 часов с момента засева концентрация бактерий достигала 8-10 млрд/см3. С помощью сепарирования культуру концентрировали, бакмассу ресуспендировали в забуференном физиологическом растворе, доведя содержание бактериальных кпеток.до 20 млрд/см3, инактивировали формалином и эмульгировали с адъювантом, содержащим 83% легкого минерального масла и 17% ланолина. Использование такого адъюванта, хотя и обеспечивало выработку достаточно напряженного иммунитета, однако,

были сложности с введением, особенно неподогретой вакцины, длительным

*

рассэсыванием депо, возможным образованием свищей при подкожном попадании препарата и потерей товарной ценности шкурки.

Отмеченные недостатки послужили основанием для разработки в 80-х годах новой вакцины (Душук Р.В. с соавт.) с использованием сапонина и гидрата окиси алюминия. Технологический процесс изготсвления данного препарата включал получение и концентрацию бакмассы, ресуспендирование" ее забуфе-

ренным раствором до содержания 20 млрд/см3 пастерелл, инактивацию их формалином при 37°С в течение 48 часов, добавляли 10%-ный раствор сапонина из расчета 0,02-0,03 г на 1 литр бактериальной массы. Контроль вакцины осуществляли на кроликах.

Двукратное введение нутриям вакцины в суммарной дозе 3 см3 обеспечивало выработку иммунитета продолжительностью до 6 месяцев.

Однако, отсутствие производства данного адъюванта в нашей стране и нестандартность по химическому составу отдельных партий сапонина, поступающих из-за рубежа и по дорогой цене, вынудили разработчиков отказаться от его использования.

Принимая во внимание, что гидрат окиси алюминия является не только сорбентом, но и иммуностимулятором, нашедшим широкое применение в производстве биопрепаратов ветеринарного и медицинского назначения и невысокую его стоимость, мы испытали его пригодность для изготовления вакцины против пастереллеза нутрий.'

Опыт поставлен по той же схеме, что и при иммунизации кроликов. Вакцина. содержащая 30% шестипроцентного гидроксала, оказалась наиболее им-муногенной. Нутрии, получившие такую вакцину, выживали в 80-90% случаев, тогда как уменьшение содержания в вакцине гидроксала снижало выживаемость нутрий до 60-70 и даже 50% Продолжительность иммунитета у вакцинированных гидроокись алюминиевой вакциной нутрий не превышала 6 месяцев.

При растш ровке иммунизирующей дозы оказалось, что пяти миллиардная концентрация пастерелл. адсорбированная на 6%-ной гидроокиси алюминия при 30%-ном ее содержании является наиболее оптимальной. В связи с этим при отработке схемы иммунизации установлена доза вакцины дня молодняка с 2-месячного возраста 1.0 см' и для взрослых - 1.5 см\ внутримышечное введение вакцины обеспечивает формирование напряженного иммунитета продолжительностью не менее 6 месяцев.

2.6.Вакцина против пастереллеза и стрептококкоза нутрий.

(ТУ 9384-179-00494189-99)

Анализ эпизоотической ситуации в разных зонах Кавказа и Закавказья показал, что в ряде хозяйств пастереллез протекает не как моноинфекция, а в ассоциации с другими болезнями различной этиологии. Чаще, однако, регистрируют одновременное неблагополучие по пастереллезу и стрептококкозу.

Изучение этиологической структуры названных инфекций показало, что вспышки пастереллеза обусловлены тремя сероварами Р. multocida А, В, Д и Streptococcus zooepidemycus серогруппы С. это обстоятельство и побудило разработать ассоциированную вакцину против обеих инфекций.

Для изготовления вакцины отобрано по одному штамму Р. multocida серо-варов А, В, Д и один штамм Streptococcus zooepidemycus серогруппы С.

Пастереллы выращивали в среде, изготовленной на основе перевара Хоттингера с добавлением триптического перевара казеина. Каждый штамм выращивали отдельно в реакторе на протяжении 10-14 часов, и к этому сроку концентрация пастерелл достигала 18-22 млрд/см3. Культуры пастерелл смешивали в равных объемах, концентрировали и ресуспендировали в фосфатном буфере до 60 млрд/см \

Для приготовления стрептококкового компонента вакцины микроб выращивали в бульоне Хоттингера 4-7 часов, и за это время концентрация бактерий достигала 4 млрд/см3. Для изготовления вакцины обе взвеси бактерий смешивали в соотношении 1:1, ииактивировали формалином (0,4%) и добавляли 6%-ную гидроокись алюминия до 25%-ной концентрации, устанавливали pH 7,2-7,4 и фасовали во флаконы емкостью 100-200 см3.

Контроль вакцины на нммуногенность проходит на кроликах по пасте-реллезному компоненту и на белых мышах по стрептококковому.

Внутримышечная иммунизация нутрий по 1 см3 с 2-месячного возраста и по 1,5 см1 взрослых животных обеспечивает выработку напряженного иммуни-

тета не менее чем на 6 месяцев.

Антигены пастерелл и стрептококков не проявляли по отношению друг к' другу ни антагонистического, ни синергического действия.

Суть наших усовершенствований сводится к введению в состав питательной среды для культивирования пастерелл гидролизатов из непищевого сырья, которые не повлекли за собой снижение урожайности пастерелл, и повышение до 30% содержания в вакцине 6%-ного ГОА.

Изготовленные образцы вакцины по усовершенствованной с учетом наших предложений технологии отличались повыщенной иммуногенностью препарата (на 10-20%).

2.7. Вакцина против пастереллеза норок.

(извещение № 2 об изменении ТУ 10-19-447-87)

В середине 70-х годов' Никифоровой Н.М. с соавт. была предложена эмульгированная вакцина, содержащая инактивированную взвесь семи штаммов пастерелл, выделенных от норок, с добавлением адъюванта, используемого при изготовлении эмульгированных вакцин для сельскохозяйственных животных. Однако, в практике звероводства этот препарат широкого.применения не получил. Ему, как и другим препаратам этой группы, присуща высокая вязкость и связанная с этим трудность введения, а также длительность рассасывания. Если учесть, что норки весьма агрессивные и беспокойные животные, то проводить им строго внутримышечные инъекции весьма сложно. Попадание вакцины под кожу сопровождается образованием стерильного абсцесса, который вскрывается с нарушением кожного покрова, и потерей товарной ценности шкурки зверя.

Предпринимались попытки замены масел в вакцине, однако, желаемых результатов получить не удалось. Поэтому нами создана ГОА-формолвакцина с использованием вместо семи одного наиболее иммуногенносо штамма пастерелл. Выращивание бакмассы проводили из модифицированной среде и по обычной технологии. Как и для описанных выше других вакцин использовали

ГОА 6%-ный при 30%-ном содержании.

При .раститровке иммунизирующей дозы оптимальной оказалась 5-миллиардная концентрация пастерелл при отмеченном выше содержании ГОА. По данным опытов, 1,0 см3 для молодняка и 1,5 см3 для взрослых зверей при однократном введении оказалось достаточным для выработки напряженного иммунитета длительностью до 6 месяцев. Принимая во внимание, что молодняк рождается в мае, а убой происходит, в ноябре, то однократная иммунизация полностью обеспечивает защиту молодняка, а маточное поголовье и производителей ревакцинируют по истечении 6-месячного срока.

2.8. Формолвакцина против пастереллеза кроликов. (извещение № 1 об изменении ТУ 46-21-47-84)

Вакцина против пастереллеза кроликов предложена Леонтюком В.И. в 1968 г. и изготавливается из 7 штаммов пастерелл, выделенных от павших кроликов.

В качестве питательной среды использовали экстракт из тканей кроликов, павших от пастереллеза вследствие заражения вакцинными штаммами пастерелл, к которому добавляли 5-8% кроличьего хоттингеровского перевара. Каждый штамм выращивали в отдельном баллоне. Длительность иммунитета, по данным автора, составляла не менее 15 месяцев.

Затем производственные штаммы пастерелл стали выращивать в реакторах в бульоне Хоттингера, приготовленного из говяжьего мяса. Продолжительность культивирования сократили до 12-14 часов. В качестве адъю-ванта добавляли агар-агар до 0,5%-ной концентрации.

Мы проверили иммуногенность вакцины, в частности, продолжительность иммунитета и адъювантное действие агара микробиологического ГОСТ 17206-84. Оказалось, что длительность иммунитета при двукратном введении вакцины не превышает 5-6 месяцев; кроме того, 0,5%-ная концентрация агар-агара затрудняет введение вакцины и не обеспечивает адъювантного действия.

Мы доставили задачу изучить возможность использования в качестве адъюванта гидроокись алюминия. Опыт был поставлен по той же схеме, что и при иммунизации телят. Вакцина, содержащая. 30% шестипроцентного гидро-ксала, оказалась наиболее иммуногенной. Кролики, получившие вакцину с такой концентрацией ГО А, выживали в 90-100% случаев, а из получивших вакцину с агар-агаром - 60-70%.

Мы вакцинировали кроликов двукратно с интервалом 10-12 дней внутримышечно. Каждый см3 вакцины содержал 5 млрд. пастерелл и 30% гидроокиси алюминия 6%-ной.

Кроликам 1,5-месячного возраста вводили 1 см3 вакцины, а с трех месяцев и старше - по 1,5 и 2 см3 вакцины. Продолжительность иммунитета у вакцинированных гидроокисьатоминиевой вакциной кроликов превышала шесть месяцев.

2.9. Прециттированная Формолвакпина против пастереллеза овец и свиней. (извещение № 3 об изменении ТУ 46-21-185-84)

Вакцина представляет собой смесь эпизоотических штаммов пастерелл,' выделенных от крупного рогатого скота и свиней при остром течении инфекции, инактивированную формалином и преципитированную алюмокалиевыми квасцами.

Для изготовления вакцины используют 2 штамма возбудителя пастереллеза крупного рогатого скота (штаммы №№ 796 и 116) и 2 штамма возбудителя пастереллеза свиней (№№ 877 и 656). Контрольным является штамм № 796.

Штаммы 116 и 796 должны вызывать гибель телят в возрасте 4-6 месяцев, массой 80-90 кг через 18-30 часов после внутримышечного введения 1,0-2,0 мл суточной бульонной культуры; штаммы 877 и 656 возбудителя пастереллеза свиней обусловливают гибель поросят 2-3 месяцев массой 20-25 кг через 36 часов после внутримышечного заражения 1,0-2,0 мл культуры.

LD50 для белых мышей упомянутых выше штаммов колеблется от 3 до 20 микробных клеток.

При культивировании в реакторе вырастает 6-10 млрд/см3 микробных тел.

Квасцы добавляют в реактор из расчета 20-25 мл 10%-ного стерилизованного автоклавированием (1 атм., 60 мин) раствора на литр культуры. После добавления квасцов начинается интенсивное выпадение хлопьев в осадок, что указывает на степень преципитации культуры. К последней добавляют формалин до 0,25-0,3%-ной концентрации. Формалипизированную культуру выдерживают сутки при постоянном перемешивании. Вакцина успешно проходит контроль на безвредность и активность.

Однако, ранее при иммунизации крупного рогатого скота в хозяйствах вакцина давала до 50 осложнений в год, которые проявлялись аллергией немедленного типа, нередко с летальным исходом.

В целях недопущения аллергических реакций сократили концентрацию пастерелл в вакцине до 4 млрд/см3. Несмотря на то, что иммунизирующая доза для крупного рогатого скота была сокращена вдвое, количество осложнений ос-.тавалось на прежнем уровне.

Массовые осложнения после вакцинации вынудили прекратить применение вакцины для крупного рогатого скота.

В 1984 г. было утверждено ТУ на формолвакцину против пастерел-леза овец и свиней преципитированную. Овцы и свиньи не давали аллергических реакций и имели иммунитет достаточной напряженности.

Мы поставили задачу усовершенствовать эту вакцину путем замены алю-мокалиевых квасцов на гидрат окиси алюминия и уточнить оптимальную иммунизирующую дозу для крупного рогатого скота, свиней и овец.

Была приготовлена вакцина, содержащая в I см' Р. тиЬоаУа серовара В 5 млрд., сероваров А и Д - по 2,5 млрд. микробных клеток, а вместо алюмокалие-вых квасцов ввели гидроокись алюминия в различной концентрации. Опыт поставлен на бычках 4-5 месячного возраста. Результаты опыта представлены в таблице 7.

Таблица 7

ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГОА НА ИММУНОГЕННОСТЬ ВАКЦИНЫ ' ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА.

Концентрация антигенов (млрд/см3) Телят в опыте Концентрация ГОА 6%-ной Результат заражения (51Л)5о)

А В д живы пали

2,5 5 2,5 10 10 5 5

2.5 5 2,5 10 20 7 3

2,5. 5 2,5 10 25 9 1

2,5 5 2,5 10 30 10 -

2,5 5 2,5 10 30 10 -

2,5 5 2,5 10 . 35 10 -

2,5 5 2,5 10 • 40 7 3

2,5 5 2,5 10 50 6 4

Из материалов таблицы 7 следует, что ГОА 6%-ная в концентрации 2535% обладает выраженным адьювантным действием. Уменьшение или увеличение концентрации ГОА дало худшие результаты. Аллергические реакции не были зарегистрированы ни у одного из 70 вакцинированных бычков.

Опыты, поставленные на подсвинках, четко продемонстрировали выраженное действие на свиней 6%-ной ГОА, добавленной к вакцине в 30%-ной Концентрации. Вакцина испытана на двух неблагополучных по пастереллезу фермах крупного рогатого скота (720 гол.) и на одной свиноферме (1213 гол.).

В производственных условиях вакцина также не вызывала аллергических

реакций. Полученные данные позволили дать новое наименование вакцине "Поливалентная гидроокись алюминиевая вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота, свиней, овец и коз".

Вакцина вводится внутримышечно двукратно в дозах, указанных в наставлении.

Применявшийся контроль вакцины нг позволял дифференцировать отдельные серии вакцины по качеству, так как большая доза вакцины, вводимая , двукратно, невелировала различия.

Вакцину вводили голубям двукратно в количестве 1 и 3 см3, количество микробных клеток в 1 см3 оставалось неизвестным, а судя по инструкции голуби могли получить от 2 до 10 млрд микробных тел и поэтому ни выживание, ни гибель голубей ничего не говорили о качестве вакцины.

С целью разработки объективного метода контроля активности вакцины мы изготовили серию вакцины с концентрацией 8 млрд/см3 микробных тел и провакцинировали 12 пяти-шести-месячных бычков, 10 подсвинков и 7 овец, Животных заразили 5ЬБ5о смеси пастерелл сероваров А, В, Д. В итоге заражения пал 1 бычок и 1 подсвинок. Эта вакцина, по нашему мнению, достаточно иммуногенна. Вакциной этой же серии мы иммунизировали голубей и установили, что из 10 голубей, получивших 0,5 и 1,0 см3 вакцины и больше, выживает 8-10 птиц. По мере снижения дозы вакцины птицы погибают при заражении. Если в контроле гибнет 7 и больше голубей, вакцину следует считать не достаточно иммуногенной и подлежащей выбраковке.

2.10.Вакцина против сальмонеллеза. пастереллеза и стрептококкоза поросят. (ТУ 9384-116-00494185-96)

А.Г. Малявин (1956) разработал и внедрил в практику вакцину концентрированную поливалентную формолквасцовую против паратифа, пастереллеза и диплококковой септицемии поросят. Для изготовления вакцины использовали следующие штаммы: Б. с1ю1егае8Ш8, Р. тиИос1(1а и Diplococcus эерПсиз. Каждого вида микробов брали по несколько штаммов.

Поросят вакцинировали в возрасте от 20 до 30 дней, свиноматок - за 15-40 дней до опороса. Поросят вакцинировали двукратно с интервалом 5-7 дней в дозе 3-4 см3 для первой и 4-5 см3 для второй инъекции. За семь дней до отъема поросят ревакцинировали однократно в дозе 4-5 см3.

В хозяйствах, особо неблагополучных по сальмонеллезу, пастереллезу или диплококковой инфекции, где молоднлк заболевал в первые' недели жизни,

свиноматок вакцинировали трехкратно: за 35-40 дней до опороса по 5 см3, за 25-30 суток до опороса - по 10 см3 и за 15-20 дней до опороса - по 10 см3. Имму-ногенность вакцины была невысокой, особенно против пастереллеза.

В 1970 г. Diplococcus septicus был заменен на Streptococcus faecalis (штаммы №№ 13, 345, "Соколове", "Константиновский"), а препарат получил наименование "Вакцина против сальмонеллеза, пастереллеза и энтерококковой инфекции поросят ассоциированная".

Результаты применения вакцины показали, что энтерококки не играют существенной роли в патологии у свиней, а штаммы S. choleraesuis и Р. multo-cida серовара В не обеспечивают защиту свиней во всех случаях от сальмонеллеза и пастереллеза.

Проведенный нами анализ этиологической структуры заболеваний саль-монеллезом и пастереллезом показал необходимость изготавливать вакцину из следующих штаммов микроорганизмов:

Salmonella choleraesuis - штамм 370;

Salmonella typhimurium - штамм 371;

Pasteurella multocida серовар А штамм 1231;

Pasteurella multocida серовар В штамм 656;

Pasteurella multocida серовар Д штамм 9;

Streptococcus серогруппы С штамм П 2082;

Streptococcus серогруппы R штамм "Касли".

В соответствии с нашим предложением перечисленные штаммы введены в состав вакцины, а вакцина получила наименование "Вакцина против сальмонеллеза. пастереллеза и стрептококкоза поросят".

Все штаммы типичны по морфологическим, культуральным и ферментативным свойствам, антигенной структуре и характеризуются высокой вирулентностью. Так Salmonella choleraesuis имеет LD50 для белых мышей 10-50, Salmonella typl.imurmm - 180-120 микробных вдеток. Смертельная доза для мор-

ских свинок колеблется для обоих сероваров от 0,5 до 2 млрд микробных клеток.

Раз1еиге11а тикоаск (штамм 656) убивает 2-3-месячных поросят за 24-48 часов, штаммы 1231 и 9 убивают кроликов через 72 часа после внутримышечного заражения одним см3 суточной бульонной культуры.

Стрептококк контрольный штамм П-2082-к убивает белых мышей в дозе 0,3 см3 культуры в течение 5-7 суток. .

Одним из сложных вопросов при изготовлении ассоциированных вакцин является взаимоотношение антигенов, которое может быть антагонистическим или синергическим.

Предлагаемая нами вакцина содержит 2 серовара сальмонелл, 3 -пастерелл и 2 - стрептококков.

Для выяснения характера взаимодействия антигенов этих микроорганизмов мы поставили серию опытов, результаты которых приведены в таблице 8.

Таблица 8

ВЗАИМООТНОШЕНИЕ АНТИГЕНОВ НЕКОТОРЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ (ПО ДАННЫМ ОПЫТОВ НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ)

моно- ассоцииро-

мор- голу- белые вакцины ванная вак-

Штамм ские би мыши цина

свинки живы пали живы пали

Salmonella choleraesuis 10 8 2 9 1

Salmonella typhimurium 10 10 - 9 1

Pasteurella multocida серовар А 10 7 3 8 2

Pasteurella multocida серовар В 10 9 1 8 2

Pasteurella multocida серовар Д 10 9 1 9 1

Streptococcus серогруппы С 10 8 2 9 1

Streptococcus серогруппы R 10 8 2 8 2

Ассоциированная вакцина 20 30 20 59 11 60 10

Из материалов таблицы 8 следует, что антигены в моновакцинах и ассоциированной вакцине обладают одинаковой иммуногенностью, что позволяет отовить из них ассоциированную вакцину.

Иммуногенность ассоциированной вакцины проверили на 20 трехмесячных поросятах, которых после вакцинации заразили сальмонеллами и пас-тереллами типа В; из 20 поросят пали по одному после заражения сальмонеллами и пастереллами.

Каждый штамм выращивают в отдельном реакторе и устанавливают следующие концентрации микробных тел в вакцине: сальмонеллы по 2, пастереллы по 5 и стрептококки по 2 млрд/см3. Общая концентрация 21 млрд/см'.

Контроль активности осуществляется по отношению к каждому микробу.

Иммуногенность сальмонелл контролируется на морских свинках, пасте-релл - на голубях и стрептококков - на белых мышах.

Для формирования у молодняка колострального иммунитета вакцину вводят супоросным свиноматкам за 1-1,5 месяца до опороса дважды с интервалом 10-12 дней.

2.11. Вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов инактивированная и лиофилизированная.

(ТУ 2634-002-00482861-99)

Предшественником этой вакцины послужила полужидкая формол-гидроокисьалюминиевая вакцина против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов АзНИВИ( 1965).

Вакцину изготавливали из штаммов пастерелд, выделенных из трупов крупного рогатого скота и буйволов, используя по 3 штамма от каждого вида животных. Штаммы характеризуются высокой вирулентностью и убивали телят и буйволят через 24-18 часов после внутримышечного введения.

Питательным субстратом служила полужидкая среда на бульоне Хоттин-гера с добавлением триптического перевара казеина.

Подача воздуха в процессе выращивания культуры не нормирована, перемешивание практически не проводилось, культивирование продолжалось 1824 часа. Контроль количества выросших пастерелл не предусмотрен.

Проверка активности вакцины проводится на пяти голубях, которых вакцинируют двукратно. После заражения допускается гибель двух из пяти вакцинированных голубей.

Таким образом, технология изготовления и методы контроля вакцины далеки от совершенства и не отвечают современным требованиям.

Мы поставили задачу усовершенствовать технологию изготовления и методы контроля формолвакцины против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов полужидкой гидроокисьалюминиевой.

Культуру пастерелл необходимо выращивать на ранее описанной среде с непрерывной подачей воздуха и работающей мешалке.

Концентрация микробных тел в каждой выращенной культуре должна быть не менее 8 млрд/см3.

Выращенную в реакторе культуру инактивируют 0,3%-ным формалином, концентрируют на предварительно простерилизованных центрифугах ОТР-Ю1 К. Для предупреждения загрязнения бактериальной массы в центрифугах поддерживают повышенное давление (0,3 атм.) за счет постоянной подачи стерильного воздуха.

Простерилизованный и собранный с соблюдением необходимых условий стерильности ротор центрифуги включают и, после установления постоянного количества оборотов - 15000 об/мин, подают в ротор центрифуги культуру из реактора при давлении (0,3-0,4 атм.) со скоростью 100-200 л/час.

В процессе центрифугирования берут периодически пробы надосадочной жидкости для определения степени полноты отделения бактериальной массы от питателчюй среды. Надосадочная жидкость должна быть прозрачной. При микроскопии можно обнаружить единичные микробные клетки.

Извлечение бактериальной массы из ротора центрифуги производят в предварительно просгерилизованном ламинарном боксе стерильным металиче-ским шпателем в стерильный металлический стакан от размельчителя тканей марки РТ-1, в который предварительно вносят небольшое количество (500-600 мл) среды высушивания (10% сахарозы, 4% желатина, 1 % пептона).

На размельчителе тканей РТ-1 бактериальную массу ресуспендируют в течение 2-3 мин и под факелом переливают из металлического стакана в градуированный стеклянный баллон.

Из полученной суспензии берут пробу, определяют концентрацию микробных тел по оптическому стандарту мутности или на ФЭКе, для которого предварительно строят калибровочную кривую. Колориметрирование проводят в кюветах толщиной 5 мм в световом спектре 434-435 ммк. В качестве контрольного раствора используют защитную среду.

Ресуспендированный антиген доводят до концентрации не менее 200 млрд/см3 защитной средой в соотношении 1:1.

К объему полученной суспензии добавляют 20% стерильного 6%-ного раствора ГО А.

После этого содержимое емкости тщательно перемешивают на шут-тельаппарате до полной гомогенизации суспензии.

Полученную суспензию контролируют на стерильность посевами на МП А, МПБ, МШШ и среду Сабуро и расфасовывают во флаконы.

Замороженную во флаконах (ампулах) вакцину перегружают в предварительно охлажденную до 60-65°С сублимационную установку. После подключения системы контроля за параметрами подогрева подо к и продукта сублиматор герметизируется и камера вакуумируется до предельного остаточного давления 8-10 Па. Через 1-2 часа включается подогрев полок. Конечная температура достигается +30°С в течение 4-6 часов и поадеркчвается в данном режиме до конца процесса сушки. Время сублимации 30-35 часов. При достижении температуры

в продукте +10°С подогрев полок снижается до +25°С и производят досушивание в течение 22-24 часов. Остаточная масса влаги должна быть в пределах 1 -4%. Общее время сушки составляет 72 часа.

После окончания процесса высушивания камера сублимационной установки заполняется стерильным осушенным воздухом или азотом.

Кассеты с лиофилизированной вакциной извлекают из камеры сублимационной установки, в стерильных условиях ампулы запаивают под вакуумом или в среде инертного газа, флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками, накрывают алюминиевыми!колпачками и обкатывают на закаточном полуавтомате.

Флаконы (ампулы) с вакциной укладывают в картонные коробки с разделительными перегородками, обеспечивающими целостность биопрепарата. В каждую коробку вкладывают наставление по применению вакцины. На коробку с флаконами (ампулами) наклеивают этикетку, на которой указывают: наименование и товарный знак предприятия изготовителя, полное наименование вакцины, номер серии и номер контроля, количество флаконов (ампул) в коробке, объем вакцины во флаконе (ампуле), количество растворителя для одного флакона (ампулы), количество доз в одном флаконе (ампуле), количество доз в коробке, дозы для животных, дату изготовления (месяц, год), срок годности, условия хранения и обозначение ТУ.

Каждая серия вакцины должна быть проверена на предприятии-изготовителе отделом биологического контроля.

Для определения внешнего вида, цвета, наличия посторонних примесей, плесени, следов оттаивания, трещин каждый образец с вакциной просматривают визуально, одновременно проверяют на прочность укупорки и правильность этикетирования. Наличие вакуума в ампулах проверяют согласно ГОСТ 2808389, фиолетово-синее свечение, сопровождающееся характерным потрескиванием, указывает на наличие вакуума.

Для определения растворимости в 3 флакона (ампулы) с сухой вакциной вносят физиологический раствор в объеме соответствующем объему вакцины до высушивания. После этого флаконы (ампулы) встряхивают и наблюдают за растворением вакцины. В течение 3-4 минут во флаконе (ампуле) должна образовываться равномерная взвесь от желтоватого до серо-белого цвета без комочков и хлопьев.

Определение массовой доли влаги проводят по ГОСТ 24061-80 "Препараты биологические сухие. Метод определения влажности". Массовая доля влаги должна быть в пределах 1-4%.

Для контроля стерильности вакцины используют 5 флаконов (ампул). Испытание проводят в соответствии с ГОСТ 28085-89 "Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности".

Для проверки вакцины на чистоту, окрашенные мазки из 5 флаконов (ампул) исследуют под микроскопом. В мазках должна быть чистая культура пас-терелл с характерной для них морфологией.

Определение безвредности вакцины.

Для испытания берут 5 флаконов (ампул) с сухой вакциной. Из кажд о флакона (ампулы), разведенного стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:20, отбирают 15-20 см3 вакцины и переносят в стерильный флакон. Полученную общую пробу вакцин» I используют для испытания.

Для проверки на безвредность вакцину вводят подкожно пяти белым мышам массой 18-20 г по 0,3 см3 каждой и двум кроликам массой 1,5-2,0 кг по 3 см3 внутримышечно. Животные в течение 10 дней должны оставаться клинически здоровыми.а № 796.

Вакцина должна предохранять от гибели не менее 7 из 10 вакцинированных голубей, при гибели всех контрольных. Срок наблюдения за вакцинированными голубями - 7 дней с момента введения им вирулентной культуры.

Срок годности вакцины 12 месяцев со дня изготовления при условии хранения ее в темном месте при температуре не выше 20°С.

Вакцину транспортируют всеми видами транспорта в соответствии с "Правилами перевозки скоропортящихся грузов и багажа, действующими на данном виде транспорта".

Все производственные процессы по изготовлению вакцины: засев, концентрирование, расфасовка, высушивание, контроль и прочее записывают в прошнурованные журналы по установленной форме, в тот же день, когда была проведена та или иная работа.

Таким образом, с учетом эпизоотологического мониторинга пастереллеза животных и с учетом антигенной структуры возбудителей заболевания нами разработаны биологические основы универсальной технологии производства и контроля вакцин против данного заболевания различных видов животных.

Применение такой технологии в условиях промышленного производства позволяет получить вакцины для профилактики пастереллеза всех видов животных. В необходимых случаях универсальная технология позволяет осуществлять производство ряда живых и ассоциированных вакцин.

40

ВЫВОДЫ

1. Разработаны 4 новые вакцины против пастереллеза:

- крупного рогатого скота и буйволов инактивированная лиофилизирован-

ная;

- кур живая сухая;

- пастереллеза, сальмонеллеза и стрептококкоза поросят ассоциированная;

- пастереллеза и стрептококкоза нутрий бивалентная.

2. Усовершенствована технология изготовления и методы контроля 5 вакцин: 1

- формолвакцина против пастереллеза овец и свиней преципитированная;

- инактивированная сорбированная вакцина против пастереллеза птиц;

. - формолвакцина против пастереллеза кроликов;

- вакцина эмульгированная против пастереллеза норок;

- вакцина эмульгированная против пастереллеза нутрий.г. ■ - оккоза поросят между Р. multocida А, В, Д, S. choleraesuis, S. typhirmirium, Streptococcus серогрупп Си R, что по-

¡воляет изготавливать вакцину из семи сероваров.

6. Оптимизирована технология изготовления вакцин против пасте-реллезов животных, включающая внесение 8-10% матровой расплодки, 100-120 об/мин мешалки, подачу двух объемов воздуха в минуту по отношению к питательной среде, прекращение культивирования в экспоненциальной фазе роста, что обеспечивает накопление бактериальной массы до 22-25 млрд./см3.

7. Установлены иммунизирующие дозы пастерелл в живой вакцине для кур 50 млн. и в инактивированных для свиней, крупного рогатого скота, буйволов по 30 млрд., для кроликов и нутрий -по 3 млрд. при добавлении к вакцине 6%-ного гидрата окиси алюминия до 25-30%-ной концентрации.

8. Специфическая профилактика эшерихиоза кур вакциной из адгезивных и растворимых антигенов эшерихий не обеспечивает специфичёской профилактики эшерихиоза кур потому, что адгезивные антигены не играют значимой роли в патологии у кур.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 .Разработана техническая документация, отработана промышленная технология и предложены для практического применения вновь созданные вакцины:

- против пастереллеза кур живая ТУ 9384-002-0494189-00;

- против пастереллеза и стрептококкоза нутрий ТУ 9384-179-00494189-99;

- против сальмонеллеза, пастереллеза и стрептококкоза поросят ТУ 9384-116-00494185-96;

- против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов

. инактивированная лиофилизированная ТУ2634-002-00482861-99. Разработана и внедрена 'в производство технология получения гидролиза-тов из белоксодержащего сырья непищевого происхождения для производства универсальной питательной среды (патент № 2103375 от 27 января 1998 года). Усовершенствованы, используемые в ветеринарной практике, вакцины:

- формолвакцина против пастереллеза овец и свиней преципитированная. Извещение № 3 об изменении ТУ 46-21-185-84;

- вакцина эмульгированная против пастереллеза норок.» 2 об изменении ТУ 10.19.30-88;

- формолвакцина против пастереллеза кроликов. Извещение № 1 об изменении ТУ 46-21-47-84.

- вакцина эмульгированная против пастереллеза нутрий. Извещение № 2 об изменении ТУ 10-19-448-87.

2. Для промышленного культивировг>;.:я пастерелл использовать универсальную питательную среду, а для изготовления вакцин - отработанные техно-

логические режимы.

Для контроля активности вакцин использовать:

- 2-3-месячных цыплят при оценке вакцины живой сухой для кур и инакти-вированной сорбированной для птиц;

- кроликов массой 1,5-2,0 кг для контроля инактивированной лиофи-лизированной вакцины против пастереллеза крупного рогатого скота и буйволов, а также ассоциированной вакцины против пастереллеза и стрептококкоза нутри й.

Сердечно благодарю за оказание практической помощи в выполнении наших исследований сотрудников ФГУП «Ставропольская биофабрика» и ВГНКИ, в частности профессора Ситькова В.И., профессора Панина А.Н., профессора Малахова Ю.А., профессора Душук Р.В., профессора Тутова И.К., начальника ОБВК Каменского Н.И., начальника бактериального производства Ге-ладзе В.Ш., микробиологов Лемешко Л.В., Усову Н.Б., Солдатову Л .А.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ Д ИССЕРТАЦИИ

1. И.К. Тутов, В.И. Заерко. - Совершенствование биотехнологии изготов пеняя вакцин из аттенуированных штаммов /Материалы Всероссий ской научно-производственной конференции к 100-летию биологиче ской промышленности России, г. Курск, 1996, с.122-123.

2. В.И.Ситьков, В.И.Заерко.-Технологическая обвязка биоферментеро для выращивания микроорганизмов в стерильных условиях. Матери; лы Всероссийской научно-производственной конференции к 10( летаю биологической промышленности России, г. Курск, 199 с.121-122.

3. В.И. Ситыссв, И.К. Тутов, В.И. Заерко.- Достижения Ставропольем биофабрики в решении проблемы борьбы с инфекционными заб леваниями животных / Журнал "Вестник ветеринарии", 1996, №17, с.

4. Ю.А,Малахов, А.Н.Панин, Р.В.Душук, Т.Н.Мохина, В.И.Заерко,- Ва цина против сальмонеллеза, пастереллеза и стрептококкоза порой ТУ 9384-116-00494185-96. 30.04.1997 г.

5. A.Borisenkova, T.Rochdesyvenskaya, V.Gavrilova, A.Lebede-V.Zacrko - The new approachles to create the bird Pasteurellosis vacci lOth Europen poultry conference "The poült-ry Industry Towards the 21 Centure", Jerusalem, Israel, june 21-26,1998, p.80,85

6. В. И. Заерко - Разработка технологии промышленного изготовлеь . инактиБированной сорбированной вакцины против пастереллеза пт

/Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1998, № , с.8-9.

7. В.И. Ситьков, В.И. Заерко.- Опыт приготовления и оценка качества социированной вакцины против колибактериоза и пастереллеза п /Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1998, № , с. 10-11.

8. В.Ш. Геладзе, В.И. Ситьков, В.И. Заерко И.К. Тутов, - Изыскание у версальных питательных сред для культивирования аэробных и ;

эробных микроорганизмов /Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1999, № ,с.30-31.

9. В.И. Ситьков, И.К. Тутов, А.П. Сурмило, Р.Г. Колпакова, В.И. Заерко-Способ получения гидролизатов и использование их при изготовлении питательных сред для культивирования организмов. Патент №2103375 от 27 января 1998 г.

10.В.И. Заерко.- Комплексная профилактика пастереллеза и других инфекций нутрий / Материалы 2-ой региональной конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе", п. Персиановский, 1999, с. 14-15.

11.В.И. Заерко.- Совершенствование технологии получения вакцин для специфической профилактики пастереллеза кроликов / Материалы 2-ой региональной конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе", п. Персиановский, 1999,с.14-15.

12.А.А. Раевский, М Я. Ярцев, Л.В. Анасимова, A.A. Нежута, Е.С. Сервис, В.И. Ситьков, Н.И. Каменский, Л Ю. Жаренко, В.И. Заерко,- Получение сухих вакцин против пастереллеза птиц непрерывным способом /Журнал "Ветеринария", 1999, №3, с. 24-25.

13.В.И. Заерко,- Перспективность технологии изготовления и применения лиофилизиро ванной вакцины против пастереллеза крупного рогатого скота / Материалы Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии - вклад в науку и практику XXI века", Ставрополь, 1999. с.43-44.

14.И.К. Тутов,' В.И. Ситьков, А.П. Сурмило, В.И. Заерко- Научно-практическое оббснование способа получения гидролизатов из отходов биофабричного и инкубаторского производства /Материалы Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии -

вклад в науку и практику XXI века", Ставрополь, 1999. с.82-83

15.В.И. Заерко В.И. Ситьков, И.К. Тутов - Перспективность технологий изготовления и применения живых вакцин для профилактики саль-монеллезов и пастереллезов / Материаг ' Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии - вклад в науку и практику XXI века", Ставрополь, 1999. с.86-87.

16.В.И. Заерко, В.И. Ситьков.-Мобильность технологии производства биопрепаратов - основа успешной борьбы с инфекционными заболевг ■ ниями животных / Материалы Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии - вклад в науку и практику XXI зека", Ставрополь, 1999. с. 89-90.

17.В.И. Ситьков, В.И. Трухачев, И.К. Тутов, В.И. Заерко.- Экологическая безопасность производства ветеринарных препаратов / Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1999, №, с.3-5.

18.Р.В.Душук, в.И.Заерко, В.Ш.Геладзе Л.В.Лемешко,- Вакцина против пастереллеза крупного рогатого сиг-1 и буйволов инактивированная лиофилизированная ТУ 2634-002-00482861-99. • '

19.В.И. Заерко И.К. Тутов, В.И. Ситьков. В.А. Мартынов, В.И. Заерко.-Устройство и использование ферментеров (биореакторов) при производстве ветеринарных препаратов /Учебное пособие, Ставрополь, 1999г.

20.В.И. Ситьков, И.К. Тутов, В.И. Заерко В.А. Мартынов.-Методические указания по использованию правил GMP при производстве биопрепаратов /Ставропольская ГСХА, Ставрополь,. 1999г.

21.В.И. Ситьков, В.И. Заерко A.C. Бакумов, Н.И. Каменский - Отработка технологических параметров производства биопрепаратов под инертным газом в мелкодозной расфасовке /Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1999, № , с. 24-25.

22.А.П. Сурмило, В.И. Заерко В.А. Мартынов, В.И. Ситьков, Н И. Каменский - Валидация оборудования и технологических процессов при прошводстве биопрепаратов по требованиям СМР /Сборник научных трудов Ставропольской ГСХА, 1999, № , с. 30-31.

23.Ю.А.Малахов, В.И.Заерко, Р.Ь.Душук, А.Н.Панин - Вак ..на против пастереллеза и стрептоккоза нутрий. ТУ 9384-179-00494189. 02.021999г.

24.В.И.Заерко, Ю.А.Малахов, Р.В.Душук,- Сухая живая вакцина против пастереллеза кур. ТУ 9384-002-00494189-00.2000 г.

ЗАКАЗ »452 ТИРАЖ 100»«» П»л 3„2 СтГСХА

Защитные, гуморальные и клеточно-опосредованные иммунные ответы у телят, иммунизированных мультиэмульсионной вакциной против геморрагической сепсиса

Была приготовлена ​​мультиэмульсионная (ME) вакцина против инфекции Pasteurella multocida (P52) крупного рогатого скота, и была изучена эффективность с точки зрения иммунитета к прямому заражению, продолжительности этого иммунитета до 1 года и роли гуморальных и клеточно-опосредованных иммунных механизмов. были изучены. Вакцина ME оказалась стерильной, безопасной и действенной при испытании на кроликах и телятах.Девятнадцать телят иммунизировали однократной дозой 4 мл ME вакцины внутримышечно. Группу этих телят заражали вирулентным P. multocida (P52) (10 (-1) 18-часовая бульонная культура) подкожно через 21 день, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев и 1 год. Все иммунизированные телята выдержали контрольную инфекцию и показали 100% защиту. Гуморальный иммунный ответ измеряли с помощью теста непрямой гемагглютинации (IHA) и иммуноферментного анализа (ELISA). Статистически значения ELISA превосходили значения IHA из-за небольшого коэффициента вариации.Было зарегистрировано падение средних титров антител в течение 24 часов, 48 часов после заражения, тогда как отмечалось устойчивое увеличение титра через 72 часа до 10 дней. Средний титр до заражения у животных коррелировал с выживаемостью животных. Гуморальные антитела выявлялись уже через 7 дней после иммунизации и сохранялись до 1 года после иммунизации. Тест на ингибирование миграции лейкоцитов показал ингибирование миграции> 20% в течение всех периодов до и после заражения у животных, что свидетельствует об участии клеточно-опосредованного иммунного механизма в защите.Наши результаты показали, что как гуморальный, так и клеточно-опосредованный иммунный ответ способствует защите вакцинированных животных. Результаты этих исследований вакцины ME показали, что ее можно успешно использовать для эффективного контроля геморрагической септицемии.

9 CFR § 113.69 - Вакцина Pasteurella Multocida для крупного рогатого скота. | CFR | Закон США

§ 113.69 Вакцина Pasteurella Multocida для крупного рогатого скота.

Вакцина Pasteurella Multocida для крупного рогатого скота должна быть приготовлена ​​как высушенная живая культура бактериальной вакцины на основе авирулентного или модифицированного штамма Pasteurella multocida бычьего происхождения.Для производства вакцины следует использовать только Master Seed, признанный чистым, безопасным и иммуногенным. Все серии вакцины должны быть приготовлены с первого по пятый проход от Master Seed.

(a) Семя-мастер должен соответствовать применимым общим требованиям, установленным в § 113.64, и требованиям этого раздела.

(b) Каждая партия семян-мастера, используемая для производства вакцины, должна быть проверена на иммуногенность. Иммуногенность отобранного количества бактерий из партии Master Seed устанавливается следующим образом:

(1) Пятнадцать чувствительных к Pasteurella multocida телят должны использоваться в качестве подопытных животных (10 вакцинированных и 5 контрольных) для каждого пути введения, рекомендованного на этикетке.

(2) Среднее арифметическое количество колониеобразующих единиц вакцины, полученной в результате наивысшего пассажа основного посевного материала, должно быть установлено до проведения теста на иммуногенность. 10 телят, которые будут использоваться в качестве вакцинированных, должны быть введены в соответствии с рекомендациями, указанными на этикетке, заранее определенным количеством вакцинных бактерий. Пять контрольных телят должны содержаться отдельно от вакцинированных. Для подтверждения расчета дозировки следует установить среднее арифметическое значение путем проведения пяти повторных титрований образца используемой бактериальной вакцины.Только чашки, содержащие от 30 до 300 колоний, считаются действительным тестом.

(3) Вакцинированные и контрольные животные должны быть исследованы, а их средняя температура тела определена перед заражением. От четырнадцати до двадцати одного дня после вакцинации вакцинированные и контрольные вакцины должны быть заражены респираторным путем (вирулентной) пневмонией, продуцирующей культуру Pasteurella multocida, и наблюдаться в течение 4-10 дней. Культура контрольного заражения и инструкции по подготовке к использованию должны быть предоставлены или утверждены Службой инспекции здоровья животных и растений.

(4) Удовлетворительное заражение должно подтверждаться в контроле прогрессированием клинических признаков, соответствующих инфекции дыхательной системы после заражения, включая, помимо прочего, острое заболевание с более высокой температурой тела и частотой дыхания, слезотечение, слизистый экссудат из носа, одышку на выдохе, тахипноэ, легочные хрипы и кашель, которые могут закончиться смертью; умирание, депрессия с анорексией; диарея со значительной потерей веса; или любое сочетание этих симптомов.

(5) У всех телят оценивают реакцию поражения легких на заражение. Поражения легких будут оцениваться при аутопсии телят, которые не выдержали заражения. Выжившие телята будут умерщвлены на 4-10 день после заражения, а повреждения легких оцениваются при вскрытии. Баллы поражения легких будут использоваться при оценке ответа на воздействие заражения. Если нельзя продемонстрировать значительную разницу в показателях поражения легких между вакцинированными и контрольными вакцинами с использованием системы баллов, одобренной Службой инспекции здоровья животных и растений, Master Seed является неудовлетворительным.

(6) До того, как Служба инспекции здоровья животных и растений предоставит разрешение на использование новой партии семян-эталонов, необходимо внести изменения в схему производства.

(c) Требования к испытаниям для выпуска. Каждый серийный и субсерийный выпуск должен соответствовать применимым общим требованиям, установленным в §§ 113.8 и 113.64, а также требованиям этого параграфа. Любые серийные или дополнительные серии, признанные неудовлетворительными в результате предписанного теста, не подлежат разглашению.

(1) Тест безопасности. Образцы готовой продукции из каждой серии или первой дополнительной серии должны быть проверены на безопасность на телят, как это предусмотрено в §§ 113.41 (a) и 113.41 (b), за исключением того, что эквивалент двух доз вакцины должен использоваться и вводиться способом, рекомендованным на этикетке.

(2) Требования к количеству бактерий. Конечные образцы контейнеров с готовым продуктом должны быть проверены на количество бактерий с использованием метода, используемого в параграфе (b) (2) этого раздела. В каждом серийном и субпробном опыте следует проводить два повторных титрования. Каждый образец должен быть регидратирован сопровождающим его стерильным разбавителем до объема, указанного на этикетке.Чтобы иметь право на выпуск, в каждом серийном и субпоследовательном опыте должно быть количество бактерий, достаточно большее, чем у вакцины, используемой в тесте на иммуногенность на дозу, установленную, чтобы гарантировать, что при тестировании в любое время в течение срока годности каждое серийное и субпоследовательное должно иметь количество бактерий как минимум в два раза больше, чем в тесте на иммуногенность.

Повышение активности и эффективности вакцины против геморрагической септицемии крупного рогатого скота с помощью наночастиц алюминия и гемоцианина блюдца улитки, а также подход к разработке стратегии DIVA

Аноним (2008).Геморрагическая септицемия в Руководстве по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных. Наземное руководство МЭБ Том. 2, 6-е изд. (Париж, Франция: МЭБ), 739-751.
Окутюрье, Дж., Дюпюи, Л. и Ганн, В. (2001). Адъюванты, предназначенные для ветеринарных и человеческих вакцин. Vaccine 19, 2666–2672.
Benkirane, A. and De Alwis, M.C.L. (2002). Геморрагическая септицемия, ее значение, профилактика и борьба в Азии. Вет. Med. 47, 234-240.
De Alwis, M.C.L. (1992). Геморрагическая септикемия - общий обзор.Br. Вет. J. 148, 99-112.
Фрей, А., Нейтра, М.Р. и Роби, Ф.А. (1997). Конъюгаты наночастиц оксида алюминия пептомера в качестве кандидатов в системные вакцины и вакцины для слизистых оболочек: синтез и характеристика конъюгата, полученного из домена C4 gp120 ВИЧ-1MN. Bioconjugate Chem. 8, 424−433.
Харрис, Дж. Р. и Маркл, Дж. (2001). Гемоцианин моллюска улитки (KLH): биомедицинский обзор. Микрон 30, 597–623.
Джеймс К.М., Фунг Ю.Я., Мэнсфилд Дж. П., Фенвик С.Г. и Эллис Т.М. (2007).Использование столбнячного анатоксина в качестве стратегии дифференциации инфицированных от вакцинированных животных (DIVA) для серологического надзора за вакцинацией против вируса птичьего гриппа у домашней птицы. Vaccine 25 (31), 5892-5901.
Лалринлиана, С.С., Самбаял, Д.С., Соне, Г.Л. (1988). Эффективность различных адъювантов в вакцине Pasteurella multocida. Indian J. Comp. Microbiol. Иммунол. Заразить. Дис. 9, 135-140.
Леру-Рулс, Г. (2010). Неудовлетворенные потребности современной вакцинологии: адъюванты для улучшения иммунного ответа. Вакцина 28S, C25 – C36.
Leyman, B., Boyen, F., Van Parys, A., Verbrugghe, E., Haesebrouck, F., Pasmans, F. (2011). Мутации LPS Salmonella Typhimurium для использования в вакцинах, позволяющие дифференцировать инфицированных и вакцинированных свиней. Vaccine 29 (20), 3679-3685.
Markl, J., Lieb, B., Gebauer, W., Altenhein, B., Meissner U. and Harris, J.R. (2001). Носители морской противоопухолевой вакцины: структура гемоцианинов моллюсков KLH и HtH. J. Cancer Res. Clin. Онкол. 127 (Приложение 2), R3-R9.
Морено, А., Брокки, Э., Лелли, Д., Гамба, Д., Транквилло, М. и Кордиоли, П. (2009). ELISA-тесты на основе моноклональных антител для выявления антител против нейраминидазы подтипов 1, 2 и 3 вирусов птичьего гриппа в сыворотке крови птиц. Vaccine 27 (36), 4967-4974.
Ойеларан, О. и Гилдерслив, С.Дж. (2010). Оценка реакции антител человека на гемоцианин лимфы улитки на углеводном микрочипе. J. Proteomics - Clinical Applications 4 (3), 285–294.
Пик, Л.Дж., Миддо, К.Р. и Беркланд, К. (2008). Нанотехнологии в доставке вакцин.Adv. Доставка лекарств Rev. 60, 915–928.
Sun, Z., Wang, W., Wang, R., Duan, J., Hu, Y., Ma, J., Zhou, J., Xie, S., Lu, X., Zhu. З. (2010). Наночастицы алюминия усиливают противоопухолевый иммунный ответ, вызванный вакциной из опухолевых клеток. Рак Нано. 1 (1-6), 63-69.
Томленович, Л. и Шоу, К.А. (2011). Алюминиевые адъюванты для вакцин: безопасны ли они? Curr. Medicinal Chem. 18, 2630-2637.
Уттенталь, А., Парида, С., Расмуссен, Б.Т., Патон, Д.Д., Хаас, Б., Дандон, Г.В. (2010). Стратегии дифференциации инфекции у вакцинированных животных (DIVA) от ящура, классической чумы свиней и птичьего гриппа.Эксперт Rev. Vaccines 9 (1), 73-87.
Верма Р. и Джайсвал Т. Н. (1998). Вакцины от геморагической сепсиса. Vaccine 16 (11-12), 1184-1192.
Уолш Е.П., Барон М.Д., Андерсон А. и Барретт Т. (2000), Разработка генетически маркированной рекомбинантной вакцины против чумы крупного рогатого скота, экспрессирующей зеленый флуоресцентный белок. J. Gen. Virol. 81, 709–718.

Стандартизация и разработка инактивированной адъювантной вакцины Pasteurella multocida против септического пастереллеза свиней

В свиноводстве вызывает озабоченность септический пастереллез, вызываемый Pasteurella multocida (B: 2), для которой необходима эффективная вакцина.Здесь мы приготовили вакцину с двойной эмульсией (DE), содержащую 2,5 мг инактивированной антигенной массы полевого штамма свиней (B: 2) (названного сороном), выделенного в результате вспышки смерти от сепсиса у свиней и штамма крупного рогатого скота P. multocida P 52 (B : 2) и изучили их эффективность с точки зрения иммунитета к прямому заражению, продолжительности иммунитета и роли гуморального и клеточно-опосредованного иммунитета. Оба этих штамма показали наличие генов вирулентности hgbB, pfhA, nanH, ptfA и tbPA. Анализ последовательности полос продукта 760 п.н. с использованием капсульных праймеров был получен для сорона, и P 52 выявил 99.2% гомологии между этими двумя штаммами, что указывает на различия на генетическом уровне. Гены nanH и pfhA сорона обладали 99,2% и 92,7% гомологией с P 52, соответственно, предполагая различия между этими двумя штаммами на генетическом уровне. Анализ клеточной стенки обоих штаммов с помощью SDS-PAGE показал присутствие примерно 15 основных белковых полос, тогда как вестерн-блоттинг с сывороткой свиней, иммунизированной сороном на 21 день, показал наличие полипептидов 16, 33, 47, 63 и 83 кДа в обоих штаммах. Продолжительность иммунных ответов контролировали через 3, 6 и 9 месяцев после иммунизации свиней.Путем прямого заражения свиньи показали, что вакцины обладают защитным действием через 21 день и вплоть до 270-го дня после иммунизации. Вакцины вызывали сывороточный IgG-ответ ELISA, пик которого достигал 60 DPI, который постепенно снижался до 270-го DPI в обеих вакцинах. Индекс стимуляции, измеренный тестом на пролиферацию лимфоцитов (LTT), показал, что вакцина, индуцированная клеточно-опосредованным иммунным ответом и в целом процентный индекс стимуляции (SI) был выше у свиней, иммунизированных сороновой вакциной, через 15 дней после заражения.Результаты показали, что штамм свиней (сорон) будет потенциально гомологичным штаммом P. multocida для вакцины против пастереллеза вместо штамма P. multocida P 52 крупного рогатого скота.

Система предупреждения чрезвычайных ситуаций для здоровья животных (EMPRES-AH)

Геморрагическая септицемия (ГС) является острым, смертельным, септицемическим заболеванием. болезнь крупного рогатого скота и буйволов ( Bubalus bubalis ) вызвано грамотрицательной бактерией Pasteurella multocida, серотипы B: 2 и E: 2.Организм способен выжить во влажной почве и воде до 2-3 недель.

Крупный рогатый скот и буйволы являются основными пораженными видами. и буйволы считаются очень восприимчивыми к этому заболеванию. Наиболее серьезно страдают животные в возрасте от 6 до 24 месяцев. затронуты во время вспышек. Заболевание зарегистрировано в свиней, лани ( Dama dama ) и спорадически в лошади, ослы, слон и як.

Борьба с HS лучше всего достигается за счет надлежащей практики животноводства, в том числе приемлемый план питания, повышенная осведомленность болезни, систем раннего оповещения и организованной вакцинации программы. Были разработаны разные типы вакцин. Типы вакцин включают инактивированные вакцины с масляным адъювантом. обеспечивает адекватную защиту между 9-12 месяцами и осажденными квасцами вакцины с защитой до 6 месяцев.

Вакцинация крупного рогатого скота против HS не проводится. во многих странах Африки, где болезнь носит эндемический характер. За последнее десятилетие было проведено большое количество исследований. в Южной Азии с целью производства масляных адъювантных вакцин низкая вязкость. Шри-Ланка и Индонезия успешно использовали понижает уровень ланолина, эмульгатора, в попытке для снижения вязкости.

Makale »DergiPark

Pasteurella multocida - грамотрицательная бактерия с широким кругом хозяев и повсеместным распространением - серьезная проблема для уток, и лучший метод борьбы с ней - вакцинация местными штаммами. Настоящее исследование было проведено для сравнения иммунопотентности вакцин с использованием биопленок P. multocida и организмов, усиленных капсулами, с обычными организмами, выращенными в бульоне, у 1-месячных утят, путем измерения гуморального иммунного ответа и защиты, обеспечиваемой каждой вакциной во время гомологичного заражения. вирулентные организмы.Бактериновые вакцины с масляным адъювантом, инактивированным формалином, получали из Pasteurella multocida A: 1. Их выращивали в обычном бульоне, среде для улучшения капсул и в режиме биопленки. Четыре разные группы птиц вакцинировали соответствующими вакцинами внутримышечно, и иммунопотентность вакцин оценивали с использованием пассивной гемагглютинации (PHA) и гомологичного заражения вирулентными организмами. Титры PHA, полученные для группы биопленочной вакцины на 14-й день после вакцинации, были намного выше, чем для других 2 групп.Они также обеспечивали на 10% большую защиту при заражении средними дозами «смертельной дозы» 200 и 100. Вакцина, усиленная капсулами, и обычный бактерин показали аналогичные результаты.

Pasteurella multocida - грамотрицательная бактерия с широким кругом хозяев и повсеместным распространением - серьезная проблема для уток, и лучшим методом борьбы с ней является вакцинация штаммами, преобладающими в данной местности. Настоящее исследование было проведено для сравнения иммунопотентности вакцин с использованием биопленок P. multocida и организмов, усиленных капсулами, с обычными организмами, выращенными в бульоне, у 1-месячных утят, путем измерения гуморального иммунного ответа и защиты, обеспечиваемой каждой вакциной во время гомологичного заражения. вирулентные организмы.Бактериновые вакцины с масляным адъювантом, инактивированным формалином, получали из Pasteurella multocida A: 1. Их выращивали в обычном бульоне, среде для улучшения капсул и в режиме биопленки. Четыре разные группы птиц вакцинировали соответствующими вакцинами внутримышечно, и иммунопотентность вакцин оценивали с использованием пассивной гемагглютинации (PHA) и гомологичного заражения вирулентными организмами. Титры PHA, полученные для группы биопленочной вакцины на 14-й день после вакцинации, были намного выше, чем для других 2 групп.Они также обеспечивали на 10% большую защиту при заражении средними дозами «смертельной дозы» 200 и 100. Вакцина, усиленная капсулами, и обычный бактерин показали аналогичные результаты.

Подробная ошибка IIS 7.5 - 404.11

Сводка ошибок

Ошибка HTTP 404.11 - не найдено

Модуль фильтрации запросов настроен на отклонение запроса, содержащего двойную escape-последовательность.

Подробная информация об ошибках
Модуль RequestFilteringModule
Уведомление BeginRequest
Обработчик StaticFile
Код ошибки 0x00000000
Запрошенный URL http: // gpvec.unl.edu:80/elective_files/weaning%20management/pre-conditioning%20&%20weaning%20lit/vaccination%20strategies/brd-mh&pm-maternalantibiodies-confer.pdf
Физический путь C: \ Students \ Electives \ отлучение% 20 менеджмент \ предварительное кондиционирование% 20 и% 20 отлучение% 20lit \ вакцинация% 20strategies \ brd-mh & pm-maternalantibiodies-confer.pdf
Метод входа в систему Еще не определено
Пользователь входа в систему Еще не определено
Наиболее вероятные причины:
  • Запрос содержал двойную escape-последовательность, а фильтрация запросов настроена на веб-сервере, чтобы отклонять двойные escape-последовательности.
Что вы можете попробовать:
  • Проверьте параметр configuration/system.webServer/security/[email protected] в файле applicationhost.config или web.confg.
Ссылки и дополнительная информация Это функция безопасности. Не изменяйте эту функцию, пока не полностью осознаете масштаб изменения. Перед изменением этого значения необходимо выполнить трассировку сети, чтобы убедиться, что запрос не является вредоносным. Если сервер разрешает двойные escape-последовательности, измените конфигурацию / system.Параметр webServer / security / requestFiltering @ allowDoubleEscaping. Это могло быть вызвано неправильным URL-адресом, отправленным на сервер злоумышленником.

Просмотр дополнительной информации »

.

1 thought on “Вакцина эмульгированная против пастереллеза крс: ВАКЦИНА ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, БУЙВОЛОВ И ОВЕЦ инструкция по применению, состав, показания, противопоказания, побочные эффекты – эмульсия (инактивированная вакцина)

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *